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    最新光合细菌培养基配方汇编Word文档格式.docx

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    最新光合细菌培养基配方汇编Word文档格式.docx

    1、氯化氨1克,磷酸氢二钾0.5克,氯化镁0.2克,氯化钠2克,酵母膏0.1克,水900毫升。各成份溶解后15磅灭菌20分钟,然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水;50毫升过滤的乙醇。用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0即可。响应面设计法优化光合细菌培养基配方。培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著,最优培养基配方为:醋酸钠1145gL、蛋白胨0055gL、碳酸氢钠06gL、硫代硫酸钠04gL、氯化钠03gL、硫酸镁01gL、磷酸二氢钾005gL。在此条件下,光合细菌生长最为良好,经过5d培养以后,培养液OD600可以达到05以上光合细菌(含生产工艺)优良的光合细菌菌种

    2、的外观质量是啥样? 一般优良的光合细菌菌种和产品的外观质量有以下几点:1、外观上看比较均匀,基本无上下分层。 相反,市场上有许多光合细菌是上下分层的,包括我中心初期的产品也是这样,上层比较清淡,下层则比较深厚,上层颜色浅,下层颜色深,最底层可能还会有一层黑黑的沉淀。 而优秀的光合细菌菌种和产品,上下都是比较均匀的,没有较明显的分层,颜色比较均匀,外观看起来也悦目。(当然,除了培养基溶解时,会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外) 这种上下无分层,颜色均匀,不是靠加悬浮剂,或增稠剂而造成的,而是自然培养出来的,不加任何修饰而成的。少数地方,由于水质的原因,可能会产生稍稍的差别。2、没有粘壁

    3、现象。 很多市场上的产品都有粘壁现象,即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层,就象是油漆一样,洗不掉,抹不去。这主要是在培养过程中形成的,也有在保存过程中形成的。 优秀的光合细菌菌种和产品,应该是没有一丝一毫的粘壁现象。所以外观上看起来质量也更好。3、颜色的深度比较深。 根据国家质量标准,可以用721分光光度计,测量A660nm处的吸光值,如果大于1.5,则说明,浓度一般都在30亿/毫升以上,好的光合细菌菌种和产品都在1.5以上。4、颜色鲜艳无杂色。 优秀的菌种和产品,不仅颜色深,而且,比较鲜艳,没有杂色,比如是大红色,血红色,或是深紫色,看起来是很悦目的,没有不良的杂色,或是暗暗的颜色。5、保

    4、存期限长。 可以保存夏天3月以上,冬天6月以上。在期限内外观基本无变化。保持80%以上的活力。6、培养周期短,接种量少。 好的菌种,接种量在10-20%即可,我中心推崇20%接种量,培养条件好的,可只用10%接种量,都可以在3-5天内培养好(条件是用白炽灯培养, 温度在30-37度),或在7天培养好(条件是用太阳光照培养,阳光充足时,仅是白天照射培养,液体温度在30-38度,晚上不培养)。 而市场上很多菌种要50%以上接种量,当然,在有条件情况下,用大接种量是有好处的,在有条件的情况下,我中心也推荐您用30%的接种量,能更稳妥,更快地培养成功。7、基本不存在杂菌污染 在保证清洁培养的情况下,一

    5、般不存在杂菌污染的情况,当然,这也与培养基配方技术有一定关系。8、可以无限制地循环培养下去。 不仅可以无限制地循环培养下去,而且,性能不变,质量不减。当然,这也与培养基配方技术有一定关系。小规模光合细菌灯光培养中用60-100瓦白炽灯较好 在实验室用纸箱法培养光合细菌时,要用到白炽灯(注意,不能用日光灯,日光灯的光波不适合培养光合细菌,所以日光灯是没有用的),以前做的试验由于是用 500*500*350mm的小纸箱,所以有40瓦的白炽灯就可以维持箱内温度在35左右,甚至到40,用40瓦的白炽灯培养,一般需要5天以上才能 长得非常深红色。 后来用到了700*700mm的大纸箱,我们才改用60瓦的

    6、白炽灯,发现培养的时间可以大大缩短了,而且进入冬季后,纸箱中的温度只能维持到25,我们 发现,即使是在25的箱内温度下,也只要培养4天左右就长得非常深红色了,所以我们分析,可能是60瓦以上的白炽灯的光波更加适合于光合细菌的生长繁 殖,所以我们建议各位用户,改用60瓦的白炽灯,可以大大提高培养的成功率,和大大缩短培养的时间。 如果是夏天,若用60瓦的白炽灯太热,可以在纸箱上戮大量孔洞,用于散热,维持箱内温度在35度左右。光合细菌发生剂的用法(即光合细菌的生产工艺)一、光合细菌生长所需的营养条件 用“光合细菌发生剂”生产的终端产品:光合细菌液,PSB细胞浓度达到30-100亿/毫升,生产成本只要0

    7、.30元/公斤,而使 用价值可达到2元/公斤,投入产出比达到1:6-12以上。做成的液体产品,密封保存在通气干燥处,可保质达1年以上。二、光合细菌生长所需环境条件 有了营养全面的“光合细菌发生剂”,还必须有一个良好的培养环境条件,才能生产出优质产品出来。PSB所需的环境条件有以下几个:1:培养介质,含杂菌较少的清洁淡水。地下水、河水、海水等,硬度低的水更好(如河水),选取水源时,最好先做几种水源的对比试验,使用哪里的水源在培养试验中最先变成红色(生长良好),就选用哪里的水作为生产用水。自来水取自河水,硬度低,杂菌少,只要菌种能耐漂白粉杀菌剂,用自来水比其它水反而更好更快。您不妨做一次自来水的试

    8、验。 2:酸碱度,PH值在88.5为最好,光合细菌的适应PH范围在610之间。3:温度,以2836为最适生长温度,其适应的生长温度范围为1541。4:光照强度,以30004000勒克斯(LX)为最佳,即每25公斤菌液需要用相当于60瓦左右的白炽灯作光源,而太阳光照为最好且不要成本。宜春专利中心提供光合细菌发生剂。 三、光合细菌成品的生产1、培养液的配制 将购得的我中心的光合细菌发生剂取一公斤,放入一个干净的容器中,加入100公斤水,搅拌均匀,直到发生剂(培养基)溶化为止。若容器不够大,则可以少配一点。注意事项:水源一定要选择好,含菌量较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水。从经济、实用的角度考虑

    9、,地下水(井水)含菌量低,为最佳水源,另外,若当地 自来水含氯较低,也可用,效果很好;清洁的地表水也可使用;含氯量较高的自来水应敞口放置两三天或调PH值至偏碱后使用;蒸馏水及纯净水固然很好,但成本 太高,可用于提纯菌种。选择容器:少量生产可用透明度较高的白色或透明塑料桶、玻璃容器。大量生产可用水泥池、水泥船,也可临时开挖土池,垫上双层塑料膜防漏防浑浊,培养液的深度为30公分最佳。2、培养方式有以下三种:(1)做小试验培养的方法容器为:1.25升的饮料瓶,即小规模生产方法,由于饮料瓶的量小,瓶子透明度好,又密封,所以培养环境好,需要的接种量也少, 比较简单。设备为:光照箱,用一个大的纸箱,放一个

    10、40瓦的白炽灯悬挂在箱子的空中(注意防火),纸箱内壁四周,堆放着已装好了培养液并 接了种的饮料瓶,这样,既达到了保温到2540度的效果,又达到了光照的效果。 较大的箱子要用60瓦的白炽灯,一般一个箱子,可 放这种饮料瓶8个以上,即一次可生产约10公斤/箱。 灯泡与瓶子的距离不超过20厘米。夏天,可撤去纸箱,以防温度过高,春秋秋 天,也要在纸箱四周钻孔以散热。操作规程如下:配料:培养液为1%浓度的发生剂溶液,接种量为20%,注意水源必须一干净卫生,最好用地下水,自来水可以试用一下, 第一次做试验时,要多选择几种水源同时做,以确定哪种水源最好,最先转成红色的水源最好,可确定为今后的生产用水。培养:

    11、在箱子内,打开白炽灯,照几天即可,一般可达到温度在35度,控制在30-40度之内,所以要密切注意温度不要过高,第一次培养可能需要5天以上,一定要注意,每天要摇晃两次,这很重要,菌种适应了贵地的水源后,一般只需要2天即可长成深红色。培养成熟标准:以培养液长成深红色为准,这时一般成品的光合细菌浓度可达到30-100亿/毫升。 (2)用塑料桶进行大规模生产 或用培养虾苗用的塑料袋来做效果更好。一袋20公斤的样子。例如容器选用25公斤装的大塑料桶,由于条件不如做小试验的培养方法好,所以接种量要达到至少20%以上的量。即往大塑料桶中加入22.5公斤的配制好的培养液(即1%的培养基溶液),再加入2.5公斤

    12、的菌种液,摇匀。利用太阳能培养: 把上述塑料桶放到太阳底下晒即可,只要注意:夏季气温过高,若用太阳作为光照能源,则应采取部分遮阳(用黑色的遮阳塑料网),通风的降温措施,以防光合细 菌快速老化死亡;冬天则气温低,则要采取搭建一个塑料暖棚增温的方法,把塑料桶放入暖棚内晒太阳即可;春秋季则可直接放在太阳底下不用管即可。总之要使之 温度在25度-36度之间最好。过些日子它自然会长成深红色的成品。经方法即是懒汉培养工艺法, 利用白炽灯作为光能生产:在一个容器内悬挂一个白炽灯,容器内装的培养液深度不得大于30公分,灯泡与液面距离不得大于20公分。(3)用塑料膜做的池子来大规模生产 您还可以这样利用太阳能大

    13、规模培养(以培养2吨菌液为例):选择阳光充足的地方,开挖一土池(长5米、宽1.8米、深0.4米),有现成的水泥池更好。垫上塑料薄膜,然后再铺上桶状塑料薄膜,并将其一端密封,从 另一端加入1.8吨配制好的培养液,和0.2吨的菌种,一共2吨,排尽薄膜中空气后,再将该端密封。保持适当的温度,冬天如果温度过低,搭建透明塑料薄膜 棚增温。这样,几天后,菌液培养成熟。长成深红色。 也可以在室外挖一个土坑,深40厘米,垫上 一层塑料薄膜,再倒入培养液,液面上再盖一层塑料薄膜,以免与大量空气接触,造成污染杂菌,再用太阳照射培养成熟,天气冷就搭塑料棚升温。 当然这一套装置也可放于室内,用每半平方料一个60瓦白炽灯照射,灯与液面距离小于25厘米,温度不够,也要搭一个室内塑料棚,棚内放一炉火即可保温到 30度以上。四、光合细菌固态产品的生产 将高浓度PSB菌液用蛭石粉或沸石粉吸附后,阴干或风干粉碎即得粉状固体PSB产品。可包装出厂,便于运输和售卖。也更象一个产品了。一般售价可达到2元/公斤以上,光合细菌沸石粉=134。也可用其它载体来做 干燥吸附剂,如草炭、硅藻土等。


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