1、推荐下载关于海蓬子总黄酮提取工艺优化研究键入文字关于海蓬子总黄酮提取工艺优化研究 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解决您在论文写作中的难题。关于海蓬子总黄酮提取工艺优化研究作者：顾婕， 杨莉萍， 赵微加， 叶辉 张春银【摘要】 目的用单因素和正交实验法优选海蓬子中总黄酮的提取工艺。方法采用乙醇提取工艺，对影响黄酮提取得率的主要因素进行分析，用正交实验法确定海蓬子中总黄酮的提取工艺。结果最佳提取工艺条件：乙醇浓度 70%，提取时间 120min，固液比 1100(gml)，提取温度
2、 80。在该条件下，海蓬子总黄酮得率为 2.86%。结论该方法是提取海蓬子中总黄酮的有效途径。1键入文字【关键词】 海蓬子; 黄酮; 乙醇提取海蓬子 Salicornia bigelovii Tor 属于藜科海蓬子属(又译盐角草属)植物1，直接用海水灌溉。海蓬子种子含油量约 30%，其中不饱和脂肪酸含量高达 90%2，3，其嫩尖组织中的微量皂角苷，可中和人体血液中的脂肪酸，降低血管壁上胆固醇，具有降压、降脂、减肥作用。在欧洲，海蓬子被称为 减肥草 2。除含有人体必需的氨基酸、微量元素、维生素外，其中的胡萝卜素含量超过普通蔬菜的 40 倍4，可作为绿色有机蔬菜、保健食品、保健油等的原料。栽培海蓬
3、子还有益于改良生态环境，它吸收与利用海水水产养殖池排污物的营养;构建生态湿地，为野生禽类提供食物和栖息地等5。海蓬子在我国江苏、辽宁、河北、山东等省都有生长，多见于盐沼地、盐湖旁及海滩。从海蓬子中分离得到槲皮素(quercetin)、槲皮素-3-O- -D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-D-glucoside)、芸香苷(rutin)、异鼠李素-3-O- -D-葡萄糖苷(isorhamnetol-3-O- -D-glucoside) 等黄酮类物质68，但还未见提取工艺研究的报道。为了提高海蓬子中总黄酮提取工艺的科学性，进一步研究和开发利用海蓬子，特以总黄酮为考察指标，采用单因素和正交实验
4、法确定最佳的提取条件。黄酮类化合物多采用水、乙醇、丙酮等溶剂提取，总黄酮包括黄酮苷及其苷元，黄酮苷易容易水和乙醇，但苷元的水溶性差，故本研究以乙醇为提取溶剂。1 材料与仪器新鲜海蓬子由江苏省盐城市绿苑海蓬子开发有限公司提供。全草淋洗沥干后 70鼓风烘干，粉碎过 60 目筛，密封于阴暗干燥处保存备用。芦丁(生化试剂)购自中国医药2键入文字集团上海化学试剂公司，95%乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝等均为分析纯。UV-1200 紫外可见分光光度计(上海美普达仪器有限公司)、DK-600 电热恒温水槽(上海精密实验设备有限公司)、电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)、FZ102 微型植物粉碎机(天津
5、市泰斯特仪器有限公司)。2 方法海蓬子总黄酮含量的测定 NaNO2-Al(NO3)3 比色法9。2.1 芦丁标准曲线的绘制10用分析天平称取芦丁标准品 0.025 0g，用 30%的乙醇溶解，定容至 100 ml，摇匀，得到 0.25mg/ml 的芦丁标准溶液，备用。分别准确吸取芦丁标准溶液 1.0 ，2.0 ，4.0 ，6.0 ，8.0 ml 于 25 ml 的容量瓶中，用 30%乙醇补至约12.5 ml，加入 5%亚硝酸钠 1.0 ml，摇匀，放置 5 min，加入 10%硝酸铝溶液 1.0 ml，摇匀，放置 6 min。加入 1.0 mol/L 氢氧化钠溶液 5 ml，用 30%乙醇定容
6、至刻度，摇匀，放置 10 min。用空白液作参比，用紫外可见分光光度计测定 510 nm 处的吸光度。所得标准曲线为芦丁浓度 Y 和吸光值 X 的关系，所得回归方程为：Y=11.363X-0.0342，r = 0.999 8。2.2 海蓬子总黄酮的提取及测定称取 1.00 g 海蓬子粉末于锥形瓶中，按一定的料液比，加入一定浓度溶剂在一定温度下提取一定时间。离心得上清提取液，加入相应的溶剂定容至 100 ml。3键入文字准确吸取定容后的 2 ml 水提取液或乙醇提取液于 25 ml 容量瓶中，用 30%乙醇补至12.5 ml。加入 5%亚硝酸钠 1.0 ml，摇匀，放置 5 min 后加入 10
7、%硝酸铝 1.0 ml，放置6 min 后再加入 1 mol/L 氢氧化钠 5 ml，混匀。用 30%乙醇定容至刻度，10 min 后以空白液为参比测定 510 nm 处的吸光度。样品黄酮得率的计算公式如下：X(%)=c v2 25 10-3M V1 100%X=样品总黄酮得率(%); C=提取液中的总黄酮含量(mg/ml);M=海蓬子样品的质量(g); V1=测定吸光度所用的样液体积(ml);V2=样品定容后的体积(ml)。3 结果4键入文字3.1 提取温度对总黄酮得率的影响称取 1.00 g 样品，加入 80ml 70%的乙醇，分别在20，40，60，80，100温度下提取 60 min，
8、考察提取温度对黄酮得率的影响。结果(图 1)表明，温度达到 80时，黄酮的得率最高。因此最佳提取温度选择为 80。3.2 提取时间对黄酮得率的影响称取 1.00 g 样品，加入 80 ml 70%的乙醇中，在 80下提取，考察提取时间对黄酮得率的影响。结果(图 2)表明，随着提取时间的延长得率逐渐增加，当乙醇提取时间为 180 min 时，得率达到最高，随着浸提时间的延长，得率反而下降，因此乙醇提取最佳时间为 180 min。3.3 固液比对总黄酮得率的影响称取 1.00 g 样品，分别加入 20，40，60，80，100ml 的 70% 乙醇中(固液比分别为 120，140，160，180,
9、 1100)，分别在 80下提取 60 min，考察固液比对黄酮得率的影响。结果(图 3)表明，随着固液比的增加，海蓬子总黄酮的得率逐渐提高。当乙醇的固液比达到 180(gml)时，得率出现峰值，再提高固液比，得率趋于平缓，因此最佳提取固液比为 180。图 3 固液比对黄酮得率的影响 图 4 乙醇浓度对黄酮得率的影响3.4 乙醇浓度对黄酮得率的影响称取 1.00 g 样品，分别加入 15%，30%，40%，50%，60%，70%，80%，90% 的乙醇溶液 60 ml，80浸提 60 min，考察乙醇浓度对黄酮得率的影响。由结果(图 4)可知，黄酮得率随着乙醇浓度的增大而增加，当浓度达5键入文
10、字到 70%时得率最大;当乙醇浓度继续增加时，得率有较大幅度的下降，故最佳乙醇浓度为 70%。3.5 海蓬子中总黄酮提取条件的优化以乙醇浓度(60%，70%，80%)、提取时间(120 ，150，180 min)、固液比(180，190，1100)为正交因素，在 80条件下，海蓬子中总黄酮的得率为指标，设计 3 因素 3 水平正交实验。结果见表 1。表 1 海蓬子黄酮乙醇提取法正交实验结果tips:感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。仅供参阅！ 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解
11、决您在论文写作中的难题。大蒜等 12 种中草药的体外抑菌实验研究【摘要】 目的研究大蒜、辣椒粉、黄柏等 12 种常见中草药的体外抑菌性能及培养6键入文字基对中草药抑菌效果的影响。方法采用药敏纸片扩散法确定各中草药对各病原菌抑菌性能及最小抑菌浓度(MIC)。结果辣椒粉对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用，MIC 分别为 12.5%，12.5%;大蒜对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑菌作用，MIC 分别为 6.25%，12.5%;黄柏等常见中草药对各病原菌也都有一定的抑菌效果。结论大蒜、辣椒提取物对特定病原菌有抑制作用，黄柏等常见中草药对各种病原菌均有较强抑菌效果。培养基显著影响中草药抑菌
12、效果。【关键词】 辣椒; 大蒜; 黄柏; 药敏纸片扩散法; 体外抑菌Abstract：ObjectiveTo study the inhibitory effect of capsicum, garlic and several herbs onpathogens.MethodsThe minimum inhibiting concentration (MIC) of these herbs on chosenpathogens was determined by K-B programm. ResultsCapsicum could inhibit S.typhimuriumand S.au
13、reus in vitro with MIC 12.5% and 12.5% respectively; Garlic showed inhibitoryeffect on S.typhimurium and S.aureus with MIC 6.25% and 12.5% respectively; Other herbshad great inhibitory effect on chosen pathogens. ConclusionCapsicum and garlic can inhibitsome pathogens in vitro. Traditional Chinese h
14、erbs such as Bark of Chinese Corktree caninhibit pathogens greatly. Medium affects inhibiting effect greatly.Key words： Capsicum; Garlic; Bark of Chinese Corktree; K-B programe; Inhibitoryeffect in vitro7键入文字大蒜是人们日常饮食中的重要调味品，具有健胃开食、增进消化的功能，其辛辣成分大蒜素对多种病原菌及深部感染真菌有抑制作用1，2，在禽类及水产养殖方面对养殖动物能起到防病保健和促进生长的作用
15、3，4;此外，大蒜还有良好的抗氧化作用，可加入食用油延长其保质期5;在疾病预防方面，经常进食大蒜可以提高血浆及红细胞抗氧化性能6，并能有效降低血压，预防动脉粥样硬化和心脑血管疾病7，8;大蒜还可以抑制结肠癌细胞的生长9，也可通过抑制硝酸盐还原细菌繁殖和亚硝酸盐合成预防胃癌的发生10;除大蒜素外，大蒜还含有大蒜多糖等多种保健成分，可以和银杏叶制成天然保健饮料11，12。辣椒也是一种重要的日常调味品，有增进食欲和维持消化道正常菌群平衡的功能;辣椒碱对大肠杆菌、酵母等多种病原菌有抑制作用13，14。大蒜中大蒜素和辣椒中辣椒碱有抑菌作用，这并不排除大蒜、辣椒中其它抑菌成分的存在，也不能完全代表它们的抑
16、菌性能。本实验对辣椒水煎剂和大蒜乙醇制剂的抑菌性能加以研究，以期完善这两种保健调味品的抑菌性能研究。黄柏、蒲公英等常见中草药常用于微生物性传染病的治疗，也可用作防病饲料添加剂，但它们对常见病原菌的抗菌谱及抗菌浓度尚不明确，限制了它们在中医药和饲料添加 剂方面的应用。在此，我们探讨了大蒜、辣椒、黄柏等 12 种药用植物提取物对大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等常见病原菌的抗菌谱及最小抑菌浓度(MIC)，希望能为它们的医药用途及生产应用提供科学依据。1 材料与仪器1.1 菌株和培养基大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为本实验室存留;大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌和枯草杆
17、菌培养基为营养琼脂 No.3，金黄色葡萄球菌培养基为葡萄球菌琼脂 110 和营养琼脂 No.3。8键入文字1.2 仪器垂直流超净工作台，DH3600A 型电热恒温培养箱，手提式高压灭菌锅，2D-85 型恒温振荡器，TU-1800 型紫外可见分光光度仪，ZD-85 型恒温摇床，AB204-S 基础型电子分析天平等。1.3 中草药大蒜和辣椒购自农贸市场，其它中草药购自中药店。2 方法2.1 大蒜素提取物的制备将去皮大蒜 100 g 捣碎研细，乙醇浸提，浸提液挥发浓缩至200 ml，获得 50%的大蒜浸提物，并用乙醇作二倍系列稀释。2.2 辣椒、黄柏等煎剂类中草药提取物制备中草药粉碎过筛，进行干物质
18、含量(DMC)测定;各中草药粉 50 g(以干物质量计)水煎制剂并浓缩至 100 ml，提取物浓度为 50%，用水做二倍系列稀释。2.3 药敏纸片抑菌实验15以 6 mm 直径滤纸片在各中草药各稀释梯度浸提液中浸泡并晾干，置于涂有特定菌量的平板分区内，37 过夜培养后记录各中草药提取物各稀释梯度对几种病原菌的抑菌情况，记录抑菌圈直径及最小抑菌浓度(MIC)，各定性及定9键入文字量抑菌实验均重复 3 次。2.4 培养基对中草药抑菌效果的影响金黄色葡萄球菌分别涂布于营养琼脂 No.3 和葡萄球菌琼脂 110，以药敏纸片法观察各中草药制剂对两种培养基上金黄色葡萄球菌的抑菌效果。2.5 涂布菌含量的确
19、定涂布菌原液制作 10 倍稀释梯度系列，以平板涂布法计算涂布菌液浓度。3 结果3.1 涂布菌含量测定以上述方法测定了各病原菌涂布菌液浓度。大肠杆菌 2.8 108/ml;副伤寒沙门氏菌 1.1 108/ml;金黄色葡萄球菌 4.1 108 个/ml;枯草杆菌 1.3 106 个/ml。3.2 大蒜提取物的抑菌结果从表 1 可以看出，大蒜乙醇提取物对副伤寒沙门氏菌和生长于葡萄球菌琼脂 110 上的金黄色葡萄球菌有抑制作用，MIC 分别为 6.25%和 12.5%;在本研究浓度范围内对大肠杆菌和枯草杆菌无抑菌作用。表 1 大蒜提取物对病原菌的抑菌效果10键入文字3.3 辣椒提取物的抑菌结果表 2
20、显示，辣椒浸提物对副伤寒沙门氏菌和生长于葡萄球菌琼脂 110 上的金黄色葡萄球菌有抑菌作用，MIC 均为 12.5%;对大肠杆菌和枯草杆菌未发现抑菌作用。表 2 辣椒提取物对病原菌的抑菌效果3.4 黄柏等中草药制剂抑菌结果黄柏、连翘等常见中草药的抗菌谱及最小抑菌浓度(MIC)(见表 3)，其中黄芪、蒲公英、秦皮、乌梅、黄芩等中草药为对 4 种病原菌几乎都有抑菌作用，且抑菌作用较强，尤其是乌梅和秦皮对各种病原菌都有很强的抑菌作用。所选中草药中，只有青黛对 4 种病原菌均不抑制。表 3 黄柏等中草药对病原菌的最小抑菌浓度(MIC)%3.5 培养基对中草药制剂抑制金黄色葡萄球菌效果的影响培养基对中草
21、药抑菌效果有影响。从表 4 可以看出，各类中草药制剂对葡萄球菌琼脂 110 上的金黄色葡萄球菌抑菌效果明显好于生长于营养琼脂 No.3 上的抑菌效果，其中大蒜、辣椒、秦皮、远志制剂对前者抑菌作用明显，而对后者没有抑菌作用;大黄、乌梅、黄芩等制剂对前者的抑菌效果也显著好于后者。这种抑菌效果的差异可以从金黄色葡萄球菌在两种培养基上的生长情况来说明，用两种培养基以平板计数法分别测定涂布菌液浓度，接种量完全相同，通过营养琼脂 No.3 测得菌液浓度为 4.1 108 个/ml，而用葡萄球菌琼脂 110 所得结果为 3.1 108 个/ml，说明营养琼脂 No.3 更适合金黄色葡萄球菌的生长，因而各类中
22、草药对其上金黄色葡萄球菌抑菌效果略差一些，这与李仲兴等(2000)的结论一致16。从另一角度也表明，培养基和涂布菌量对药敏纸片法中草药抑菌效果有较大影响。表 4培养基对中草药抑制金黄色葡萄球菌效果的影响%11键入文字4 讨论tips:感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。仅供参阅！由表 1 正交实验结果可见，乙醇浓度对海蓬子总黄酮得率的影响程度最大，提取时间和固液比的影响均不显著，影响程度大小顺序为：乙醇浓度 提取时间 固液比，最佳乙醇提取条件为 A2B1C3，即乙醇浓度 70%，提取时间 120 min，固液比 1100。4 结论以乙醇为溶剂提取海蓬子总黄酮，研究了单因素对提取得率的影响，通过
23、正交实验确定了最佳提取工艺条件为：乙醇浓度 70%，提取时间 120 min，固液比 1100，此时海蓬子总黄酮的得率是 2.86%。乙醇浓度对得率的影响程度最大，提取时间和固液比的影响均不显著。【参考文献】1 洪立洲,丁海荣,杨智青，等.盐生植物海蓬子的研究进展及前景展望J.江西农业学报 2008,20(7):46.12键入文字2 吕忠进,Edwarrd P G.全海水灌溉的作物 北美海蓬子(上)J.世界农业，2001，2：14.3 张爱军，刘发义，沈继红,等.海蓬子种子营养成分分析及制备共轭亚油酸的研究J.海洋科学进展,2003,21(1):89.4 张美霞，刘兴宽. 北美海蓬子引种盐城滩
24、涂后生长条件和营养组成比较J. 食品科技，2007，32(5)：104.5 魏成金，尹金来，徐阳春. 不同氮磷水平对北美海莲子生长和品质的影响J. 南京农业大学学报，2006，29(4)：59.6 Park SH, Kim KS. Isolation and Identification of antioxidant flavonoids from Salicorniaherbacea LJ. Journal of the Korean Society for Applied Biological Chemistry，2004，47(1)：120.7 Kong CS,Kim MM,et al.
25、Flavonoid glycosides isolated from Salicornia herbacea inhibitmatrix metalloproteinase in HT1080 cellJ. Toxicology in Vitro,2008,22(7):1742.13键入文字8 Min JG, Lee DS, Kim TJ, et al. Chemical Composition of Salicornia Herbacea LJ.Journal Food Science and Nurtrition，2002，7：105.9 张海悦，王黎兵，郭新力.狭叶荨麻总黄酮的测定J.食品科技，2007，12：181.10 赵文红, 赵 翾, 白卫东,等. 柿叶黄酮化合物提取工艺研究J.陕西科技大学学报，2007,25(5):54.医药卫生栏目tips:感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。仅供参阅！14
