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阴离子双子表面活性剂与牛血清蛋白相互作用研究
阴离子双子表面活性剂与牛血清蛋白
相互作用研究
摘要
蛋白质在表面活性剂溶液中可保持活性,二者构成的复配体系在食品、化妆品及生物技术等众多领域中都有着广泛的应用。
关于蛋白质和传统表面活性剂相互作用的研究较为深入和系统,而双子表面活性剂和蛋白质的复配研究仍有很大的突破空间。
本实验以壬基酚、二溴烷烃及氯磺酸为原料,合成了两种烷基苯磺酸盐型阴离子双子表面活性剂9BA-m-9BA(m=4,6),采用光谱法研究了其表面活性及其与牛血清蛋白的相互作用。
研究表明,9BA-6-9BA比9BA-4-9BA的表面活性更高,其与牛血清蛋白的相互作用更加强烈。
双子表面活性剂的加入一方面加大了酪氨酸和临近肽键及色氨酸之间的距离,使其荧光强度增大,另一方面则使色氨酸所处环境的微极性变小,致使其荧光强度降低。
另外,研究发现,双子表面活性剂对牛血清蛋白的荧光猝灭机理中至少包含静态猝灭。
关键词:
双子表面活性剂;牛血清蛋白;相互作用;荧光
目录
摘要I
第1章文献综述1
1.1Gemini表面活性剂概述1
1.2Gemini表面活性剂的结构与性能2
1.2.1Gemini表面活性剂的结构2
1.2.2Gemini表面活性剂的性能3
1.3Gemini表面活性剂的分类3
1.3.1阳离子型Gemini表面活性剂3
1.3.2阴离子型Gemini表面活性剂4
1.3.3非离子型Gemini表面活性剂5
1.3.4两性离子型Gemini表面活性剂6
1.4Gemini表面活性剂的应用7
1.4.1洗涤剂7
1.4.2抗静电剂7
1.4.3生物技术7
1.4.4金属防腐剂8
1.4.5化学驱三次采油8
1.5Gemini表面活性剂与蛋白质的相互作用9
1.5.1表面活性剂与蛋白质的相互作用研究概况9
1.5.2阴离子表面活性剂与蛋白质的相互作用9
1.5.3表面活性剂与蛋白质相互作用的研究方法10
1.6论文的研究背景和研究内容10
第2章实验部分13
2.1实验药品与试剂13
2.2实验仪器与设备14
2.3烷基苯磺酸盐型Gemini表面活性剂9BA-m-9BA的合成14
2.3.1实验合成路线14
2.3.2合成中间体二醚14
2.3.3合成9BA-m-9BA15
2.4Gemini表面活性剂9BA-m-9BA与BSA的相互作用15
2.4.1芘探针荧光光谱的测定15
2.4.2同步荧光的测定16
2.4.3内源荧光的测定16
2.4.4紫外吸收光谱的测定16
第3章结果与讨论17
3.1芘探针荧光光谱17
3.2同步荧光18
3.3内源荧光19
3.4紫外吸收光谱21
第4章结论与建议23
4.1结论23
4.2建议23
参考文献25
第1章文献综述
1.1Gemini表面活性剂概述
Gemini表面活性剂,是通过一个联接基团将两个相同或几乎相同的传统表面活性剂单体在其亲水头基或亲水头基附近连接在一起而形成的一类新型表面活性剂。
其独特的结构、优良的性质和广泛的应用空间,吸引着越来越多研究者投身于Gemini表面活性剂的研究领域中。
上个世纪70年代至今,Gemini表面活性剂的研究工作已取得了重大进展。
1971年,Bunton等[1]在Gemini表面活性剂这一领域迈出了历史性的一步,合成了第一个阳离子型Gemini表面活性剂。
1974年,Deinega等[2]探索并合成了一族新型双亲分子。
此时,Gemini表面活性剂仍没有引起广大研究者们足够的重视。
1990年后,Zhu等[3-4]合成并研究了一系列具有柔性联接基团的双烷基链Gemini表面活性剂。
而此时,这类新型的表面活性剂仍然没有统一的命名。
1991年,Menger[5]合成并研究了联接基为刚性基团的双烷烃链表面活性剂,并称该类型的表面活性剂为:
Geminisurfactants。
运用Gemini在天文学上的意义生动而形象地表现了这一新型表面活性剂的分子结构特点。
随后,“Gemini”这一命名被广大的研究者所接受并采纳。
1991之年,Rosen等[6]系统地合成了通过氧乙烯和氧丙烯联接的Gemini表面活性剂,并进行了深入的研究。
同期,法国Zana小组对一系列季铵盐型Gemini表面活性剂的研究亦取得了重大的成果[7-13]。
众多研究成果表明,Gemini的表面活性比相应的传统表面活性剂要高很多。
国外在双子表面活性剂这一领域的研究工作起步较早,而且研究范围广泛,研究内容系统;以法国的Zana研究组、美国的Rosen研究组以及日本的Nakatauji研究组等为代表。
我国对于Gemini表面活性剂的研究起步较晚,因此与国外存在一定的差距。
目前,国内从事表面活性剂领域研究工作的小组主要有福州大学的赵剑曦小组,北京大学的黄建滨小组,中科院化学所的王毅琳小组等,并取得了比较大的成就。
1.2Gemini表面活性剂的结构与性能
1.2.1Gemini表面活性剂的结构
Gemini表面活性剂含有两个亲油基、两个亲水基和一个联接基团。
其结构如图1所示。
图1.2Gemini表面活性剂的结构示意图
A1,A2—亲水基;S—联接基团;R1,R2—疏水基
联接基团可以变化,其长度、化学结构和性质均可不同。
既可以是支链,也可以是直链;有刚性的,也有柔性的;能疏水,亦能亲水。
显然,不同亲水基、疏水基和联接基的组合意味着结构各异、种类各异的Gemini表面活性剂;而且,通过对这些基团加以修饰,便可改善Gemini表面活性剂的性质及性能。
例如:
联结基团的种类和长度极大地影响其CMC值。
刚性、疏水意味着高CMC值;而柔性、亲水则恰好反之。
依亲水基的性质,Gemini表面活性剂分为阳离子、阴离子、非离子和两性离子型四类。
目前,阳离子Gemini表面活性剂的研究工作已经相当深入,这主要归因于其合成及纯化过程相对容易;而其他三种类型的Gemini表面活性剂的研究还有很大的空间有待突破。
阴离子型Gemini表面活性剂方面,磷酸盐、羧酸盐、硫酸盐和磺酸盐四种主要类型的研究已取得很多重大成果。
非离子表面活性剂主要为醇醚、酚醚类和糖类衍生物,而关于两性离子型Gemini表面活性剂的研究成果则鲜有报导。
Gemini表面活性剂的结构对性能有很大影响,关于这一点,已取得了较为深入的研究。
1.2.2Gemini表面活性剂的性能
Gemini表面活性剂的联接基以化学键的形式将两个离子头基紧密连接在一起。
这拉近了两个疏水基之间的距离,使疏水相互作用大大加强;而且,因为化学键的关系,离子头基间的相互排斥被大大削弱。
这解释了为什么Gemini表面活性剂具有更高的表面活性[14]。
目前,由于合成、分离及纯化等各方面的不同,各类型的Gemini表面活性的研究状况表现出较大的差距。
阳离子型Gemini表面活性剂的研究最为深入,阴离子型Gemini表面活性剂的研究相对少很多,而两性及非离子型Gemini表面活性剂的研究则更少。
据研究,离子型Gemini表面活性剂具有如下几大重要特性:
(1)更易聚集生成胶束;
(2)具有优良的钙皂分散特性;
(3)在许多应用方面,是优良的润湿剂;
(4)降低水溶液表面张力的效率非常突出;
(5)更易吸附在气/液表面,从而更有效地降低水溶液的表面张力;
(6)衡量离子型表面活性剂水溶性的Kraff点(TK越低,水溶性越好)很低;
(7)可与传统的非离子表面活性剂、蛋白质及水溶性聚合物等复配,表现出优良的性质,在众多领域具有重大的应用价值。
1.3Gemini表面活性剂的分类
1.3.1阳离子型Gemini表面活性剂
阳离子型Gemini表面活性剂主要有季铵盐型、酰胺盐型和杂环型三类。
其中,研究的最为系统和深入的为季铵盐型Gemini表面活性剂。
陈功等[15]以壬基酚为原料先后与甲醛、环氧氯丙烷及三乙醇胺反应制得一种季铵盐Gemini表面活性剂。
实验测定了其CMC值及CMC下的表面张力,与传统表面活性剂进行了比较。
结果表明,该表面活性剂的CMC比传统表面活性剂低1~2个数量级,而相应的表面张力则比较接近。
该表面活性剂的结构如下:
Eastoe等[16]合成了一种新型季铵盐Gemini表面活性剂,研究了其在水中的光反应、界面性质及聚集态变化。
该表面活性剂引起了许多研究者的兴趣,因为其联接基团为对称二苯代乙烯发色团。
其结构如下:
Tehrani-Bagha等[17]合成了一种联接基团可降解的季铵盐Gemini表面活性剂。
据其结构特点,简称为12Q2OCO1Q12,Q代表季铵基,数字表示亚甲基或甲基的数目。
测定了其临界胶束浓度,并深入研究了其化学水解、生物降解过程及其毒性。
与其两种水解产物相比,该季铵盐Gemini表面活性在CMC处具有最低的表面张力。
由于相邻两个季铵基的邻近作用,其分子中的酯键在酸性一侧非常稳定,而在微弱的碱性条件下则变得极不稳定;因此,可通过调节pH控制其水解过程。
实验证明,其28天后其生物降解率超过60%,可归为快速生物降解类。
该Gemini表面活性剂已被证实对水生生物有毒(ErC50值为0.27mg/L),尽管其毒性比其水解产物低。
1.3.2阴离子型Gemini表面活性剂
阴离子型Gemini表面活性剂主要有羧酸盐型,磷酸盐型,硫酸盐型和磺酸盐型四类,并且关于其合成方法的研究也较为深入。
Renouf等[18]合成了一系列烷基磺酸盐Gemini表面活性剂,采用了两种不同的方法测定了其表面张力及CMC值,并与相应的传统表面活性剂进行了比较。
同时,研究并发现了,联接基团长度的增加将导致该类表面活性剂的CMC值降低。
其中一种表面活性剂的结构如下:
Menger等[19]合成了两个系列的磷酸盐型Gemini表面活性剂,并测定了其表面张力与浓度的关系,系统研究了其疏水尾链的长度对其表面活性的影响。
其中一个系列的表面活性剂的联接基团为对二苯代乙烯基,其结构如下:
1.3.3非离子型Gemini表面活性剂
非离子型Gemini表面活性剂只有两类,即醇醚、酚醚型和糖类衍生物,后者主要有烷基糖苷型和糖基酰胺型。
糖类衍生物具有环保上的优势,其原料可再生、产品易生物分解,符合当前的环保体制,因此受到优先关注。
Tracy等[20]以月桂酸为原料合成了酚醚型非离子Gemini表面活性剂,其合成路线如下:
此外,Tracy在非离子型Gemini表面活性剂这一领域取得了丰富的研究成果。
其合成的非离子型Gemini表面活性剂数量和系列众多,并进行了深入地探索和研究,取得了重大的进展,为这一领域的研究者提供了很多具有重大价值的参考,以下两种分子即为Tracy合成。
1.3.4两性离子型Gemini表面活性剂
两性离子型Gemini表面活性剂主要有:
氨基酸型、甜菜碱型、咪唑啉型等。
蒋惠亮等[21]以N,N’-二羟乙基乙二胺、氯乙酸钠及硬酯酰氯为原料合成了一种氨基酸型两性离子Gemini表面活性剂。
其结构如下:
关于两性离子型Gemini表面活性剂研究相对较少,该方面的报导也不多。
现简要列举两种两性离子型Gemini表面活性剂分子如下:
1.4Gemini表面活性剂的应用
1.4.1洗涤剂
Gemini表面活性剂的CMC值更低,具有更高的表面活性;因此,其溶液中未胶束化的部分浓度较低。
基于此,在降低毒性,减轻刺激性和溶解非水溶性物质方面,Gemini表面活性剂表现出优越性;而且,Gemini表面活性剂的起泡、分散和乳化性能更佳,对高浓度洗涤剂的配制意义重大。
研究发现,由普通表面活性剂、Gemini表面活性剂和非离子聚合物所制成的洗涤剂,不但具有促进污物沉降、提高洗涤能力的效果,而且还具有更强的溶解能力,即使该配方中Gemini表面活性剂的浓度非常低。
当前,由于价格昂贵,Gemini表面活性剂在洗涤剂工业未能得到大规模应用。
但其与传统表面活性剂复配使用,也表现出很强的洗涤效果,这在工业中已经得到了一定的发展和应用。
1.4.2抗静电剂
研究发现,当Gemini表面活性剂分子吸附在纤维界面时,其亲油基指向纤维,亲水基则背离纤维。
基于这一点,纤维的离子和吸湿导电性能明显增强。
因为Gemini表面活性剂分子吸附到纤维界面后产生了放电现象,致使纤维表面的电阻降低;这使纤维静电的产生与释放达到平衡,从而防止了纤维的静电积累,达到抗静电的目的。
显然,Gemini表面活性剂具有更多的亲水、亲油基团。
这意味着其作为抗静电剂时,将比传统的表面活性剂具有更好的效果。
1.4.3生物技术
酶是具有生物活性的一类蛋白质,在生物体内扮演着至关重要的角色。
当前,于医药合成方面,酶的作用日益突出,酶制剂在临床上的应用价值也正受到越来越多研究者们的关注;但其分离、纯化及其稳定性方面的问题仍亟待解决。
Gemini表面活性剂在有机相中将自发形成反相胶束,利用这一点,可在一定条件下将水溶蛋白质提取至反向胶束的极性核中,然后再创造条件将其提取至另一水相,从而实现蛋白质转移并达到分离和提纯的目的。
这种方法的优势明显:
酶不与有机相直接接触,失活几率大大降低。
另外,采用Gemini表面活性剂与相关物质构成的微乳液体系可同时包裹酶和底物,模拟酶在细胞中的功能。
因此,Gemini表面活性剂在生物技术领域具有广阔的应用前景。
1.4.4金属防腐剂
由于金属表面大多带有电荷,Gemini表面活性剂的两个极性亲水基将通过物理或化学作用吸附到金属表面。
在吸附过程中,亲水基靠近金属表面,亲油基则远离金属表面。
表面活性剂的亲水性和亲油性对其吸附力和分散性影响很大。
亲水性较强时,表面活性剂对金属具有较强的吸附力,但此时的分散性较差;亲油性较强时,则情况恰好相反。
因此,表面活性剂的亲水亲油值(HLB值)应视具体情况而选择。
表面活性剂吸附在金属表面上时,界面性质和金属表面的电荷分布状态都将发生改变。
这使得金属表面的能量状态趋于稳定,腐蚀反应所需活化能升高,即能量障碍增加,从而导致腐蚀速率减慢。
与此同时,已吸附到金属表面上的表面活性剂分子的亲油基形成一层疏水性保护膜,起到阻碍与腐蚀反应相关的电荷及物质的移动,从而进一步降低了腐蚀反应的速率。
譬如,原油中含有大量杂质,其在储存过程中会对设备造成严重腐蚀。
加入少量羟基乙叉二膦酸即可在很大程度上减轻原油对存储设备的腐蚀。
1.4.5化学驱三次采油
在化学驱三次采油作业中,驱油方式主要有三种。
表面活性剂单独或与聚合物一起使用,表面活性剂与碱以及聚合物一起使用。
上述三种驱油方式中,表面活性剂用于降低油水界面张力;聚合物可提高注入流体的粘度,从而改善油水流度比;碱可与原油中的酸、酯类活性组分反应生成新的表面活性剂,达到进一步降低界面张力的效果。
总之,在三次采油作业中,Gemini表面活性剂具有巨大的应用潜力:
(1)增溶等量原油时,所需Gemini表面活性剂浓度要低得多;
(2)与其他驱油助剂有更好的配伍性,可降低实际应用成本;
(3)在较低浓度下即达到超低界面张力,对驱油效率的大幅度提高意义重大;
(4)具有更好的水溶性和耐盐性。
1.5Gemini表面活性剂与蛋白质的相互作用
1.5.1表面活性剂与蛋白质的相互作用研究概况
研究发现,蛋白质在表面活性剂溶液中可保持活性,二者的混合体系(Protein-Surfactant,P-S)在众多领域中发挥着广泛而重要的应用,二者相互作用的特性也吸引着越来越多研究者的关注及探索。
表面活性剂的加入可提高某些蛋白质的热稳定性,据此可优化相关的蛋白质产品。
在蛋白质的提取和纯化中,表面活性剂的引入也将极大地提高效率。
表面活性剂作为变性剂时,可用于蛋白质的自组装和稳定性的研究;其作为探针分子,则可用于蛋白质的结构和功能方面的研究。
研究表明,表面活性剂的种类、浓度和环境对P-S体系都有着重大的影响;二者之间主要存在着静电作用和疏水作用。
离子型表面活性剂与蛋白质作用时,主要是极性基的静电作用和疏水碳氢链的疏水作用,分别结合到蛋白质的极性和疏水部分,形成P-S复合物。
在P-S体系中,关于蛋白质-阴离子表面活性剂体系的研究最多。
因为这二者之间的相互作用最强,而其他类型的P-S体系中,二者的相互作用相对要弱很多。
1.5.2阴离子表面活性剂与蛋白质的相互作用
阴离子型表面活性剂与蛋白质之间有着相对较强的相互作用,其离子头基静电作用较强,结合到蛋白质表面带相反电荷的基团上,非极性基团则通过疏水作用结合到蛋白质非极性区域。
二者相互作用依赖蛋白质表面的电荷、阴离子型表面活性剂的浓度和结构等;其中,蛋白质表面的电荷影响最大。
在蛋白质-阴离子表面活性剂(Protein-AnionicSurfactant,P-AS)体系中,二者的相互作用以静电作用和疏水作用为主要驱动力;静电作用表现为静电吸引或静电排斥,与蛋白质的表面电荷密切相关,疏水作用一般与疏水链的长度有关。
十二烷基硫酸钠(SDS)的化学性质稳定,在酸性或碱性介质中以及加热条件下都不发生分解;而牛血清蛋白(BSA)来源广泛、易于分离,与人血清蛋白结构相似,且具有良好的水溶性、稳定性。
因此,关于二者相互作用的研究引起了很多研究者的兴趣并取得了一系列重大成果。
Kelly等[22]研究发现:
固定[BSA]不变,逐渐增加[SDS],当[SDS]/[BSA]较小时,SDS可为BSA的结构稳定剂,当[SDS]浓度提高到一定浓度时,BSA完全变性,Moriyama等[23]则证实了这一结果。
1.5.3表面活性剂与蛋白质相互作用的研究方法
构成蛋白质的20余种氨基酸中,色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)残基的生色团在280nm波长附近有一个吸收峰,苯丙氨酸(Phe)残基的生色团在257nm波长附近有一个吸收峰;此外,肽键在225nm波长附近对光的强烈吸收也给出一个特征吸收峰。
所以,蛋白质能产生紫外吸收光谱。
表面活性剂地加入,将导致蛋白质生色基团紫外吸收光谱发生变化。
因此,可通过紫外吸收光谱研究P-S体系中这几种氨基酸残基微环境的变化,进而推断二者的相互作用情况。
上述三种残基能吸收270~300nm的紫外光而发出紫外荧光。
Trp、Tyr和Phe的荧光峰分别位于348、303和282nm;其中,Trp的荧光强度最大,Tyr次之,Phe的荧光强度可忽略。
因此,蛋白质的内源荧光主要是由Trp和Tyr残基所发射。
表面活性剂地加入,会导致蛋白质荧光的猝灭。
所以,可利用荧光光谱法研究表面活性剂与蛋白质的相互作用。
此外,圆二色光谱和电子自旋共振光谱技术也广泛应用于P-S体系的研究。
1.6论文的研究背景和研究内容
目前,关于阳离子表面活性剂性能与结构的研究,已经取得了比较系统的成果;相比之下,阴离子表面活性剂则由于合成路线通常较长,分离提纯困难等原因而研究得相对较少。
传统的烷基苯磺酸盐表面活性剂发泡性能优良、去污能力强、耐盐性和分散性好,使其在众多领域中得到了广泛应用;而烷基苯磺酸盐Gemini表面活性剂各方面的性能都有了很大的提高,其应用前景更加广阔。
因此,有必要对烷基苯磺酸盐Gemini表面活性剂进行深入研究,揭示其结构与性能之间的关系,从而为其应用奠定更加坚实的基础。
此外,表面活性剂和蛋白质的复配在众多领域都有着广泛的应用,因此研究二者之间的相互作用也显得十分重要。
本文中,我们合成了两种烷基苯磺酸盐阴离子Gemini表面活性剂,运用光谱法研究了其表面活性及其与牛血清蛋白的相互作用。
而且,在二者相互作用的过程中,考察了联接基团的长度对BSA荧光强度的影响,这也是本论文的创新点。
第2章实验部分
2.1实验药品与试剂
表2.1实验药品与试剂
试剂名称
级别
生产厂家
壬基酚
99%
西亚试剂
四丁基溴化铵
99%
武汉格奥化学技术有限公司
1,4-二溴丁烷
98%
武汉格奥化学技术有限公司
1,6-二溴己烷
98%
武汉格奥化学技术有限公司
氢氧化钠
分析纯
国药集团化学试剂有限公司
无水乙醚
分析纯
天津市科密欧化学试剂有限公司
蒸馏水
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
冰乙酸
分析纯
天津市博迪化工股份有限公司
无水硫酸镁
分析纯
天津市科密欧化学试剂有限公司
石油醚
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
乙酸乙酯
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
二氧化硅
分析纯
国药集团化学试剂有限公司
氯磺酸
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
二氯甲烷
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
氮气
化学纯
武汉市同和气体制造有限公司
无水乙醇
分析纯
天津市富宇精细化工有限公司
芘
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
丙酮
分析纯
天津市富宇精细化工有限公司
牛血清蛋白
>99.0%
国药集团化学试剂有限公司
无水磷酸二氢钠
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
十二水合磷酸氢二钠
分析纯
武汉格奥化学技术有限公司
2.2实验仪器与设备
表2.2实验仪器与设备
设备名称
生产厂家
智能恒温磁力搅拌器
武汉科尔仪器设备有限公司
循环水式真空泵
巩义市予华仪器有限公司
旋转蒸发仪
上海亚荣生化仪器厂
超声波清洗器
昆山市超声仪器有限公司
电子天平
赛多利斯科学仪器(北京)有限公司
荧光分光光度计
安捷伦科技有限公司
紫外分光光度计
珀金埃尔默股份有限公司
2.3烷基苯磺酸盐型Gemini表面活性剂9BA-m-9BA的合成
2.3.1实验合成路线
2.3.2合成中间体二醚
(1)向100mL烧瓶中加入12.12g(55mmol)壬基酚和1g四丁基溴化铵,然后加入50g质量分数为20%的氢氧化钠水溶液,磁力搅拌。
(2)升温至70℃后,加入25mmol1,4-二溴丁烷或1,6-二溴己烷,继续升温至95℃,搅拌过夜。
(3)反应结束后冷却至室温,用30mL无水乙醚萃取3次;再用冰醋酸调pH至中性,然后用30mL蒸馏水洗涤三次;加无水硫酸镁干燥,过夜。
(4)减压抽滤,蒸干溶剂,得二醚(粗产物)。
(5)利用柱层析法精制二醚,淋洗剂为石油醚和乙酸乙酯(极性控制为石油醚:
乙酸乙酯=15:
1)。
m=4时,产率为80.97%;m=6时,产率为77.43%。
2.3.3合成9BA-m-9BA
(1)向50mL三口烧瓶中加入二醚2.40g(5mmol),并加入15mL无水二氯甲烷作为溶剂,磁力搅拌。
(2)接HCl尾气吸收装置,先通氮气15min,然后在冰水浴条件下将溶于15mL无水二氯甲烷的1.28g(11mmol)氯磺酸,于1h内滴入反应体系,反应过夜。
(3)反应结束后,通氮气吹出气体至尾气吸收处不再产生白烟,用5%的氢氧化钠的乙醇溶液中和至pH=8,静置过夜。
(4)减压抽滤,得粗产物;用无水乙醇重结晶3次得白色固体。
(5)所得产物用油泵抽干。
m=4时,产率为51.47%;m=6时,产率为47.56%。
2.4Gemini表面活性剂9BA-m-9BA与BSA的相互作用
本文中若无特别说明,所用溶液均由磷酸缓冲液(pH=7.4)配制而成。
为表述方便,分别以Gemini
、Gemini
代指表面活性剂9BA-4-9BA、9BA-6-9BA。
2.4.1芘探针荧光光谱的测定
(1)于20℃、5mL的容量瓶中配制10-3mol/L的芘溶液(以丙酮为溶剂)。
(2)取两支10mL的比色管,配制10-3mol/L的两种Gemini溶液。
用移液管移取5mLGeminiⅠ溶液于另一支10mL的比色管中,加蒸馏水稀
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