1、6、枯草芽孢杆菌的分子量为2-2.8103MD，复制是双向复制；控制芽孢形成的基因有42个。7、放线菌中遗传体制研究得比较清楚的代表菌株是天蓝色链霉菌，它的染色体DNA是环状。8、原核微生物染色体以外的遗传物质是质粒，它的存在控制宿主细胞一些次要的性状，赋于细胞新的特性。9、真核微生物主要指:真菌，原生动物，藻类；它们的遗传物质存在的位置：DNA主要集中在细胞核内的染色质中，端粒用于开始染色体的复制。10、真核微生物的染色质：线状双链DNA加5种组蛋白组成的直径为10nm的串珠状丝。11、以酵母为代表的真核微生物与细菌比较的区别：基因组高约3-5倍，含有内含子及“多余”的DNA；转录和翻译在时
2、间和空间上完全分离，核内染色体DNA上基因的表达分5步（转录、初级转录物的加工、成熟mRNA的转运、翻译、翻译后的加工）；部分遗传物质还存在于染色体外的细胞器中。第二章 基因突变1、解释：自发突变：自然发生的突然变异。诱发突变：利用各种物理化学诱变因素，人为引起生物基因发生的突变。突变率：指突变的配子数占总配子数地百分率。突变频度：在某一群体中，某些突变体占总数的百分率。突变频率是单位时间内发生突变的次数碱基类似物：与碱基分子结构略有差异，但在DNA复制时可替代正常碱基掺入的化合物。分子互变异构：一个分子中，原子的相对位置和原子间化学键显著不同的两种异构体之间处于平衡状态的现象。这时分子可以根
3、据不同反应条件，以这两种异构体中的任意一种形式参与反应。环出效应：在DNA复制过程中,如果其中某一单链上偶而产生一个小环,则会因其上的基因越过复制而发生遗传缺失,从而造成自发突变。而在下链中,则复制仍正常进行。烷化剂：在体内能形成碳正离子或其他具有活泼的亲电性基团的化合物，进而与细胞中的生物大分子（DNA，RNA，酶）中含有丰富电子的基团（如氨基，巯基，羟基，羧基、磷酸基等）发生共价结合，使其丧失活性或使DNA分子发生断裂移码突变、化学诱变因素、物理诱变因素、生物诱变因素、电离幅射、非电离幅射、碱基置换、转换、颠换、前突变、带错误倾向的修复系统、校正错误的修复、引起差错的修复。同义突变：编码同
4、一氨基酸的密码子的核苷酸改变但不改变编码的氨基酸，即不改变基因产物的突变。错义突变：基因中的碱基突变导致翻译产物中相应位置形成错误的氨基酸残基，其结果是一个不同的氨基酸参入到多肽链的相应位置。无意义突变：编码氨基酸的密码子突变为终止密码子，使肽链合成中断。突变热点：突变发生频率较高的位点。2、突变类型如何划分：狭义的指点突变（插入、缺失、转换、颠换），广义的包括染色体畸变（易位、倒位、缺失、重复）。3、基因符号的命名规则：每个基因座位都有斜体或带下横线小写的三个英文字母表示；产生现一表型的不同基因在三个字母后用不同的大写英文字母表示；同一基因的不同突变位点可在其基因符号后加阿拉伯数字表示；当染
5、色体上存在缺失时可用表示。并能熟记常见的一些符号（如：常见的氨基酸，抗生素等）达到能看懂有关资料的目的4、基因突变的规律：随机性、独立性、稳定性、可逆性、稀有性。每个公式中各项的含义是什么？5、5-嗅尿嘧啶诱变的作用机理：5-BU类似胸腺嘧啶T，其酮式可与A配对，烯醇式可与G配对，但5-BU更易出现烯醇式，当其取代了T进入DNA链后，因其自身的互变异构，经DNA的两次复制，就会导致GCAT或ATGC的转换。2-氨基嘌呤（2-AP）类似于A，其异构体可分别与T和C配对，因此容易引发ATGC的转换。6、阐述亚硝酸诱变的作用机理：主要是脱去碱基分子中的氨基使腺嘌呤（A）脱去氨基变成次黄嘌呤（H）、胞
6、嘧啶（C）变成尿嘧啶（U），鸟嘌呤（G）变成黄嘌呤（X）。腺嘌呤脱去氨基变成次黄嘌呤后，只能与胞嘧啶（C）配对。胞嘧啶脱去氨基转变为尿嘧啶，不能与鸟嘌呤配对，只能与腺嘌呤配对。便造成ATHCGC和GCUATA碱基对的转换，从而引起遗传信息的错误而造成突变。7、羟胺（属化学诱变因素）诱变的专一性特征是：专一性作用于胞嘧啶，使之转变为能与腺嘌呤配对的形式，专一性引起GCAT。8、举例说明烷化剂诱变的作用机理。甲基磺酸乙酯（EMS）可以将其甲基回到G和T的与氢键相结合的氧原子后，将会引起G和T的错配从而引起ATGC和GCAT的转换。9、吖啶类药物为扁平的分子结构，插入到DNA的碱基间，引起有效的移码
7、突变。这一类诱变的代表性药物有吖啶橙、原黄素。10、通常利用的物理诱变因素包括：主要有红外线、紫外线，X射线，-射线，-射线、-射线、快中子，激光，微波，离子束等。紫外线，X射线，-射线属于电磁幅射。快中子，激光，微波，离子束等属于粒子幅射。11、经物理诱变因素处理的DNA会引起以下反应：单核苷酸受击，释放出磷酸酯和碱基；碱基受损，发生脱氨、分子结构开环或形成过氧化物；脱氧核糖分子的羟基发生氧化或碳碳键断裂；DNA主链发生单链或双链断裂；形成胸腺嘧啶二聚体；DNA各分子间发生交联。12、紫外线（U、V）诱变的分子机理：DNA的断裂、DNA分子以链的交联、胞嘧啶和尿嘧啶的水合作用及嘧啶二聚体的形
8、成等，后者为主。形成二聚体后，当DNA复制到此后会突然中止或在新链上出现错误的碱基序列，因而引起突变。13、引起自发突变的原因有：互变异构（T、G可以酮式和烯醇式互变，A、C可以氨基式和亚氨基式互变）和环出效应（DNA在复制过程中其中一条链形成环状）；自身产生的诱变物质的作用；背景辐射和环境诱变。与诱发突变没有本质的区别。14、转座遗传因子包括插入序列、转座子、转座噬菌体。它们引起的突变从诱变作用的条件来看属于移码突变，即插入基因时，可使该基因的碱基序列改变。IS因子：在其序列的两端具有反向重复序列，是转座酶的识别位点；转座子除含与转座有关的基因和未端重复序列外，中间还带有一个或结构基因，除可
9、插入突变外还能赋与受体菌新的遗传性状，其转座机制是：转移前先进行复制，转座过程中先出现共整合体，在受体的新整合处存在靶序列，转座子具有内部解离位点或依赖同源的交换点；转座噬菌体：是具有转座功能的一类可引起突变的溶源性噬菌体，距末端不远处有类似的IS序列，左右两端均含有少量寄主的DNA，其特征是易于识别（不是细菌基因组的正常组份）、可经诱导产生易于制备。15、光修复作用：是一种高度专一的DNA直接修复过程，它只作用于紫外线引起的DNA嘧啶二聚体。修复过程：可见光（有效波长为400nm左右）激活了光复活酶，它能分解紫外线照射而形成的嘧啶二聚体。 16、切补修复作用：是通过一系列修复酶的协同作用，先
10、将DNA的损伤部位切除，再进行修补复制的过程。它们的修复过程：（1）由能识别损伤部位的特异内切核酸酶在损伤部位附近打开缺口；（2）外切核酸酶将损伤部分从DNA切除；（3）以未受损伤一方的DNA单链作模版，修复填补损伤链中切除产生的缺口；（4）由连接酶把修复好的DNA部分与原有的DNA接上，成为完整的DNA。 17、重组修复作用：是在DNA复制的情况下进行的修复。（1）复制：均正常复制，但当复制到损伤部位时，子代DNA链中与损伤部位相对应的位置出现切口，新合成的子链比未损伤的DNA链要短。（2）重组：完整的母链与有缺口的子链重组，缺口由母链来的核苷酸片段弥补。（3）再合成：重组后母链中的缺口通过
11、DNA多聚酶的作用合成核酸片段，然后由连接酶使新片段与旧链连接，至此重组修复完成。18、什么是SOS修复作用：指DNA受到严重损伤、复制受到抑制时所诱导的一种应急的DNA修复方式。修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生存率，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复，使细胞有较高的突变率。正常情况下，因阻遏蛋白LexA使有关修复蛋白的合成低。当DNA两条链的都有损伤并且损伤位点邻近时，损伤不能被切除修复或重组修复，损伤的DNA与RecA结合，将LexA降解，SOS修复酶类得以合成。在限制性内切核酸酶和核酸外切酶的作用下造成损伤处的DNA链空缺，再由损伤诱导产生的一整套的特殊DNA聚合酶SO
12、S修复酶类，催化空缺部位DNA的合成，这时补上去的核苷酸几乎是随机的，仍然终于保持了DNA双链的完整性，使细胞得以生存。但这种修复带给细胞很高的突变率。 19、适应性修复：指细菌因适应而产生的修复酶的修复作用。因烷基化G与C间的氢键断裂，G上的甲基嵌进DNA双螺旋主沟，使DNA复制受阻时，诱导产生一种受体蛋白，其侧链上的半胱氨酸与双链DNA双螺旋结构主沟内的甲基结合形成S-甲基法胱氨酸，使G恢复正常。20、突变的形成过程：前突变突变突变型表现。突变与修复之间的关系：相当一部分诱变剂是通过启动具有高度错误倾向的修复体系而发挥诱变效能够。细胞内的修复系统可分为校正的修复（如光复活、适应性修复）和发
13、生差错的修复，后者除正常的DNA聚合酶外还有诱导产生的有错误倾向的DNA聚合酶；腾DNA修复酶的活性改变也可改变细胞对诱变剂的反应，由此可能改变突变频率；正常细胞修复过程中的无误修复比例大；修复作用受环境条件的影响，一些因素修复酶活性，从而改变突变频率。第三章细菌和放线菌的基因重组和遗传分析转化作用：通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，这就是转化作用。感受态：受体细胞处于易接受异源DNA转化时的生理状态。局部原生质化假说：细胞表面的细胞壁结构发生变化，即局部失去细胞壁或局部溶解细胞壁，使DNA 分子能通过质膜进细胞。酶受体假说：感受态细胞表面能出现一种与
14、DNA有结合能力的位点，转化因子首先必须与细胞表面的位点结合才能进入细胞，这种结合是受一种酶的作用产生的。接合作用：指雌雄细菌在菌体表面一部分结合，雄菌的遗传物质向雌茵内传递的现象。F因子：大肠杆菌的性因子。是一种质粒DNA分子，含有它的大肠杆菌为雄性菌株。转导作用：过噬菌体感染将DNA转入宿主细胞并产生新性状的过程。完全转导：转导的DNA整合到受体细胞染色体上，并能产生稳定的转导子的转导称为完全转导；流产转导：转导的DNA不整合到受体细胞的染色体上，虽然不能继续复制，但仍然表达基因功能的转导称为流产转导。并发转导（共转导）：两个基因一起被转导的现象。局限性转导：噬菌体只能传递供体染色体上原噬
15、菌体整合位置附近的基因的转导。双重溶源菌：d gal （带有供体菌gal基因的缺陷噬菌体）与可同时整合在一个受体菌的核染色体组上，这种同时感染有正常噬菌体和缺陷噬菌体的受体菌就称双重溶源菌。选择性标记：观察对象所带有的（遗传）标记，依据这种标记可从混有不同基因型的群体中获得具有该标记的个体.。1、转化过程的三个步骤：（1）感受态的出现，可采用人工方法处理诱导感受态的产生如钙处理改变温度等；（2）转化因子的吸附与渗入，一种核酸内切酶随机切成4-5MD，另一种核酸酶解链使其中一股进入；（3）转化因子整合，供受体DNA互补配对、染色体交换使供体DNA整合于受体染色体上、供体单链复制成双链。2、大肠杆
16、菌的接合作用的证实（利用营养缺陷型作为标记来证实），细菌接合作用的条件（用U形管实验证实）将两种缺陷型单独培养于不加所需氨基酸的基本培养基平板上没有出现菌落，而混合培养后则可以一定频率检出野生型。将两个缺陷型菌株分别培养在一个特制的U型管的两端，中间用一个微孔隔板将两种细菌分开，隔板的孔径大小只允许培养基和大分子物质通过。培养一段时间后，从两端分别取样、离心和洗涤，再涂布于基本培养基平板表面，结果均未发现野生型菌落出现。由此证实细菌细胞间的接触对重组子的产生是必须的。 3、F因子基因组的结构划分及主要功能。可分三个区段：第一区段控制自主复制，含有复制酶基因，决定不相容性的基因和复制起点；第二区
17、段是转移区段（含一个具转移功能的操纵子）；第三区段是插入区段，含4个插入序列，有利于F因子在不同位点插入受体菌染色体而形成不同的高频重组子。 4、F因子在大肠杆菌中存在的状态及它们之间的关系。5、几种状态的大肠杆菌之间有几种组合的接合作用，最终导致的结果是什么？6、中断杂交：让两种菌株在培养液中混合通气培养，互相接触，形成接合管，每隔一定时间搅拌，中断接合管取样，可得到接收了不同长度的供体染色体片段的受体细菌。利用HfrF-中断杂交进行基因定位的原理是：Hfr在接合时进入受体细胞的染色体基因是按一定时间顺序进入的。根据基因转入的先后就可能进行染色体基因的定位了。7、转导作用的类型有哪些？它们各
18、自的特征是什么？各自进行转导的噬菌体是什么性质？普遍性转导（供体的单个或紧密连锁的少数基因被噬菌体因错误装配而转移给相应受体的作用）；特征是供体的单个或紧密连锁的少数基因均可被转导。普遍性转导噬菌体是许多温和噬菌体或某些烈性噬菌体。可分完全转导和流产转导。只能使一个或少数几个基因以噬菌体为媒介转移。局限性转导噬菌体是温和噬菌体。可以有稳定的转导和琮稳定的转导。8、用坎贝尔模型解释“”噬菌体局限转导gal+基因的作用机制：（1）噬菌体DNA呈线状，而且由于吸附端的特殊结构，感染后二端闭合而形成环状分子。（2）引起噬菌体DNA吸附部位的特定结构部分和寄主染色体相对应的特定吸附部位间的相互交换。（3
19、）噬菌体的DNA整合到线状寄主染色体的特定部位上。（4）噬菌体DNA的脱出是作为整合的逆反应而发生的。这个模型，在对所有二种不同质的DNA分子间进行交换时所发生的相互作用，是一个重要的具体化模型。 9、用选择性包裹模型解释普遍性转导的作用机制。噬菌体在感染大肠杆菌时，其DNA注入细菌后立即进入裂解循环。在生物合成的同时还将寄主DNA降解为大小不同的片段，其中一部分片段的分子量为10100MD，装配时会发生一次错误而将相应大小的寄主DNA片段错误装入而形成转导噬菌体。10、比较局限转导与普遍转导二者之间的差异是哪些？普遍性转导可以将受体细胞的所有基因组进行转导，且转导频率大致相当，局限性转导只局
20、限于原噬菌体附近的个别基因。11、两种不同营养缺陷型菌株进行重组，你能用什么方法证明重组子的产生是转化，接合，还是转导的结果。培养一段时间后，从两端分别取样、离心和洗涤，再涂布于基本培养基平板表面，如果出现野生型菌落则可能是转化；如未发现野生型菌落出现，再将两菌株混合培养后可以一定频率检出野生型则说明是接合，否则就是转导。12、异质系克隆：是指在某些放线菌中，两个多重标记的营养缺陷型亲本杂交时，供体染色体片段进入受体细胞后形成的局部杂合核在分裂过程中发生染色体交换和减数。结果在同一菌丝体形成各种单倍体重组孢子。这样由一个杂合核演化繁殖形成的菌落叫异质系克隆。 13、简单描述天兰色链霉基因重组的
21、三个阶段。其致育因子为SCP1 （1）将两个不同的营养缺陷型混合培养，使基质菌丝相融合；（2）一菌丝的部分染色体通过菌丝间连接通道进入了另一菌丝形成局部杂合核；（3）局部杂合核在分裂过程中发现染色体交换和减数，结果在同一菌丝体上形成各种单倍体重组体孢子。14、三种不同致育因子的放线菌菌株之间有几种杂交的可能？IFUFIF，频率低NFUF，频率高从IF可得到UF或NF，但不能从UF 得到IF和NF。15、放线菌的三种致育类型与大肠杆菌比较有哪些异同点。（1）大肠杆菌的FF不可育，而UFUF可育；（2）F+F+和HfrHfr一般不可育而NFNF和IFIF杂交中有部分是高度可育的；（3）HfrF子代
22、基本为F，而NFUF子代都是NF。16、大肠杆菌环状染色体图是如何证实的。高频重组菌株（Hfr）的染色体上整合有F因子，HfrF时Hfr细胞（供体菌）的染色体从Hfr细胞向F细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性，并且可以随时中断，因此根据结合后F细菌（以重组子形式选出）中Hfr细菌染色体基因出现次数的多少，即可得知基因转移的先后顺序，也就是说基因在染色体上排列的顺序。转移时，靠近转移起始点的染色体基因进入F细胞的机率大，重组频率高，远离转移起始点的基因进入F细胞的机会少，重组率低，F因子大部分位于转移起始点相对的一端（末端）。因此转移的频率很低。只有当接合时间很长，足以使整个染色体转入
23、F细胞（受体）时，才会使F细胞转变为Hfr或F状态。运用：转导的遗传分析如何利用共转导进行基因定位（掌握共转导的计算公式）、P1对宿主的任何两个相邻的基因都有可能进行共转导，由共转导频率可计算出两相邻基因的遗传距离，由此进行基因定位。第四章 噬菌体的基因重组和遗传分析噬菌斑：即噬菌体侵染细菌细胞，导致寄主细胞溶解死亡.因而在琼脂培养基表面形成的空斑。涂布效率（e.o.p）：单个噬菌体颗粒侵染敏感细菌后产生的噬菌斑数量。e.o.p产生的噬菌斑数/用于涂布的噬菌体颗粒数理论应为1，低于1的原因：一是宿主细胞或噬菌体因发生基因突变而产生了抗性细胞或突变噬菌体；二是来自宿主细胞菌株的限制修饰作用。感染
24、复数（m）：感染时噬菌体与细菌的数量比值。M噬菌体颗粒数/宿主细菌细胞数裂解量：系感染烈性噬菌体后的单个宿主细胞所释放的子代噬菌体的平均数量。琥珀突变：当基因中编码氨基酸的密码突变为终止密码子UAG并使蛋白质合成中断而产生的突变。2、烈性噬菌体（又称毒性噬菌体）的特性：专一性。3、琥珀突变会使蛋白质合成中断。选择在T4不同位点发生的琥珀突变对T4的基因进行分析的原理：选择在不同位点发生琥珀突变的T4突变品系感染su-宿主细胞后常可产生有尾无头或有头无尾的畸形噬菌体。由此可对T4晚期蛋白基因的遗传进行分析。4、如何利用烈性噬菌体T4的突变株来验证基因的互补作用和重组功能？（1）用同类型的rA或r
25、B的两个突变噬菌体混合感染不能在K上野生型的噬菌斑；（2）用来自不同类型的两个突变噬菌体混合感染时可产生噬菌斑；（3）从K菌株中分离出的噬菌体仍只能感染B而不感染K。其原因是rA型突变子中有正常的rB的基因产物，或rB突变子中有正常的rA基因的基因产物，两者混合感染时才具有互补性。突变子的基因型在感染过程中没有改变，因此从K菌株中分离出的噬菌体仍只能感染B而不感染K。T4的r突变型已广泛用于突变位点和频率的分析。弄清楚利用T4噬菌体的快速溶菌突变株感染不同品系大肠杆菌的实验原理。（主要为了验证不同基因发生突变的二个突变菌株，无论这二个突变位点在染色体上的位置多么近，在功能上永远是可以互补的，而
26、同一基因不同位点的二个突变，无论距离多么远在功能上一般是不能互补的，而只能进行重组）。5、温和噬菌体：指侵染相应的寄主细菌后能将其DNA整合到细菌染色体上进入溶源性循环。温和噬菌体的特性：溶源性。原噬菌体：整合到溶源性细菌染色体中的温和噬菌体DNA，与细菌染色体一起复制，诱导后能增殖和裂解细菌。受温和性噬菌体感染的细菌几乎都成为溶源菌，而且能把这种特性传给子代细胞。并对同种噬菌体具免疫性。溶源性细菌：含有温和噬菌体的遗传物质，但又没有发生裂解，这样的细菌称为溶源性细菌。其特性：可以很低的频率自发裂解；可以在外界理化因素的刺激下诱发裂解；具有免疫性；复愈；溶源性转变；局限性转导。细菌转导是利用温
27、和噬菌体的局限性转导的特性。溶源性细菌对噬菌体的免疫性和对噬菌体的抗性是否一回事？如何区分？（参看：微生物遗传学，科学出版社，盛祖嘉编，第二版，1987年，第五章第七节关于温和噬菌体的内容）6、“”噬菌体控制溶源性的大致过程。“”噬菌体进入宿主后在宿主RNA聚合酶的催化下先启动PL、PR转录、翻译出N和Cro蛋白；N蛋白推动聚合酶越过tL1、tR1、tR2等中止位点进一步转录翻译出C和C蛋白；C在C的保护下能进一步启动PE启动子，沿左向高水平地转录和翻译出阻遏蛋白C，C能与PL和PR启动子结合使其终止，从而使进入与寄主染色体整合的溶源过程，且启动PM低水平翻译出C蛋白，维持溶源化过程。因诱导或
28、突变使C脱落，Cro蛋白随之与PR和PM结合阻止C蛋白的产生，PL和PR均能向下转录和进一步翻译，DNA也从整合状态下脱落下来进入裂解循环。7、M13噬菌体为环状单链DNA。M13噬菌体其侵染过程：（1）在端部基因蛋白的识别作用下，其DNA经性菌毛进入细菌细胞后先复制为双链DNA；（2）以DNA为模板翻译蛋白并大量复制出+DNA；（3）+DNA在复制全部完成后切除环化；（4）通过细胞膜时包在由基因、编码形成的外壳蛋白中。M13具有单向复制的特点，在基因和之间进行适当改造后构建的M13载体DNA常在生物工程技术中用于DNA的序列分析、制备单链DNA探针或通过合成寡核苷酸引物进行的定位诱变等。8、
29、Mu噬菌体是一种转座温和噬菌体，Mu只需识别寄主DNA的5个碱基序列即可插入，即具有很大的随机性。已插入的Mu DNA可以复制转座方式，插入其它基因位点，从而可导致大量突变的发生。第五章 真菌的基因重组和遗传分析减数分裂，有丝分裂基因重组：两个不同性状个体内的遗传基因通过一定途径转移到一起，经过遗传物质分子重新组合，形成新遗传型个体的方式，称基因重组。第一次分裂分离：一对等位基因在细胞减数分裂I时就分离，分配到不同的子细胞中的现象。第二次分裂分离：一对等位基因在细胞减数分裂II时才分离，分配到不同的子细胞中去的现象。还原分裂：在进行减数分裂的第一次分裂中，来自同一亲本的两个A和来自另一亲本的两个a发生相互分离分裂，即还原分裂。均等分裂：即在减数分裂的第一次分裂中，来自双亲的各一个A和a趋向一极，另两个A和a趋向另一极的分裂。准性生殖不经过减数分裂而导致基因重组的一种生殖方式，常见于霉
