微生物学各章小结.docx

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微生物学各章小结

微生物学各章小结

第一章：

绪论

1、微生物：

一类形体微小、单细胞或个体较为简单的多细胞，甚至无细胞结构的低等生物的统称。

2、微生物的几个基本特性：

1体积小、面积大

“微米”作为个体大小的度量单位，个体更小的病毒则以“纳米”为度量单位。

个体形态需要借助光学显微镜或电子显微镜观察。

肉眼可观察到微生物聚集的群体－菌落

2微生物的种类多：

原核生物：

3500种；:

病毒：

4000种；真菌：

9万种；原生动物和藻类：

10万种；

3在自然界中分布极为广泛

4生长旺，繁殖快（单细胞藻类：

3~6小时繁殖一代。

酵母：

2~4小时繁殖一代。

细菌：

0.5~1小时繁殖一代。

）

5适应性强，易变异

3、微生物学发展简史分几个阶段，其中代表人物是谁？

主要做了什么贡献？

（一）微生物的利用与发现

时间：

1676~1861开创者：

安东•列文虎克（AntonyLeeuwenhoek）。

特点：

自制单式显微镜观察细菌；微生物形态描述。

（二）微生物学及食品微生物学的建立

19世纪中期，欧洲工业、农业规模化生产方式已经形成。

当时工农业生产发展中出现的葡萄酒发酵酸败、人畜传染病等与微生物相关的问题急需解决。

法国人巴斯德：

彻底否定了“自生说”学说。

免疫学——预防接种。

证实发酵是由微生物引起的。

其他贡献：

巴斯德消毒法等。

德国人柯赫：

微生物学基本操作技术的贡献：

a）细菌纯培养方法的建立。

b）设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养。

c）蒸汽灭菌。

d）染色观察和显微摄影。

对病原细菌研究作出了突出贡献：

a）具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌；b）发现了肺结核病的病原菌；c）证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——著名的柯赫原则。

（三）近代微生物学的发展

微生物学研究工具的不断改进；微生物学和其他生物科学共同发展，互相促进。

4、日常生活中与食品生产、储藏、变质等有关的微生物问题。

P5

第二章：

微生物的形态、结构与功能

1、细菌：

是一类单细胞、细胞壁坚韧、以二等分裂方式繁殖和水生性较强的原核微生物。

基本形态：

球状、杆状、螺旋状

结构：

基本结构和特殊结构。

基本结构：

细胞壁、膜、质及核区。

特殊结构：

芽孢、鞭毛、荚膜。

细胞壁：

是位于细胞最外的一层厚实、坚韧的外被，主要由肽聚糖构成，有固定细胞外形和保护细胞等多种生理功能。

1）化学组成：

G＋（肽聚糖，磷壁酸）；G-（肽聚糖，脂蛋白、脂多糖）；

肽聚糖的结构：

肽聚糖（peptidoglycan）分子由肽和聚糖组成。

肽包括短肽尾和肽桥两种，而聚糖由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸两种单糖连接而成。

G+与G-壁结构差异：

G-细菌的细胞壁肽聚糖结构与G+相同，但短肽尾中的３号位上L-Lys往往被其他二氨酸取代。

没有特殊的肽桥，只通过酰氨键连接。

G-菌细胞壁主要由磷脂和LPS构成，内嵌外膜蛋白：

孔蛋白、脂蛋白。

革兰氏染色机理：

第一步：

结晶紫使菌体着上紫色。

第二步：

碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。

第三步：

酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。

第四步：

沙黄复染，增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌。

G﹢菌：

细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上，呈紫色。

Gˉ菌：

肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

2）功能（五点功能）：

1固定细胞外形和提高机械强度；

2保护细胞免受渗透压等外力的损伤；

3为鞭毛运动提供支点；

4阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质进入细胞，保护细胞免受损伤；

5赋予细胞具有特定的抗原性、致病性以及对抗生素和噬菌体的敏感性。

细胞膜：

也称细胞质膜，是紧贴在细胞壁内侧、包围着细胞质的一层柔软、脆弱、富有弹性的半透性膜。

厚约7~8nm，占细胞干重的10%左右。

组成：

磷脂20%~30%，蛋白质50%~70%。

1）结构：

液态镶嵌模型（生化的基础）。

1972年由辛格和尼科尔森提出细胞膜“液态镶嵌”模型，其主要内容：

1膜的主体是磷脂双分子层，两层脂分子的亲水头朝外，疏水性尾朝里；

2蛋白质以不同程度镶嵌在磷脂双分子层中；

3膜具有流动性，磷脂分子和蛋白质分子在膜中的位置不断变化；

4膜两侧的分子性质和结构不同，具有不对称性。

2）功能（五点功能）：

1.作为细胞内部与外界环境的最后一道屏障，防止原生质流失。

2.选择性地控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送，以满足细胞的营养需求和维持胞内正常的生长环境

3.合成细胞壁和糖被的各种组分（脂多糖、肽聚糖、磷壁酸、荚膜多糖）。

4.膜上含有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢的酶系，是细胞的产能场所。

5.是鞭毛基体的着生部位，提供鞭毛运动所需能量。

细胞质及内含物：

细胞质:

细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶状、颗粒状物质的总称。

内含物：

贮藏物、核糖体、多种酶类和中间代谢物、质粒、各种营养物和大分子的单体。

少数细菌还有类囊体、羧酶体、气泡或伴孢晶体等。

1.核糖体及功能：

为多肽和蛋白质合成场所，70S颗粒，有50S和30S2个亚单位组成；化学成分为蛋白质和核酸；原核生物中游离于细胞质中或以多聚核糖体存在；真核生物中核糖体游离于细胞质中或结合于内质网上。

2.贮藏物及功能：

是一类由不同化学成分累积而成的沉淀颗粒，主要功能是贮存营养物和代谢产物。

3.气泡功能：

调节细胞比重以使细胞漂浮在最适水层中获取光能、O2和营养物质。

细胞核区：

又称核质体、原核、拟核、核基因组等。

指原核生物所特有的无核膜结构、无固定形态的原始细胞核。

原核生物核区结构特点及功能：

原核不具备核膜、核质和核仁等真核微生物细胞核所具有的结构。

实际上是一个裸露在细胞质中的染色体，主要有一个巨大的环形双链DNA分子组成。

功能：

贮存遗传信息；通过复制把遗传信息传递给子代；通过转录和翻译调控细胞的全部生命过程。

特殊结构：

芽孢、鞭毛、荚膜。

1）芽孢：

某些细菌在一定生理时期，在细胞内形成的抗逆性极强的休眠体，称芽孢。

结构层次：

特点：

芽孢具有较强的抗热、抗辐射和抗化学药物的能力。

芽胞内新陈代谢几乎停止，处于休眠状态，但保持潜在萌发力。

一个芽孢萌发只产生一个营养状态的细胞。

2）鞭毛：

生长在某些细菌体表的长丝状、波曲的蛋白质附属物称鞭毛，是可运动细菌的运动器官。

三部分结构（G+与G-）：

由基体、鞭毛钩、鞭毛丝三部分组成。

基体镶嵌在细胞壁和细胞膜中，且G+与G-细胞的基体组成有所不同，G-的基体有四个环构成，分别处于细胞壁外膜层中的L环、肽聚糖种的P环及在膜中的S环和M环。

G+的基体没有L环河P环。

鞭毛钩和鞭毛丝均由特殊的蛋白质亚基组成，细菌的运动就是通过鞭毛的高速旋转而实现的。

功能：

运动器官、有抗原性。

3）荚膜：

包被于某些细菌细胞壁外的一层较厚的粘液状物质称为荚膜。

主要组成成分：

水和多糖，还有一些多肽或蛋白质。

功能：

1）保护作用：

其上大量极性基团可保护菌体免受干旱损伤；一些动物致病菌的荚膜还可保护它们免受宿主白细胞的吞噬。

2）贮存营养物质，以备营养缺乏时重新利用。

3）作为透性屏障或（或和）离子交换系统，可保护细菌免受重金属离子的毒害。

4）表面附着作用。

细菌繁殖方式：

裂殖，二均分裂（Binaryfission）、异型分裂（Trinaryfission）

菌落定义：

将单个或多个微生物细胞接种在适宜的固体培养基上，以接种点为中心大量繁殖、扩展、堆积到一定程度可以形成肉眼可见的细胞堆称菌落

菌落形态特征：

比较小表面湿润、光滑、比较粘稠、用接种环容易挑起，颜色十分多样。

食品中常见细菌类群：

沙门氏菌、大肠杆菌、葡萄球菌、芽孢杆菌

2、放线菌：

是一类主要呈丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的革兰氏阳性原核微生物。

1）个体形态：

丝状体。

2）个体构造：

三种类型的菌丝。

基质菌丝、气生菌丝、孢子丝

3）繁殖方式：

分生孢子、孢囊孢子、菌丝片段。

分生孢子：

放线菌长到一定阶段，一部分气生菌丝形成孢子丝，孢子丝成熟便分化形成许多孢子，称为分生孢子。

孢囊孢子：

有的放线菌由菌丝盘卷形成孢子囊，其间产生横隔，形成孢子。

孢子囊成熟后，释放出孢子。

菌丝片段：

常见于液体培养。

工业发酵生产抗生素时，放线菌以此方式大量繁殖。

4）菌落形态：

干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状，上有一薄层彩色的“干粉”；

菌落和培养基的连接紧密，难以挑取；

菌落的正反面颜色常不一致，以及在菌落边缘的琼脂平面有变形的现象等

5）常见类群（了解）：

链霉菌属（Streptomyces）：

共约1000多种，菌丝体发达，孢子丝和孢子的形态因种而异。

抗生素主要由放线菌产生，而其中90%由链霉菌产生。

链霉素、土霉素、博莱霉素、丝裂霉素、制霉菌素、卡那霉素、井冈霉素都由其产生。

诺卡氏菌属（Nocardia）：

主要分布于土壤中，有100多种，能产生30多种抗生素，如对结核分枝杆菌和麻疯分枝杆菌有特效的利福霉素，间型霉素，作用于G+的瑞斯托菌素等。

小单孢菌属（Micromonospora）：

菌落较小，橙黄色或红色，约30多种，能产生30多种抗生素，如庆大霉素。

3、真菌：

1）营养体：

大部分为丝状结构，少数为单细胞非丝状结构。

与食品相关的丝状真菌为霉菌，非丝状真菌主要为酵母菌。

营养体结构1、菌丝和菌丝体

菌丝：

是指由细胞壁包被的一种长管状，有分枝的细丝结构。

一般宽度达5～10微米。

菌丝体：

有分枝的菌丝相互交错而形成的结构。

2、菌丝的类型

无隔膜菌丝：

为含多个核的长管状单细胞，生长表现为菌丝延长、细胞核裂殖和细胞质增加。

有隔膜菌丝：

有横膈膜分隔成多细胞，每个细胞含有一个或多个核。

横膈膜上有小孔，可供物质流通，每个细胞功能相同。

2）繁殖体：

有性孢子、无性孢子

3）酵母菌菌落及个体形态特征：

酵母菌菌落与细菌菌落相似，但大而厚，呈油脂状或蜡脂状，表面光滑、湿润、乳白色或红色。

培养时间长时菌落表面发生皱折，有酒香味。

个体以单细胞状态存在，多数以出芽生殖，发酵糖类产能，生活在含糖量高，酸度较大的水生环境中。

形态：

卵圆形、球形、柠檬形、香肠状、菌丝状。

大小：

为1～5×5～30微米。

4、霉菌

1.根霉属（Rhizopus）：

属于接合菌亚门，菌落呈棉絮状，灰白色，无隔膜菌丝，无性繁殖产生孢囊孢子，有性繁殖产生接合孢子匍匐菌丝与基质接触处生出假根，与假根相对方向生出孢囊梗

2.毛霉属菌丝特征：

毛霉菌丝呈棉絮状，可在基质物内外广泛蔓延。

菌丝无隔多核，幼龄时原生质浓稠均匀，老龄时则出现液泡病含有多种内含物。

繁殖：

无性繁殖和有性繁殖。

3.曲霉属（Aspergillus）：

属于半知菌亚门，菌丝有隔膜，有足细胞和顶囊，无性繁殖产生分生孢子，有些种可进行有性繁殖产生子囊孢子。

4.青霉属：

属于半知菌亚门，菌丝有隔膜，无足细胞和顶囊，形成独特的帚状枝。

可将青霉分为：

单轮青霉组、对称二轮青霉组，不对称青霉组、多轮青霉组。

5、病毒：

一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”，其本质是一种只含DNA或RNA的遗传因子。

1）基本特点：

个体微小:

10～300nm，无细胞结构，蛋白质+核酸（DNA或RNA），高度寄生性:

在细胞内表现为生命,在细胞外为无生命的大分子的复合物。

特殊的抵抗力:

不能被抗生素所杀灭，但可以被干扰素，以及一般的甲醛、紫外线所杀灭。

2）形态：

由蛋白质外壳或包裹蛋白质外壳的薄膜决定，大致分为：

球形、杆形和复合型

3）结构：

由蛋白质外壳（壳体或衣壳）与被外壳包裹的核酸组成。

由蛋白质外壳包裹核酸组成核衣壳。

核衣壳外部有膜包裹也称包膜病毒。

4）复制过程（或阶段）：

1、吸附（Adsorption）2、侵入（injection）：

尾部的溶菌酶水解细胞壁的肽聚糖，使细胞壁产生小孔；尾鞘收缩，核酸通过中空的尾管压入胞内，蛋白质外壳留在胞外；3、增殖（replication）

4、成熟（装配）（maturity）5、裂解（释放）（lysis）

5）相关概念：

类病毒（Viroid）：

是一类只含RNA一种成分、专性寄生在活细胞内的分子病原体。

拟病毒：

又称类类病毒或病毒卫星,是一类包裹在真病毒粒子中的有缺陷的类病毒。

它是一些必须依赖辅助病毒才能复制的小分子单链RNA片段,它被包装在辅助病毒的壳体中,本身对于辅助病毒的复制不是必需的。

但拟病毒可干扰辅助病毒的复制和减轻其对宿主的病害。

朊病毒：

是一类不含核酸的传染性蛋白质分子。

能引起宿主细胞体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的构象变化，从而使宿主致病。

6、微生物分类

1）分类基本概念：

种以上的系统分类单元。

界、门、纲、目、科、属、种。

种：

就是表型特征高度相似、亲缘关系极其接近、与同属内其他种有明显差异的一大群菌株的总称。

2）微生物分类系统（了解）P69

3）微生物命名规则——双名法：

第一个词为属名，词首字母大写，用拉丁文的名词描述生物的主要特征。

第二个词是种名，词首字母小写，用拉丁文的形容词描述生物的次要特征。

有时在种名后还附命名人的姓和命名年份。

第三章：

微生物的营养与培养

1、营养物质：

六类营养要素来源及功能。

1、碳源（Sourceofcarbon）：

能满足微生物生长繁殖所需要C元素的营养物。

有机碳源用于异养微生物，无机碳源用于自养微生物。

对于为数众多的化能异养微生物来说，碳源是兼有能源功能营养物。

2、氮源（SourceofNitrogen）：

提供微生物生长繁殖所需要氮元素的营养源。

3、氧气（Oxygen）：

为呼吸提供氧气。

4、水（Water）：

1是微生物细胞的重要组成部分，占生活细胞总重量的90%左右。

2细胞内进行的生理生化反应都以水作为介质，水还是某些代谢反应的直接参与者。

3营养物质的吸收和代谢产物的分泌必须通过水作为媒介来完成。

4有效控制细胞内的温度变化。

5、无机盐（Inorganicsalt）：

生理功能：

6、生长因子（Growthfactor）：

通常指那些微生物生长所必需而且需要量很小，但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。

狭义：

维生素广义：

维生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶

2、营养类型：

四种营养类型，特点或划分标准。

划分标准：

异养型：

有机碳光能营养型：

太阳光能

自养型：

无机碳化能营养型：

化合物氧化

1.光能自养型微生物：

以CO2为唯一或主要碳源，利用光能并以无机物为供氢体同化CO2的微生物。

2.光能异养型微生物：

能利用光能、以简单有机物（有机酸、醇等）为供氢体同化CO2的微生物类群称为光能异养型微生物。

3.化能自养型微生物：

能通过氧化无机物获得能量并能以CO2为主要或唯一碳源的微生物称为化能自养型微生物。

4.化能异养型微生物：

凡以有机物为碳源、能源和供氢体的微生物称为化能异养型微生物。

3、营养运输：

四种运输方式的特点。

（以表格的形式对比记）

1被动扩散（Simplediffusion）：

物质扩散的动力:

膜内外的浓度差。

特点：

不消耗能量,不发生化学变化,非特异性：

仅依膜上小孔的大小和形状对被扩散的物质分子的大小和形状具有选择性。

被运输的物质是小分子量和脂溶性物，水，气体、甘油和某些离子。

2促进扩散（Facilitateddiffusion）：

借助膜上的载体蛋白，具有高度的立体专一性。

载体蛋白能促进物质运输，但不能进行逆浓度梯度运输。

特点：

需要特异性的载体蛋白；不消耗能量；可加快运输速度，但不能逆浓度运输。

3主动运输（Activetransport）：

特点：

有特异性的载体蛋白参与需要消耗能量，可以逆浓度梯度运输，微生物的主要物质运输方式。

4基团转位（Membranevesicletransport）：

是指一类既需特异性载体蛋白的参与，又耗能的一种物质运送方式。

特点：

溶质在运送前后还会发生分子结构的变化，因此不同于一般的主动运送。

4、微生物的培养

1）培养基：

是人工配制的，适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质。

分类：

1根据营养物的来源：

天然培养基、合成培养基、半合成培养基

2根据培养基的物理性状：

固体培养基、液体培养基、半固体培养基

3根据培养基的用途：

普通培养基、加富培养基、鉴别培养基、选择培养基

部分培养基的功能：

固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏。

半固体培养基用来观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定。

半固体培养基用来观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定。

普通细菌培养基：

牛肉膏

5g

蛋白胨

10g

NaCl

5g

水

1000ml

放线菌培养基：

可溶性淀粉

20g

硝酸钾

1g

硫酸镁

0.5g

氯化钠

0.5g

磷酸氢二钾

0.5g

硫酸亚铁

0.01g

水

1000ml

酵母菌培养基：

麦芽汁培养基、豆芽汁培养基、马铃薯培养基

霉菌培养基：

马铃薯培养基、察氏培养基

2）培养基的灭菌：

灭菌方法、特点。

1高压蒸汽灭菌条件：

121℃,30min或115℃,20~30min;工业生产上：

分批法和连续法

2间歇灭菌法用不超过100℃的温度对培养基进行间歇处理的一种方法。

灭菌——保温——灭菌（连续3次）

3过滤除菌

3）培养方法：

实验室及工业生产上好氧培养及厌氧培养各有哪些方法？

好氧培养：

实验室——液体培养：

摇瓶、小型发酵罐

工业——液态：

大型发酵罐。

固态：

浅盘，深层通风。

厌氧培养：

去除氧气，通入其他气体（如二氧化碳、氮气等）。

4）纯种分离的一般方法（结合综合性实验）

1划线分离法2涂布分离法3定量稀释分离法4富集分离法5单细胞分离法

第四章：

微生物的代谢

1、酶：

单纯酶、结合酶（酶蛋白+辅因子）。

其中辅因子由辅基（金属离子）和辅酶（有机小分子）组成。

酶的一般特性：

催化效率高；具有高度的专一性；反应条件温和；酶活力可调节；无毒。

微生物细胞的酶系统：

1根据酶的活动部位分：

胞内酶、胞外酶

2根据酶合成与代谢产物的关系：

组成酶、诱导酶

2、产能代谢

1）发酵：

在无氧等外源氢受体的条件下，底物氧化所产生的电子未经呼吸链传递而直接交内源性中间代谢物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。

工业发酵:

是泛指任何利用好氧性或厌氧性微生物来生产有用代谢产物或食品、饮料的一类生产方式。

酵母菌的发酵：

第一型发酵：

无氧、中性或偏酸性条件，产物为乙醇

CH3COCOOHCH3CHO+CO2

CH3CHO+NADH2CH3CH2OH+NAD

第二型发酵：

无氧、有亚硫酸氢钠存在，乙醛与亚硫酸氢钠反应，磷酸二羟丙酮作为受氢体，产物为甘油，不产生ATP。

第三型发酵：

无氧、碱性条件。

乙醛发生岐化反应，磷酸二羟丙酮作为受氢体，产物为甘油、乙醇、乙酸，不产生ATP。

混合酸发酵：

发酵过程中产生甲酸、乙酸、乙醇、乳酸、琥珀酸以及CO2和H2等多种代谢产物。

丁二醇发酵：

由产气肠杆菌（Enterobacteraerogenes）进行。

P103

2）有氧呼吸：

微生物氧化有机物脱下的电子经呼吸链中一系列电子载体的传递交给最终电子受体并产生能量的过程。

分子氧为最终电子受体，丙酮酸脱羧形成乙酰CoA，然后进入TCA循环，脱下的电子进入呼吸链，最终被彻底氧化。

3）无氧呼吸：

底物经常规途径脱氢后，经部分呼吸链递氢，最终由氧化态的无机物或有机物受氢，并完成氧化磷酸化产能反应。

硝酸盐呼吸、硫酸盐呼吸、铁呼吸、延胡索酸呼吸。

4）三种产难代谢的比较：

产能效率、有无经电子传递链、电子受体等。

3、淀粉分离：

淀粉由各种胞外淀粉酶分解成葡萄糖（麦芽糖）后被吸收利用。

α-淀粉酶：

枯草杆菌，米曲霉、β-淀粉酶：

巨大芽孢杆菌；葡萄糖淀粉酶：

黑曲霉、异淀粉酶。

第五章：

微生物的遗传与育种

1、基因突变与诱变育种

1）突变类型：

1形态突变型：

发生细胞形态变化或引起菌落形态改变的突变型。

２致死突变型

3条件致死突变型：

在某一条件下具致死效应，而在另一条件下无致死效应的突变型。

4生化突变型：

突变株的代谢途径发生改变，导致某一特定生化功能改变或丧失，但突变株的形态没有明显的变化。

2）诱发突变机理：

１辐射类诱变剂：

紫外辐射作用机理：

DNA分子断裂、DNA分子内和分子间交联、产生嘧啶二聚体

2碱基类似物诱变剂：

５-溴尿嘧啶是胸腺嘧啶的结构类似物，容易发生酮式和烯醇式的互变异构。

酮式A配对、烯醇式只能与G配对、发生ATGC;GCAT。

3引起DNA碱基发生化学变化的诱变剂：

亚硝酸、酸性亚硫酸盐使碱基发生脱氨反应，使胞嘧啶变为尿嘧啶、腺嘌呤变为次黄嘌呤。

羟胺的作用主要是改变C的结构，使其不能与G配对，而是与A配对，从而引起G:

C　A:

T转换。

4嵌入类诱变剂

3）如何诱变并选种：

利用物理或化学诱变剂对微生物细胞群体进行适当处理，使之发生基因突变，用有效的方法从诱变后的群体中选出优良正突变体的过程。

1选择合适的出发菌株：

（1）直接从自然界分离野生型菌株

（2）生产中筛选出的自然突变菌株（3）已经历诱变处理的菌株

2选择诱变剂和诱变剂量：

诱变剂的选择：

物理因素：

紫外线、激光、离子束等。

化学因素：

氮芥、硫酸二乙酯、N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍、亚硝基甲基脲等。

通常是根据经验来选择恰当的诱变剂，对于已有诱变处理背景的菌株，变换使用其他诱变剂也许会得到较好的效果。

剂量：

如紫外线处理要考虑紫外灯的功率、灯与被照物的距离、照射时间、菌悬液的浓度、厚度等因素。

使用UV照射最为方便，一般用15W的UV灯，照射距离为30cm，在暗室中进行。

UV的绝对物理剂量很难测定，常用杀菌率或照射时间作为相对剂量。

3诱变菌的准备和诱变处理：

保证诱变剂与每个细胞或孢子机会均等并充分地接触诱变剂，避免细胞团中变异菌株与非变异菌株混杂，出现不纯的菌落。

4筛选：

（1）从菌体形态变异分析：

有些菌体的形态变异与产量的变异存在着一定的相关性。

如在灰黄霉素产生菌荨（qian）麻青霉的育种中，曾发现菌落的棕红色变深者往往产量有所提高。

（2）平皿快速检测法（3）摇瓶培养法：

常用于复筛。

是将待测菌株的单菌落分别接种到三角瓶培养液中，振荡培养，然后对培养液进行分析测定。

5保藏和扩大试验：

原理：

创造一个使微生物代谢不活泼，生长繁殖受到抑制，难以突变的环境条件。

（1）定期移植保藏法

（2）液体石蜡保藏法（3）沙管保藏法、土壤保藏法（4）麸皮保藏法（5）冷冻干燥保藏法

2、基因重组与杂交育种（了解）掌握基本概念：

转化、接合、原生质体融合。

转化：

受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象，称为转化或转化作用。

接合：

通过供体菌和受体菌完整细胞间的直接接触而传递大段DNA的过程，称为接合。

原生质体融合：

通过人为方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体发生融合，并发生重组子的过程，称为原生质体融合或细胞融合。

3、原生质体融合与体外重组DNA技术（食品专业不要求）

第六章：

微生物的生长

1、生长量的测定方法：

平板及显微镜计数方法、干重法。

P143、P145

2、细菌群体生长基本规律

（一）延滞期

延滞期出现原因：

1微