1、a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中（或长时间保留在柱中）。b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应（特殊情况除外）。c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命（可运用提高温度的方法降低流动相的黏度）。d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。3、流动相流速的选择： 因
2、柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1mlmin，对于内径为4.0mm柱，流速0.8mlmin为佳。 当选用最佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间（如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量）。 注意： a由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系（必须使用乙腈的场合除外）。 b对于正相柱推荐使用沸程为30-60的石油醚或提纯后的己烷作流动相，没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水（电阻率大于18兆欧），去离子水及双蒸水中含有酚类杂
3、质，有可能影响分析结果。 c含水流动相最*在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最好加入叠氮化钠，防止细菌生长。 d流动相要求使用0.45 m滤膜过滤，除去微粒杂质。 e使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。大型分析仪器的维护56 作者:1 正确使用:操作人员应认真阅读仪器操作说明书，熟悉仪器性能，掌握正确的使用方法。要严格按照操作规程开、关仪器，使仪器始终保持在良好运行状态。要重视配套设备和设施的使用和维护检查，比如气体发生器、钢瓶、电源、水源系统等，避免仪器在工作状态发生断气、断电、断水情况。2 环境要求:精密仪器对环境有很高的
4、要求。首先要有一个整洁的实验室，若仪器或周围环境积满了灰尘，一旦灰尘进入仪器的光路系统必然会影响到仪器的灵敏度。灰尘还常常会造成零部件间的接触不良或由于吸期导致电气绝缘性能变差而影响到仪器的正常使用。因此说，清洁工作看似普通却是仪器维护保养中的一件不可或缺的重要工作。 环境的温、湿度对仪器的影响很大。由于电子元器件特别是集成电路要求在合适的温度范围内工作因此，为保证仪器的精度和延长其使用寿命，应让仪器始终处于符合要求的环境温度中。仪器对于环境湿度的要求也应给予足够的重视，特别是在像上海这样的地理位置，雨季时房内湿度往往偏高，而潮湿的环境极易造成器件的生锈以致损坏，造成故障。潮湿的环境还容易使仪
5、器的绝缘性能变差，产生不安全的因素。平时可以利用空调机的去湿功能来控制实验室的湿度，必要时应专门配备去湿机。对仪器内放置的干燥剂一定要定期检查，一旦失效要及时更换。 值得一提的另一点是仪器的防腐蚀问题。分析仪器是与化学物质打交道的，常易造成化学物品残留在仪器上的情况。此外，许多挥发性的化学物质一旦接近精密仪器，就可能对仪器产生腐蚀作用。时间长了无形之中就会损坏某些零部件。所以，要维护好仪器就应该做到每次使用完毕及时做好清洁维护工作，不让化学物品残留在仪器上c有些化学溶剂肉眼不易察觉，但会侵蚀印刷线路板，必须引起注意。要确保精密仪器远离腐蚀源，平时应注意做好环境监察工作。 防震也是仪器对环境的基
6、本要求之一。精密仪器应安放在坚实稳固的实验台或基座上。3.电源要求:大型精密仪器对电源的要求较高良好的供电对于仪器的精度和稳定性极为重要。来自电网的浪涌电压及瞬变脉冲对仪器危害极大，会破坏扫描电镜和计算机工作，造成信号图像畸变，还会干扰前置放大器、微电流放大器等组件工作。尽管仪器一般自身都具有电源稳压功能，还是应保证供电电源的电压稳定、波形失真小和具有正确良好的接地等。大型仪器应做到单独深埋接地并具有良好的抗干扰措施，比如采用隔离变压器等以保证仪器的灵敏度和可靠性。不稳定的电源会引起气相色谱仪、液相色谱仪和极诺仪等工作时基线不稳定，测试难以得到正确的结果。 为防止仪器、计算机在工作中围突然停电
7、而造成损坏或数据丢失，建议配用高可靠性的UPS电源，这样既可改善电源性能又能在非正常停电时做到安全关机。4.定期通电:在仪器较长期的停用期间，维护保养工作同样重要切不可轻视。这期间应做到每周1至2次开机通电，既防潮又能使仪器始终保持在工作状态，不致于在长期停机后仪器的性能指标发生明显的变化。这一点对仪器来说很有益处。5 定期校验:分析仪器用于剖析、测试和检验样品，是分析人员的主要工具，它能起到人眼无法起到的作用把物质的微观世界充分展现在人们眼前。仪器所提供的数据，往往要用于质控、法律、医疗、贸易等场合应力求检测结果的准确可靠。要做到这一点，除了正确的分析方法仪器本身符合要求也是必要的前提。因此
8、，应当按照国家计量检定规程或仪器说明书提供的方法和标准（图谱）对仪器定期进行自行校验和委托有资质单位校验使仪器始终处于计量受控状态，保证量值的准确可靠。对用于贸易结算、安全防护、医疗卫生、环境监测及对社会公众服务需要出具检验报告的仪器则应按计量法规定实行强检。6 做好记录:应该认真做好仪器的工作记录，内容包括仪器状态、开机或维修时间、操作维修人员、工作内容及其他值得记录备查的内容。这一方面可为将来的统计工作提供充分的数据，另一方面也可掌握某些需定期更换的零部件的使用情况，有助于辨别是正常消耗还是故障荧光分光光度计简介 2007-10-21 23:06 作者: huanghewolf 来源:一.
9、 光分光光度计的主要部件 由激发光源、激发单色器（置于样品池前）和发射单色器（置于样品池后）、样品池及检测系统组成。其结构如图所示。二 仪器的校正（1）灵敏度校正：荧光分光光度计的灵敏度可用被检测出的最低信号来表示，或用某一对照品的稀溶液在一定激发波长光的照射下，能发射出最低信噪比时的荧光强度的最低浓度表示。由于影响荧光分光光度计灵敏度的因素很多，同一型号的仪器，甚至同一台仪器在不同时间操作，所得的结果也不尽相同。因而在每次测定时，在选定波长及狭缝宽度的条件下，先用一种稳定的荧光物质，配成浓度一致的对照品溶液对仪器进行校正，即每次将其荧光强度调节到相同数值（50或100）。如果被测物质所产生的
10、荧光很稳定，自身就可作为对照品溶液。紫外-可见光范围内最常用的是1 g/ml的硫酸奎宁对照品溶液（0.05 mol/L）硫酸中。（2）波长校正：若仪器的光学系统或检测器有所变动，或在较长时间使用之后，或在重要部件更换之后，应该用汞灯的标准谱线对单色器波长刻度重新校正，这一点在要求较高的测定工作中尤为重要。（3）激发光谱和荧光光谱的校正：用荧光分光光度计所测得的激发光谱或荧光光谱往往存在较明显的误差，其原因较多，最主要的原因有：光源的强度随波长的改变而改变、每个检测器（如光电倍增管）对不同波长光的接受程度不同及检测器的感应与波长不呈线性。尤其是当波长处在检测器灵敏度曲线的陡坡时，误差最为显著。因
11、此，在用单光束荧光分光光度计时，先用仪器上附有的校正装置将每一波长的光源强度调整到一致，然后以表观光谱上每一波长的强度除以检测器对每一波长的感应强度进行校正，以消除误差。目前生产的荧光分光光度计大多采用双光束光路，故可用参比光束抵消光学误差。三、荧光分析新技术简介1激光荧光分析 : 激光荧光法与一般荧光法的主要区别在于使用了单色性极好，强度更大的激光作为光源，因而大大提高了荧光分析法的灵敏度和选择性，特别是可调谐激光器用于分子荧光具有很突出的优点。2时间分辨荧光分析 是利用不同物质的荧光寿命不同，在激发和检测之间延缓的时间不同，以实现分别检测的目的。时间分辨荧光分析采用脉冲激光作为光源。如果选
12、择合适的延缓时间，可测定被测组分的荧光而不受其他组分、杂质的荧光及噪声的干扰。目前已将时间分辨荧光法应用于免疫分析，发展成为时间分辨荧光免疫分析法。3同步荧光分析 在荧光物质的激发光谱和荧光光谱中选择一适宜的波长差值出（通常选用与之差），同时扫描发射波长和激发波长，得到步荧光光谱。若以值相当于或大于斯托克斯位移，就能获得尖而窄的同步荧光峰。因荧光物质浓度与同步荧光峰峰高呈线性关系，故可用于定量分析，此法的灵敏度较高。一些分析仪器的检测极限52 作者:分析方法 用途 检测限（g） 参考价格（千美元） 气相色谱 有机及部分无机化合物 10-710-13 0.510 高效液相色谱 各种化合物 10-
13、610-9 225 等离子体色谱 有机物及某些亲电子无机物 10-12 3040 红外光谱 各种吸收红外的化合物 10-6 2200 紫外 共轭双键及芳香族化合物 10-10 质谱 各种元素，多数化合物 10-11 20250 核磁共振谱 有机结构分析 10-5 原子吸收光谱 金属元素 10-910-12 0.520 中子活化分析 各种元素 10-12 250 电子光谱 多数元素，某些化合物 10-7 6250 X射线荧光 原子序数大于12的元素 10-7 50150 离子散射光谱 各种元素，某些有机及无机化合物 10-15 4065 极谱 多数金属及其化合物，某些无机物 10-6 0.515
14、常用固定液11 作者:一、非极性 1、100%Dimethyl polysiloxane，100%聚二甲基硅氧烷，商品名：AC1，OV-101，OV-1，DB-1，SE-30，HP-1，RTX-1，BP-1二、弱极性2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane, 5%二苯基（95%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC5，SE-523、5% Phenyl 1%vinyl dimethyl polysiloxane，5%二苯基1%乙烯基（94%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-5，DB-5，SE-54，HP-5，RTX-5，BP-5 注：2、3常无严格区分，通常混称。三、中等极性4、5
15、0%Phenyl dimethyl polysiloxane, 50%二苯基（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-17，HP-50，RTX-505、14%Cyanopropyl phenyl polysiloxane, 14%氰丙基苯基（其中7%氰丙基7%苯基）（86%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC10，OV-1701，DB-1701，RTX-1701 6、50% Cyanopropyl phenyl polysiloxane，50%氰丙基苯基（其中25%氰丙基25%苯基）（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC225，OV-225，BP-225，DB-225，HP-225，RTX-225 四
16、、强极性7、polyethylene glycol,聚乙二醇，商品名：AC20，PEG20M，HP-INNOWAX（FFAP是其与2-硝基对苯二甲酸的反应产物）不同试剂的纯度和分级 2007-10-22 09:32 作者:纯度分级帮助我们区分市场上不同试剂。产品的分级是根据命名规则在品名后加上质量名称（如保证纯和超纯）。通常制造商都使用几个普通的质量名称，此外也有制造商会为特殊的产品制定独特的质量名称。本公司的产品纯度分级，理化值只表示标准值，这些百分比和尺度即不是标准，也不是规范。现本公司的化学品分级及用途简述如下：工业纯这类产品适用于不严格的实验室工作，如漂洗、消溶或用作生产中的原材料。合
17、成纯这类产品适用于有机合成和预制的应用。特级纯这类产品适用于普通实验室工作，在大 多数情况下，符合大部分药典（BP,USP，etc.） 标准。药典级这些化学品的纯度符合药典的标准,如（NF,BP, USP, Ph Eur, DAB, DAC, JP, Ph Franc.）分析纯这类产品适用于大多数的分析，研究和 质量质控。优级纯 （GR）这类产品适用于实验室用途，每一批的产品都受到严格的质量控制以保证一致性性的分析结果。这一级等同与大多数制造商的分析级（A.R.），试剂级（R.G.）。ACS试剂ACS试剂符合美国化工协会的分析试剂，广泛的用于研发，质量控制。HPLC试剂这类产品适用于高效液相色
18、谱法，在这类产品有不同的质量，选用不同的质量的试剂是由是否这些试剂将被用于制备色谱法或是用于平行分析或梯度分析。这类产品包括高纯度溶剂可符合要求严格紫外线光吸收值规格和离子对试剂规格。离子对试剂:离子对色层分析法适用于反向色层分析法难于分离的分析物（包括离子化合物），它被用来增加到movil相和离子分析物结合后所形成中性化合物，从而使得分析物易被反相HPLC层析。我们提供特别的HPLC级的阳离子和阴离子对试剂以保证分离过程的顺利进行。农药残留级经过特别检测的溶剂能避免有机杂质的含量超过千分之一。这类溶剂特别用玻璃器具进行了多个步骤的纯化。在瓶内保持内部条件的稳定，避免任何可能的污染。干燥和无水
19、级这类溶剂含水量非常低，适用于分析或有机合成。干燥溶剂传统上是跟据Karl Fischei测定法用于分析水的含量，无水溶剂逐渐成为新的有机物和无机化学研究技术中不可缺少的一部份，在我们目录中，你能发现超干燥溶剂或是带有分子筛的超干燥溶 剂。肽和DNA合成级这些产品的最大特征是低紫外线吸收和低 水份含量。光谱纯这类溶剂有很高的紫外线通透性适用于严格格的IR光谱测试。食品/ FCC级产品符合食品化学法典（FCC）规范和最大杂质含量限制。分子生物学级这类产品保证无酶从而避免了分析过程被干扰，同时这类产品有足够的透明度使之能用于分子生物学中的检测。生物技术/生化级高纯度试剂适用于生化研究和分析，所涉及
20、的临界参数是无抑制剂如微量重金属，酶、辅酶和酶的配体的。微生物级我们提供数百种微生物产品，有些是脱水的培养基辅助剂和其它示范系统。荧光级我们的荧光HPLC级是有梯度的并且是荧光控的，特别适合于用荧光HPLC分析PAH。显微术提供各种类型的用于显微术的化学试剂。PC级特别稳定的四氢呋喃适用于FPC（凝胶渗透色谱法）。因为它不损害peroxoides，这些四氢呋喃用于柱的存储。细胞培养基级细胞培养基级包括细胞培养基，实验标本，生物提取物，选择型和无菌试剂有多种用途。蛋白级蛋白学是用定性和定量的方法在不同的条件下或是不同的生物过程中来比较蛋白。我们提供这方面的试剂。组织学级我们提供适合组织研究的纯度
21、的溶剂和试剂。超纯级超纯级用在无机痕量分析，杂质必需控制在ppt或ppb水平，每一个试剂都会和完整的化验证明书一起递送。电子/ VLSI/ ULSI/ SLSI超大规模集成电路级这些产品用于半导体工业，阳离子，阴离子和粒子的值保证达到ppm 至ppb水平。我们这类化学品适适用于半导体生产过程中所有产品的清洗和蚀刻。ASTM产品分析油的衍生物时，试剂和仪器符合美国材料测试协会的指导方针是有益。低含汞量酸这些产品用于环保分析中汞痕量的分析，以确保没有酸中的汞加入样本中产生干扰。AA和ICP标准溶液1000ppm它们由高纯度的盐和酸，硷制成。通过滴定分析法和重量法来检验浓度。它们被用于原子吸光谱检查
22、，极谱或比色计技术，其精确度参照美国标准和技术研究所标准。容量标准液用于测定容量，其精确度参照美国标准和技术研究所标准。pH缓冲溶液我们提供大量的pH缓冲溶液来校准酸碱度计。其精确度参照美国标准和技术研究所标准。彩色pH 4, 7, 10溶液很容易区分。卡菲试剂卡菲滴定法用于在许多不同的样品中测定水份含量，包括工业和实验室质控。我们的卡菲试剂不含毒性的吡啶。它有很好的缓冲能力，允许更快更稳定到滴定终点TLC显色试剂及配方大全 2007-10-23 10:02 作者: sdyxjs 来源:显色试剂显色剂可以分成两大类：一类是检查一般有机化合物的通用显色剂；另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的
23、专属性显色剂。显色剂种类繁多，本章只能列举一些常用的显色剂。l通用显色剂 硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水（1：1）溶液；硫酸-甲醇或乙醇（1：1.5molL硫酸溶液与0.5-1.5molL硫酸铵溶液，喷后110oC烤15min，不同有机化合物显不同颜色。0.5碘的氯仿溶液 对很多化合物显黄棕色。中性0.05高锰酸钾溶液 易还原性化合物在淡红背景上显黄色。碱性高锰酸钾试剂 还原性化合物在淡红色背景上显黄色。溶液I：1高锰酸钾溶液；溶液：5碳酸钠溶液；溶液I和溶液等量混合应用。酸性高锰酸钾试剂 喷1.6高锰酸钾浓硫酸溶液（溶解时注意防止爆炸），喷后薄层于180oC加热1520min。酸性重铬酸钾试
24、剂 喷5重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC烤薄层。5磷钼酸乙醇溶液 喷后120oC烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。铁氰化钾-三氯化铁试剂 还原性物质显蓝色，再喷2molL盐酸溶液，则蓝色加深。1铁氰化钾溶液；2三氯化铁溶液；临用前将溶液I和溶液等量混合。2专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：（1） 烃类 硝酸银过氧化氢检出物：卤代烃类。溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30过氧化氢1滴。方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。荧光素溴不
25、饱和烃。I荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；5溴的四氯化碳溶液。先喷（I），然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素（曙红），荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。四氯邻苯二甲酸酐芳香烃。2四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯（10：1）的溶液。喷后置紫外光下观察。甲醛硫酸多环芳烃。37甲醛溶液O.2ml溶于浓硫酸l0ml。（2）醇类3，5一二硝基苯酰氯醇类。I2本品甲苯溶液；0.5氢氧化钠溶液；O.002罗丹明溶液。先喷（I），在空气中干燥过夜，用蒸气薰2min，将纸或薄层通过试液（）30s，喷水洗，趁湿通过（）15s，空气干燥，紫外灯下
26、观察。硝酸铈铵I1硝酸铈铵的0.2molL硝酸溶液；N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸（128m1+25m1+15m1）混合液中，用前将（I）与（）等量混合。喷板后于105oC加热5min。香草醛硫酸 高级醇、酚、甾类及精油。香草醛1g溶于硫酸lOOml。喷后于120oC加热至呈色最深。二苯基苦基偕肼 醇类、萜烯、羰基、酯与醚类。本品15mg溶于氯仿25ml中。喷后于110oC加热5lOmin。紫色背景呈黄色斑点。（3）醛酮类品红亚硫酸醛基化合物。I0.01%品红溶液，通入二氧化硫直至无色；0.05molL氯化汞溶液；O.05molL硫酸溶液。将I、以1：1：10混合，用水稀释至l00ml。邻联茴香胺 醛类、酮类。本品乙酸饱和溶液。2，4-二硝基苯肼醛基、酮基及酮糖。I0.4本品的2molL盐酸溶液； 本品O.1g溶于乙醇l00ml中，加浓盐酸lml。喷溶液I或后，立即喷铁氰化钾的2molL盐酸溶液。饱和酮立即呈蓝色；饱和醛反应慢，呈橄榄绿色；不饱和羰基化合物不显色。绕丹宁类胡萝卜素醛类。I1%5%绕丹宁乙醇溶液；25%氢氧化铵或27%氢氧化钠溶液。先喷溶液I，再喷溶液
