1、是一类肽链外切酶，专一的从肽链的C末端开始逐个降解，释放出游离的氨基酸。被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化。根据释放的氨基酸量（摩尔数）与反应时间的关系，便可以知道该肽链的C末端氨基酸序列。2测得一种血红蛋白含铁0.426%，计算其最低相对分子质量。一种纯酶按质量计算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%，问其最低相对分子质量是多少？（1）血红蛋白：3指出下面pH条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向移动，即正极，负极，还是保持原点？（1）胃蛋白酶（pI 1.0），在pH 5.0；（2）血清清蛋白（pI 4.9），在pH 6.0；（3）-脂蛋白（pI 5.8），在pH 5.0和pH 9.0
2、；（1）胃蛋白酶pI 1.0环境pH 5.0，带负电荷，向正极移动；（2）血清清蛋白pI 4.9环境pH 6.0，带负电荷，向正极移动；（3）-脂蛋白pI 5.8环境pH 5.0，带正电荷，向负极移动；-脂蛋白pI 5.8环境pH 9.0，带负电荷，向正极移动。4何谓蛋白质的变性与沉淀？二者在本质上有何区别？蛋白质变性的概念：天然蛋白质受物理或化学因素的影响后，使其失去原有的生物活性，并伴随着物理化学性质的改变，这种作用称为蛋白质的变性。变性的本质：分子中各种次级键断裂，使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态，一级结构不破坏。蛋白质变性后的表现：生物学活性消失；理化性质改变：溶解度下降
3、，黏度增加，紫外吸收增加，侧链反应增强，对酶的作用敏感，易被水解。蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂，破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。蛋白质的沉淀可以分为两类：（1）可逆的沉淀：蛋白质的结构未发生显著的变化，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍能溶于原来的溶剂中，并保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇（或丙酮）短时间作用蛋白质。（2）不可逆沉淀：蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质变性而沉淀，不再能溶于原溶剂。如加热引起蛋白质沉淀，与重金属或某些酸类的反
4、应都属于此类。蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在，并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已经变性。5下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：CNBr，异硫氰酸苯酯，丹磺酰氯，脲，6mol/L HCl -巯基乙醇，水合茚三酮，过甲酸，胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，其中哪一个最适合完成以下各项任务？（1）测定小肽的氨基酸序列。（2）鉴定肽的氨基末端残基。（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂？（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。（5）在甲硫氨酸残基羧基侧水解肽键。（6）在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。（1）异硫氰酸苯酯；（2）丹黄
5、酰氯；（3）脲；-巯基乙醇还原二硫键；（4）胰凝乳蛋白酶；（5）CNBr；（6）胰蛋白酶。 6由下列信息求八肽的序列。（1）酸水解得 Ala，Arg，Leu，Met，Phe，Thr，2Val。（2）Sanger试剂处理得DNP-Ala。（3）胰蛋白酶处理得Ala，Arg，Thr 和 Leu，Met，Phe，2Val。当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala和DNP-Val。（4）溴化氰处理得 Ala，Arg，高丝氨酸内酯，Thr，2Val，和 Leu，Phe，当用Sanger试剂处理时，分别得DNP-Ala和DNP-Leu。由（2）推出N末端为Ala；由（3）推出Val位于N端第四，A
6、rg为第三，而Thr为第二；溴化氰裂解，得出N端第六位是Met，由于第七位是Leu，所以Phe为第八；由（4），第五为Val。所以八肽为：Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe。7一个螺旋片段含有180个氨基酸残基，该片段中有多少圈螺旋？计算该-螺旋片段的轴长。180/3.6=50圈，500.54=27nm，该片段中含有50圈螺旋，其轴长为27nm。8当一种四肽与FDNB反应后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及其他3种氨基酸；当这四肽用胰蛋白酶水解时发现两种碎片段；其中一片用LiBH4（下标）还原后再进行酸水解，水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与
7、乙醛酸反应产生紫（红）色产物的氨基酸。试问这四肽的一级结构是由哪几种氨基酸组成的？（1）四肽与FDNB反应后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val，证明N端为Val。（2）LiBH4还原后再水解，水解液中有氨基乙醇，证明肽的C端为Gly。（3）水解液中有在浓H2SO4条件下能与乙醛酸反应产生紫红色产物的氨基酸，说明此氨基酸为Trp。说明C端为GlyTrp（4）根据胰蛋白酶的专一性，得知N端片段为ValArg（Lys），以（1）、（2）、（3）结果可知道四肽的顺序：NValArg（Lys）TrpGlyC。9概述测定蛋白质一级结构的基本步骤。（1）测定蛋白质中氨基酸组成。（2）蛋白质的N
8、端和C端的测定。（3）应用两种或两种以上不同的水解方法将所要测定的蛋白质肽链断裂，各自得到一系列大小不同的肽段。（4）分离提纯所产生的肽，并测定出它们的序列。（5）从有重叠结构的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸排列顺序。如果蛋白质含有一条以上的肽链，则需先拆开成单个肽链再按上述原则确定其一级结构。如是含二硫键的蛋白质，也必须在测定其氨基酸排列顺序前，拆开二硫键，使肽链分开，并确定二硫键的位置。拆开二硫键可用过甲酸氧化，使胱氨酸部分氧化成两个半胱氨磺酸。10 Lys Gly Val Phe Thr在球状蛋白质中所处的位置，为什么？ 核酸2为什么DNA不易被碱水解，而RNA容易被碱水解?因为
9、RNA的核糖上有2 -OH基，在碱作用下形成2 ,3 -环磷酸酯，继续水解产生2 -核苷酸和3 -核苷酸。DNA的脱氧核糖上无2 -OH基，不能形成碱水解的中间产物，故对碱有一定抗性。3一个双螺旋DNA分子中有一条链的成分A = 0.30，G = 0.24， 请推测这一条链上的T和C的情况。 互补链的A，G，T和C的情况。 T + C = 10.300.24 = 0.46； T = 0.30，C = 0.24，A + G = 0.46。4对双链DNA而言， 若一条链中（A + G）/（T + C）= 0.7，则互补链中和整个DNA分子中（A+G）/（T+C）分别等于多少？ 若一条链中（A +
10、T）/（G + C）= 0.7，则互补链中和整个DNA分子中（A + T）/（G + C）分别等于多少 ？ 解答： 设DNA的两条链分别为和则： A= T，T= A，G= C，C= G，因为：（A+ G）/（T+ C）= （T+ C）/（A+ G）= 0.7， 所以互补链中（A+ G）/（T+ C）= 1/0.7 =1.43；在整个DNA分子中，因为A = T， G = C，所以，A + G = T + C，（A + G）/（T + C）= 1； 假设同（1），则A+ T= T+ A，G+ C= C+ G，所以，（A+ T）/（G+ C）=（A+ T）/（G+ C）= 0.7 ；在整个DNA分
11、子中，（A+ T+ A+ T）/（G+C+ G+C）= 2（A+ T）/2（G+C）= 0.712什么是DNA变性？DNA变性后理化性质有何变化？DNA双链转化成单链的过程称变性。引起DNA变性的因素很多，如高温、超声波、强酸、强碱、有机溶剂和某些化学试剂（如尿素，酰胺）等都能引起变性。DNA变性后的理化性质变化主要有： 天然DNA分子的双螺旋结构解链变成单链的无规则线团，生物学活性丧失； 天然的线型DNA分子直径与长度之比可达110，其水溶液具有很大的黏度。变性后，发生了螺旋-线团转变，黏度显著降低； 在氯化铯溶液中进行密度梯度离心，变性后的DNA浮力密度大大增加，故沉降系数S增加； DNA
12、变性后，碱基的有序堆积被破坏，碱基被暴露出来，因此，紫外吸收值明显增加，产生所谓增色效应。 DNA分子具旋光性，旋光方向为右旋。由于DNA分子的高度不对称性，因此旋光性很强，其a = 150。当DNA分子变性时，比旋光值就大大下降。4 糖类的结构与功能7说明下列糖所含单糖的种类、糖苷键的类型及有无还原性?（1）纤维二糖 （2）麦芽糖（3）龙胆二糖 （4）海藻糖（5）蔗糖 （6）乳糖（1）纤维二糖含葡萄糖，1，4 糖苷键，有还原性。（2）麦芽糖含葡萄糖，1，4 糖苷键，有还原性。（3）龙 胆二糖含葡萄糖，1，6 糖苷键，有还原性。（4）海藻糖含葡萄糖，1，1 糖苷键， 无还原性。（5）蔗糖含葡萄
13、糖和果糖，1，2糖苷键，无还原性。（6）乳糖含葡萄糖和半乳糖，1，4糖苷键，有还原性。 6 酶11对于一个符合米氏方程的酶，当S=3Km，I=2KI时（I为非竞争性抑制剂），则/Vmax的数值是多少（此处Vmax指I=0时对应的最大反应速率）？利用非竞争性抑制剂的动力学方程计算：其中 = 1+I/Ki = 3，则所以，/Vmax0.25。12试通过一种反竞争性抑制剂的动力学分析解释其抑制常数KI在数值上是否可能等于该抑制剂的IC50（IC50即酶的活力被抑制一半时的抑制剂浓度，假设酶浓度与底物浓度均固定不变）。令v0为不存在抑制剂时的酶促反应速率，vi是存在反竞争性抑制剂时的反应速率，则当I=
14、IC50时，酶活力被抑制一半，vi=v0/2。由于因此Km = （-2）S如果KI在数值上等于IC50，则 = 2，-2 = 0，Km = 0，而实际上，Km并不为零。因此KI在数值上不可能等于IC50。7 维生素1什么是维生素？列举脂溶性维生素与水溶性维生素的成员。维生素的科学定义是参与生物生长发育与代谢所必需的一类微量小分子有机化合物。脂溶性维生素主要包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素K等，水溶性维生素主要包括维生素B族（维生素B1、维生素B2、维生素PP、维生素B6、维生素B12、叶酸、泛酸、生物素）、硫辛酸和维生素C。2为什么维生素D可数个星期补充一次，而维生素C必须经常补充？维
15、生素D是脂溶性的维生素，可以贮存在肝等器官中。维生素C是水溶性的，不能贮存，所以必须经常补充。3维生素A主要存在于肉类食物中，为什么素食者并不缺乏维生素A？维生素A可在人体内由植物性食物中的胡萝卜素转化而成。4将下面列出的酶、辅酶与维生素以短线连接。5在生物体内起到传递电子作用的辅酶是什么？NAD+、NADP+、FMN、FAD。6试述与缺乏维生素相关的夜盲症的发病机理。视网膜上负责感受光线的视觉细胞分两种：一种是圆锥形的视锥细胞，一种是圆柱形的视杆细胞。视锥细胞感受强光线，而视杆细胞则感受弱光的刺激，使人在光线较暗的情况下也能看清物体。在视杆细胞中，11顺视黄醛与视蛋白组成视紫红质。当杆状细胞
16、感光时，视紫红质中的11顺视黄醛在光的作用下转变成全反视黄醛，并与视蛋白分离，视黄醛分子构型的改变可导致视蛋白分子构型发生变化，最终诱导杆状细胞产生与视觉相关的感受器电位。全反式视黄醛通过特定的途径可重新成为11顺视黄醛，与视蛋白组合成为视紫红质，但是在该视循环中部分全反视黄醛会分解损耗，因此需要经常补充维生素A。当食物中缺乏维生素A时，必然引起11顺视黄醛的补充不足，视紫红质合成量减少，导致视杆细胞对弱光敏感度下降，暗适应时间延长，出现夜盲症状。7试述与缺乏维生素相关的脚气病的发病机理，为什么常吃粗粮的人不容易得脚气病？脚气病是一种由于体内维生素B1不足所引起的以多发性周围神经炎为主要症状的
17、营养缺乏病，硫胺素在体内可转化成硫胺素焦磷酸，后者作为辅酶参与糖代谢中丙酮酸、酮戊二酸的氧化脱羧作用，所以，缺乏维生素B1时，糖代谢受阻，一方面导致神经组织的供能不足，另一方面使糖代谢过程中产生的酮酸、乳酸等在血、尿和组织中堆积，从而引起多发性神经炎等症状。维生素B1在谷物的外皮和胚芽中含量很丰富，谷物中的硫胺素约90%存在于该部分，而粗粮由于加工时保留了部分谷物外皮，因此维生素B1含量充足，常吃粗粮的人不容易缺乏维生素B1，因此不易得脚气病。8试述与缺乏维生素相关的坏血病的发病机理。坏血病是一种人体在缺乏维生素C的情况下所产生的疾病。 维生素C参与体内多种羟化反应，是胶原脯氨酸羟化酶及胶原赖
18、氨酸羟化酶维持活性所必需的辅助因子，可促进胶原蛋白的合成。当人体缺乏维生素C时，胶原蛋白合成产生障碍，胶原蛋白数量不足致使毛细血管管壁不健全，通透性和脆性增加，结缔组织形成不良，导致皮下、骨膜下、肌肉和关节腔内出血，这些均为坏血病的主要症状。9完整的鸡蛋可保持4到6周仍不会腐败，但是去除蛋白的蛋黄，即使放在冰箱内也很快地腐败。试解释为什么蛋白可以防止蛋黄腐败？ 蛋清中含有抗生物素蛋白，它能与生物素结合使其失活，抑制细菌生长，使鸡蛋不容易腐败。10多选题：（1）下列哪一个辅酶不是来自维生素（ ） ACoQ BFAD CNAD+ DpLp ETpp （2）分子中具有醌式结构的是（ ） A维生素A
19、B维生素B1 C维生素C D维生素E E维生素K （3）具有抗氧化作用的脂溶性维生素是（ ） A维生素C B维生素E C维生素A D维生素B1 E维生素D （4）下列维生素中含有噻唑环的是（ ） A维生素B2 B维生素B1 C维生素PP D叶酸 E维生素B6 （5）下列关于维生素与辅酶的描述中，哪几项是正确的（ ）A. 脂溶性维生素包括维生素A、维生素C、维生素D和维生素EB. 维生素B1的辅酶形式为硫胺素焦磷酸C. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是FMN与FADD. 维生素C又名抗坏血酸，是一种强的还原剂（6）下列关于维生素与辅酶的描述中，哪几项是错误的（ ）A. 维生素A的活性形式是全反式
20、视黄醛，它与暗视觉有关B. 辅酶I是维生素PP的辅酶形式C. FMN与FAD是氧化还原酶的辅基D. 硫胺素焦磷酸是水解酶的辅酶（7）转氨酶的辅酶含有下列哪种维生素?（ ） A维生素Bl B维生素B2 C维生素PP D维生素B6 E维生素Bl2（8）四氢叶酸不是下列哪种基团或化合物的载体? ACHO BCO2 C DCH3 E（1）A；（2）E；（3）B；（4）B；（5）B、D；（6）A、D；（7）D；（8）B。8 新陈代谢总论与生物氧化3组成原电池的两个半电池，半电池A含有1mol/L的甘油酸3磷酸和1mol/L的甘油醛3磷酸，而另外的一个半电池B含有1mol/L NAD+和1mol/L NA
21、DH。回答下列问题：（1）哪个半电池中发生的是氧化反应？（2）在半电池B中，哪种物质的浓度逐渐减少？（3）电子流动的方向如何？（4）总反应（半电池A+半电池B）的E是多少？氧化还原电位E 的数值愈低,即供电子的倾向愈大, 本身易被氧化成为还原剂, 另一种物质则作为氧化剂易得到电子被还原。根据该理论判断：（1）半电池A中发生的是氧化反应；（2） 当甘油醛3磷酸被氧化后NAD+减少；（3） 电子由半电池A流向半电池B；（4） 总反应的E 是+0.23V。4鱼藤酮是一种的极强的杀虫剂，它可以阻断电子从NADH脱氢酶上的FMN向CoQ的传递。（1）为什么昆虫吃了鱼藤酮会死去?（2）鱼藤酮对人和动物是否
22、有潜在的威胁?（3）鱼藤酮存在时,理论上1mol琥珀酰CoA将净生成多少ATP?电子由NADH或FADH2经电子传递呼吸链传递给氧，最终形成水的过程中伴有ADP磷酸化为ATP，这一过程称电子传递体系磷酸化。体内95%的ATP是经电子传递体系磷酸化途径产生的。（1） 鱼藤酮阻断了电子从NADH脱氢酶上的FMN向CoQ的传递，还原辅酶不能再氧化, 氧化放能被破坏，昆虫将不能从食物中获得足够的维持生命活动需要的ATP。（2）所有需氧生物电子传递系统十分相似，都包含有FMN和CoQ这种共同的环节，因此鱼藤酮对人体和所有的动物都有潜在的毒性。（3） 当鱼藤酮存在时, NADH 呼吸链的电子传递中断，但不
23、影响FADH2呼吸链和底物水平磷酸化的进行，理论上1mol琥珀酰辅酶A还将生成5molATP。8已知共轭氧化还原对NAD+/NADH 和丙酮酸/乳酸的E0 分别为 -0.32V 和-0.19V，试问：（1） 哪个共轭氧化还原对失去电子的能力大?（2） 哪个共轭氧化还原对是更强的氧化剂?（3） 如果各反应物的浓度都为 lmol/L, 在 pH =7.0和25时, 下面反应的是多少? 丙酮酸 + NADH + H+ 乳酸 +NAD+（1） 氧化还原电位E0的数值愈低,即供电子的倾向愈大,愈易成为还原剂,所以NAD+/NADH氧化还原对失去电子的能力强；（2）丙酮酸/乳酸氧化还原对的氧化还原电位E0
24、的数值较高，得到电子的能力较强，是更强的氧化剂；（3） 根据公式G =-nFE 计算， G =-26 kJ/mol。9 糖代谢 9在一个具有全部细胞功能的哺乳动物细胞匀浆中分别加入1mol下列不同的底物,每种底物完全被氧化为CO2和H2O时，将产生多少摩尔ATP分子?（1） 丙酮酸 （2）烯醇丙酮酸磷酸 （6）草酰琥珀酸（1） 丙酮酸被氧化为CO2和H2O时，将产生12.5mol ATP；（2）磷酸烯醇式丙酮酸被氧化为CO2和H2O时，将产生13.5mol ATP；（6）草酰琥珀酸被氧化为CO2和H2O时，将产生20mol ATP。10 脂质的代谢2什么是-氧化？1mol硬脂酸彻底氧化可净产生
25、多摩尔ATP?脂肪酸氧化作用是发生在碳原子上，逐步将碳原子成对地从脂肪酸链上切下，这个作用即-氧化。它经历了脱氢（辅酶FAD），加水，再脱氢（辅酶NAD+），硫解四步骤，从脂肪酸链上分解下一分子乙酰CoA。1mol硬脂酸（十八碳饱和脂肪酸）彻底氧化可净产生120mol摩尔ATP。1.58+2.58+109-2=12+20+90-2=120 mol ATP。详见10.2.2中的“脂肪酸-氧化过程中的能量转变”。4C16:1与相同碳原子数的饱和脂肪酸氧化途径有何区别?几乎所有生物体的不饱和脂肪酸都只含有顺式双键,且多在第9位,而-氧化中的2-反烯脂酰CoA水化酶和-羟脂酰CoA脱氢酶具有高度立体异
26、构专一性,所以不饱和脂肪酸的氧化除要有-氧化的全部酶外,还需要3-顺, 2-反烯脂酰CoA异构酶和2-反，4-顺二烯脂酰CoA还原酶。详见 10.2.2.5“不饱和脂肪酸的氧化”。不饱和脂肪酸C16:1比相同碳原子数的饱和脂肪酸少生成1.5个ATP。5酮体是如何产生和氧化的?为什么肝中产生的酮体要在肝外组织才能被利用丙酮、乙酰乙酸、-羟丁酸在医学上称为酮体，其如何产生和氧化详见10.2.4.1 “酮体的生成”和10.2.4.2 “酮体的氧化”。肝产生的酮体要在肝外组织才能被利用，是因为肝中有活力很强的生成酮体的酶，但缺少利用酮体的酶。71mol三辛脂酰甘油在生物体内分解成CO2和H2O时，可净
27、产生多少摩尔ATP?1mol三辛脂酰甘油在生物体内加H2O分解成1mol甘油和3mol辛酸。甘油氧化成CO2和H2O时，可净产生18.5mol ATP，3mol辛酸经3次-氧化，生成4mol乙酰CoA。3mol辛酸：3【1.53+2.53+104-2】=150mol ATP，1mol三辛脂酰甘油可净产生168.5mol ATP。10为什么糖尿病人容易中毒？（PPT有）P27011 蛋白质分解和氨基酸代谢5假如给因氨中毒导致肝昏迷的病人注射鸟氨酸、谷氨酸和抗生素，请解释注射这几种物质的用意何在?人和哺乳类动物是在肝中依靠鸟氨酸循环将氨转变为无毒的尿素。鸟氨酸作为C和N的载体，可以促进鸟氨酸循环。
28、谷氨酸可以和氨生成无毒的谷氨酰胺。抗生素可以抑制肠道微生物的生长，减少氨的生成。6什么是鸟氨酸循环，有何实验依据? 合成lmol尿素消耗多少高能磷酸键?尿素的合成不是一步完成，而是通过鸟氨酸循环的过程形成的。此循环可分成三个阶段：第一阶段为鸟氨酸与二氧化碳和氨作用，合成瓜氨酸。第二阶段为瓜氨酸与氨作用，合成精氨酸。第三阶段精氨酸被肝中精氨酸酶水解产生尿素和重新放出鸟氨酸。反应从鸟氨酸开始，结果又重新产生鸟氨酸，形成一个循环，故称鸟氨酸循环（又称尿素循环）。合成1mol尿素需消耗4mol高能键。详见11.2.3“排泄”和“（2）尿素的生成机制和鸟氨酸循环”。7什么是生糖氨基酸、生酮氨基酸、生酮兼生糖氨基酸？为什么说三羧酸循
