德州检验会1.ppt
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德州检验会1.ppt
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北京东方志禾商贸有限公司李保昌,临床检验项目的合理选择与配伍,0,1,Torch检测的内容包括,Toxoplasmagondii:
弓形虫Others:
梅毒,B19细小病毒Rubellavirus:
风疹Cytomegalovirus:
CMVHerpesSimplexvirus:
单纯疱疹病毒,2,ToRCH检测方法,印迹法:
a.蛋白印迹,westernblot,b.将纯化的抗原印迹于膜上Euroimmune)金标法酶标法(a.间接法b.捕获法)化学发光法(a.间接法b.捕获法)化学发光法酶标法(捕获法)印迹法、酶标间接法金标法定量定性,3,CMV概述,人类感染面最广的病毒之一传播途径多样直接接触:
唾液,性接触,垂直传播:
经胎盘母婴传播血液传播:
输血(白细胞)移植潜伏部位常在唾液腺、乳腺、肾等影响因素-年龄-种族-职业-社会经济条件影响后果:
健康人(机会性感染):
无临床症状,单核细胞增多症免疫系统受损的病人:
肺,心,肝和肾的多系统损伤胎儿:
先天性CMV感染,核内包涵体呈“猫头鹰眼”状,4,先天性CMV感染-Congenitalinfection,-孕妇初次感染primaryinfection(对胎儿的影响严重)孕妇再次感染re-infection(JClinVirol.2009Dec;46Suppl4:
S6-10.Epub2009Oct2.Congenitalcytomegalovirus(CMV)epidemiologyandawareness.)(占先天性CMV的3/4),90%无症状10%出生有症状,几个月或几年后有后遗症(10-15%)无症状,先天性CMV感染(0.2-2.5%),先天性CMV感染来源于孕妇的CMV急性感染,感染,感染后果,5,先天性CMV感染胎儿不良后果神经发育方面疾病为主,出生后有症状出生后无症状但以后发病:
neurologicalproblems(unilateralorbilateralsensoryneuralhearingloss单或双侧感觉神经性听力丧失),IndianJPediatr.2010Jan;77
(1):
77-9.Neonatalcytomegalovirusinfection:
diagnosticmodalitiesavailableforearlydiseasedetection.,小头畸形(70%),智力缺陷(35%),听力障碍(60%),肝脾肿大(70%),黄疸(68%),血小板减少症(65%),低体重(65%),肺炎(2-5%)先天性心脏病(5%).,6,1.IgM阳性就是近期感染吗?
!
-仅有IgM+是不能下结论的。
2.原发感染与复发感染的临床处理不同,如何鉴别-亲和力3.该如何做:
IgG/IgM/Avidity合理配伍,灵活选择应用。
伴IgM由-转+则为复发感染,巨细胞病毒CMV感染状况的实验检测方案,7,导致孕妇CMVIgM检测阳性结果原因众多,初次急性感染继发急性感染,交叉反应(疱疹病毒家族)患者体内IgM持续阳性免疫系统的多克隆刺激,单独检测CMVIgM导致假阳性,一定加入IgG检测,8,多克隆激活,多克隆激活示意图T、B细胞可通过多克隆激活剂直接被激活,Preferentialretroviral-mediatedtransductionofEBV-andCMV-specificTcellsafterpolyclonalT-cellactivation.SauceD,MercierP,BattiniJL,FerrandC,CertouxJM,etalGeneTher.2004Jun;11(12):
1019-22.,9,CMVIgGavidity检测:
引入细胞免疫,确定感染时间,CMVavidity检测,B细胞在淋巴组织生发中心会经历克隆选择,生成高亲合力抗体的浆细胞才会选择性存活,而非高亲合力的则凋亡。
10,卫生部临检中心CMV推荐检测方案,11,LiaisonCMVpanel,CMVIgG:
IU/mL0.4NEGATIVE0.4IU/mL0.6EQUIVOCALIU/mL0.6POSITIVECMVIgM:
AU/mL15NEGATIVE15AU/mL30EQUIVOCALAU/mL30POSITIVEavidityrecommendedCMVIgGavidity:
Av0.200LOWAVIDITY0.200Av0.300MODERATEAVIDITYAv0.300HIGHAVIDITY,12,胎儿CMV感染的诊断标准(北美),羊膜腔穿刺检测羊水CMV:
CMV分离培养(金标准)&PCR检测注意:
在孕妇CMV感染后7周和孕21周后,检测过早往往导致假阴性超声检查发现胎儿不良结果:
JObstetGynaecolCan.2010Apr;32(4):
348-54.Cytomegalovirusinfectioninpregnancy.,13,确认CMV感染后的治疗,CMVhyperimmuneglobulin新生儿出生不良后果明显减少抗病毒药物:
丙氧鸟苷(ganciclovirDHPG)有防止CMV扩散作用;耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸钠,但效果比前者差。
孕妇伐昔洛韦新生儿更昔洛韦、缬更昔洛韦终止妊娠慎重,确诊胎儿CMV感染,同时与患者及家庭充分交流,不得已而为之的最后选择CMV疫苗处于研发中?
疫苗对CMV再次感染有效性等问题尚待评估?
14,弓形虫Toxoplasma,15,怀孕期间弓形虫诊断,临床上常无明显症状:
轻度发热,酸痛,淋巴结肿大,无力,皮疹,眼部感染等症状对成人危害不大,但是,在孕妇可引起流产,早产和死胎。
对于未出生的胎儿,它可以侵袭大脑和眼睛,导致严重疾病。
主要的传染源是猫的排泄物,进食生的或半生的肉类也有可能感染。
实验室诊断方法:
血清学检测及其他,16,弓形虫感染来源,生食感染的肉类食入污染的蔬菜肉类加工食入生鲜海产品猫等动物等等,ClinInfectDis.2009Sep15;49(6):
878-84.RiskfactorsforToxoplasmagondiiinfectionintheUnitedStates.,17,怀孕各阶段弓型虫的垂直感染率不同,在孕期的前三个月为约15%,进行治疗后,只有7%的新生儿发生了感染。
孕中期三个月的传染率为24-30%孕期的后三个月,感染的发生率高达59%。
早期检测和治疗具有重要意义。
MemInstOswaldoCruz.2009Mar;104
(2):
389-92.Diagnosisofcongenitaltoxoplasmosis:
prenatalandneonatalevaluationofmethodsusedinToulouseUniversityHospitalandincidenceofcongenitaltoxoplasmosis.MontoyaJ,RemingtonJ.ManagementofToxoplasmagondiiinfectionduringpregnancy.ClinInfectDis2008;47:
55466.,垂直感染率随孕周越来越高孕早期的感染导致的胎儿先天性不良后果较中后期更严重早期检测和治疗具有重要意义。
弓形虫感染筛查流程,18,19,LiaisonToxoplasma,LiaisonToxoIgGII:
Curverange0-400IU/mLIU/mL7.2NEGATIVE7.2IU/mL8.8EQUIVOCALIU/mL8.8POSITIVELiaisonToxoIgM:
AU/mL6.0NEGATIVE6.0AU/mL8.0EQUIVOCALAU/mL8.0POSITIVELiaisonToxoIgGAvidityIIAv3LOWAVIDITY3Av4MODERATEAVIDITYAv4HIGHAVIDITY,20,弓形虫感染确诊实验孕妇确诊,胎儿确诊,孕妇确诊:
血清学检测(确诊急性感染)Sabin-FeldmantestDifferentialAgglutination(AC/HS)testIgGaviditytestIgM,IgE,IgA胎儿确诊:
羊水检测(确诊感染)羊水穿刺PCR:
孕18周后/感染4周后做(PCR结果阴性不能排除胎儿未被感染)超声定期检查(确诊不良)对于确诊感染的病例孕期每个月定期检查,21,孕妇弓形虫急性感染的治疗,孕18周前发生垂直感染-口服螺旋霉素孕18周后发生垂直感染或确诊胎儿弓形虫感染-乙胺嘧啶,同时补叶酸,22,风疹Rubella,300,000,23,风疹病毒,孕期风疹感染会导致死胎、早产、及一系列新生儿先天性缺陷(congenitalrubellasyndromeCRS).胎儿受累的严重程度与孕期何时感染病毒有很大关联50%以上风疹初次感染的患者没有临床症状,孕前感染:
几乎没有风险孕期0-12周:
胎儿先天性感染风险100%,导致大多数新生儿先天性异常孕期13-16周:
15%的耳聋及白内障等视网膜疾病孕期16周后:
胎儿发育正常,极少数出现耳聋及视网膜疾病,24,天然获得性免疫&疫苗免疫,天然获得性风疹免疫具有高度保护性,天然感染之后发生再感染几率很低注射疫苗获得性免疫保护时限16年左右风疹IgG检测10-15IU/ml具有保护性,ReprodToxicol.2006May;21(4):
350-82.Epub2006Mar27.Laboratoryassessmentanddiagnosisofcongenitalviralinfections:
Rubella,cytomegalovirus(CMV),varicella-zostervirus(VZV),herpessimplexvirus(HSV),parvovirusB19andhumanimmunodeficiencyvirus(HIV).,25,卫生部临检中心风疹推荐检测方案,?
?
26,IgG的亲和力约4-6周即可达到较高水平,相对快速,所以在确定感染时间上应用价值有限。
IgG亲合力受到多种因素影响-亲合力增加迅速,27,不建议做风疹IgG亲合力检测-DrLilianeGrangeot-Keros,Recommendation:
DonotperformRubellaIgGAviditytestingbutfollowthevariationofIgGandIgMantibodylevels,28,HSV,29,HSV概述,HSV感染临床症状没有特异性HSV-1型感染率很高,主要通过非性接触;也可通过性传播,并且性传播的方式近年有增高的趋势HSV-2型主要通过性传播途径,HIV易感女性感染率往往比男性要高主要威胁在孕妇,导致胎儿和新生儿感染孕妇初次感染HSV通过胎盘传给胎儿/新生儿的可能性远高于HSV复发的,MaternalandNeonatalHerpesSimplexVirusInfectionsNEnglJMed2009;361:
1376-85.,30,先天性和新生儿感染HSV的临床特点,先天性HSV(宫内感染)流产,宫内发育迟缓,畸形皮肤小囊泡,疤痕眼部损伤(脉络视网膜炎,小眼畸形,白内障)神经损伤(颅内钙化,小头畸形等),新生儿涉及皮肤,眼口部损伤,脑炎多系统功能衰竭,31,HSV孕妇血清学检测意义,孕妇的血清学表现鉴别孕妇是否高风险亚型辨别:
对临床治疗和孕期指导意义有限,“thetype-specifictestisusefulbutnotessential”Herpessimplexvirusinfectioninpregnancyandinneonate:
statusofartofepidemiology,diagnosis,therapyandprevention.VirologyJournal2009,6:
40,32,Primaryinfectionornon-primaryfirstepisode30-34WG,Acyclovir200mgfivetimesdailyAcyclovir400mgthreetimesdailyfrom36weekstodelivery,GenitalLesion+,GenitalLesion-,CaesareanSection,VaginalDelivery,Primaryinfectionornon-primaryfirstepisode34WG,Acyclovir200mgfivetimesdailyAcyclovir400mgthreetimesdailyfrom36weekstodelivery,CaesareanDelivery,AccidentalVaginalDelivery,VirusisolationinthemotherandnewbornFollowup,VirusisolationinthemotherandnewbornToconsiderneonataltherapy,VirusisolationinthemotherandnewbornToconsiderneonataltherapy,孕期初次HSV临床方案,WG:
weeksgestation,33,Recurrentinfection,Acyclovir200mgfivetimesdailyat36weeksgestation,Positivecultures&negativegenitallesionsatthetimeofdelivery,CaesareanSection,caesareansectionwithintactmembranesorwithin4-6hoursfrommembranesrupture,孕期HSV复发的临床方案,WG:
weeksgestation,VaginalDelivery,Negativecultures&negativegenitallesionsatthetimeofdelivery,Positivegenitallesionsatthetimeofdelivery,Maternalantivitaltherapy+Neonatlantiviraltreatment(ifneonatedevelopssignsofinfection),LazzarottoTiziana,UOdiMicrobiologia,PoliclinicoS.OrsolaMalpighi,Bologna,34,HSV的IgG和IgM检测试剂盒,HSV-1/2IgGHSV-1IgGHSV-2IgGHSV-1/2IgM,我该选择哪个品牌的Torch试剂,它们真的有区别吗?
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