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微生物重点
绪论
1.微生物学的先驱者是列文虎克,微生物学的奠基人是巴斯德,细菌学的奠基人是科赫。
第一个看见并描述微生物的人是_列文虎克_。
2.微生物都是些个体微小、构造简单的低等生物,包括属于原核类的细菌(真细菌和古生菌)、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体;属于真核类的真菌(酵母菌、霉菌和蕈菌)、原生动物和显微藻类;以及属于非细胞类的病毒和亚病毒(类病毒、拟病毒和朊病毒)。
3.微生物有哪五大共性?
其中最基本的是哪一个?
为什么?
1)体积小,面积大;2)吸收多,转化快;3)生长旺,繁殖快;4)适应强,易变异;5)分布广,种类多
其中最基本是体积小,面积大。
因为小体积大面积系统,必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面、环境信息的交换面,并由此产生其余四个共性。
4.简述koch’s法则。
答:
科赫根据对炭疽芽胞杆菌的研究,提出了著名的科赫法则。
认为:
①特殊的病原菌应在同一种疾病中查见,在健康人中不存在;②该特殊病原菌能被分离培养得纯种;③该纯培养物接种至易感动物,能产生同样病症;④自人工感染的实验动物体内能重新分离得该病原菌纯培养。
第一章:
原核生物的形态、构造和功能
肽聚糖:
又称黏肽、胞壁质或黏质复合物,是真细菌细胞壁中的特有成分。
磷壁酸:
是结合在G¯细菌细胞壁上的一种酸性多糖,主要化学成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。
缺壁细胞:
自然进化和实验室菌种自发突变形成缺细胞壁、人为抑制新生细胞壁的合成或对现有细胞壁进行酶解得到的。
L型细菌:
实验室或宿主体内自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。
(细菌)原生质体:
无细胞壁、仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。
球状体(原生质球):
指细胞壁被大部分或者全部除掉的细菌或酵母细胞。
羧酶体:
是存在于一些自养细菌细胞内的多角形或六角形内含物。
糖被:
包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。
荚膜:
糖被中包裹在单个细胞上的、在壁上有固定层次且层次较厚的结构。
栓菌试验:
设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固地拴在载玻片上,然后在光镜下观察该细胞的行为。
芽孢:
是指某些细菌在生长发育后期于细胞内部形成的一个圆形、椭圆形或圆柱形的抗逆性休眠体。
菌落(colony):
单个(或聚集在的一团)微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。
14.试对G-细菌的鞭毛和螺旋体的周质鞭毛在结构、着生方式和运动特点等方面作一比较。
10.阐述述革兰氏染色法的机制、步骤和注意事项。
答:
机制:
G﹢菌——细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。
G-菌——肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红复染后呈红色
通过结晶紫液初染和碘液媒染后,在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
由于革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的细胞壁结构和组成成分不同,因此再经沙黄等红色染料复染后,就能辨别G+菌和G-菌,这种方法叫做革兰氏染色法。
步骤:
初染:
加草酸铵结晶紫一滴,约一分钟,水洗。
媒染:
滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。
脱色:
将载玻片上面的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20—30秒钟,立即用水冲净酒精。
复染:
用番红液染1-2分钟,水洗。
镜检:
干燥后,置油镜观察。
革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。
注意事项:
1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色2、染色过程勿使染色液干涸3、选用幼龄的细菌。
21.什么叫菌落?
什么叫菌苔?
试分析细菌的细胞形态与菌落形态间的相关性?
菌落是由一个或极少数几个同源菌体在培养基上经一段时间培养繁殖后,形成一定数量的同源菌体群。
大量菌落相互连成一片就形成菌苔。
无鞭毛、不能运动的细菌通常形成较小、较厚、边缘圆整的半球状菌落;长有鞭毛、运动能力强的细菌一般形成大而平坦、边缘多缺刻、不规则形的菌落;有糖被的细菌,会长出大型、透明、蛋清状的菌落;有芽孢的细菌往往长出外观粗糙、“干燥”、不透明且表面多褶的菌落。
第二章:
真核微生物的形态、构造和功能
子实体:
是由真菌的营养菌丝和生殖菌丝缠结而成具有一定形状的产孢结构。
菌物界:
一大群无叶绿素、依靠细胞表面吸收有机养料、细胞壁一般含有几丁质的真核微生物。
“9+2”型鞭毛:
溶酶体:
一种由单层膜包裹、内含多种酸性水解酶的小球形、囊泡状细胞器,主要功能是细胞内的消化作用。
分生孢子头:
什么叫锁状联合?
其生理意义如何?
请图示锁状联合的形成过程。
答:
锁状联合:
形成缘状突起而连合两个细胞的方式不断使双核细胞分裂,从而使菌丝尖端不断向前延伸。
为两核细胞形成分裂产生双核菌丝体的一种特有形式。
锁状联合是双核菌丝的鉴定标准。
(双核菌丝的)锁状联合过程:
1)在细胞的两核之间生出一个喙状突起,双核中的
一个移入喙状突起,另一个仍留在细胞下部。
2)两异质核同时分裂,成为4个子核。
3)分裂完成后,原位于喙基部的一子核与原位于细
胞中的一子核移至细胞上部配对;
4)另外两子核,一个进入喙突中,一个留在细胞下部。
此时细胞中部和喙基部均生出横隔,将原细胞分成三部分。
5)上部是双核细胞,下部和喙突部暂为两单核细胞。
6)喙突尖端继续下延与细胞下部接触并融通。
同时喙突中的核进入下部细胞内,使细胞下部也成为双核。
7)经如上变化后,4个子核分成2对,一个双核细胞分裂为两个。
此过程结束后,在两细胞分融处残留一个喙状结构,即锁状联合。
试列表比较真核生物的各种细胞器在形态、构造、数量和功能方面的差别。
内质网
核糖体
高尔基体
溶酶体
微体
线粒体
叶绿体
形态
囊腔细管系
小颗粒状
扁平膜囊和小泡囊
球形小囊泡
球形小囊泡
杆菌状或囊状
扁球状或扁椭圆球状
构造
有膜,分两种:
粗面内质网的抹上有核糖体,光面内质网则无
无膜,表层为蛋白质,内心为RNA
有膜,由数个扁平膜囊和大小不等的囊泡组成
有膜,在小囊泡内含数十种酸性水解酶
有膜,在小囊泡内含氧化酶和过氧化氢酶
双层膜,内膜可层脊,其上有大量基粒——ATP合酶复合体,基质内含TCA酶系、70S核糖体和双链环状DNA
由双层膜,类囊体和基质构成,基质内含70S核糖体和双链环状DNA等,类囊体数量多,常叠成基粒
数量
少
数量多且变化大
数量少
数量较多且变化大
数量较多且变化大
数量多且变化大
仅存在于光合生物中,不同生物细胞中的数量变化大
功能
粗面内质网合成和运送蛋白质,光面内质网合成磷脂
合成蛋白质
浓缩蛋白质,合成糖蛋白和脂蛋白,协调细胞内外环境,有包装、分泌功能
执行细胞内的消化功能
对脂肪酸进行氧化
对葡萄糖等能源物质进行氧化磷酸化以产生ATP等能量
利用CO2和H2O进行光合作用,以合成葡萄糖和释放CO2
试列表比较真菌孢子的类型、主要特点和菌落特征。
孢子名称
染色体倍数
外形
数量
外或内生
其他特点
无
性
孢
子
游动孢子
n
圆、梨、肾形
多
内
有鞭毛,能游动
孢囊孢子
n
近圆形
多
内
水生型有鞭毛
分生孢子
n
极多样
极多
外
少数为多细胞
节孢子
n
柱形
多
外
各孢子同时形成
厚垣孢子
n
近圆形
少
外
在菌丝顶或中间形成
芽孢子
n
近圆形
较多
外
在酵母细胞上出芽形成
掷孢子
n
镰,豆,肾形
少
外
成熟时从母细胞射出
有性孢子
卵孢子
2n
近圆形
1至几
内
厚壁,休眠
接合孢子
2n
近圆形
1
内**
厚壁,休眠,大,深色
子囊孢子
n
多样
一般8
内
长在各种子囊内
担孢子
n
近圆形
一般4
外
长在特有的担子上
第三章:
病毒和亚病毒因子
噬菌斑:
噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”即噬菌斑(plaque)
烈性噬菌体:
能在短时间内完成吸附、侵入、增殖(复制与生物合成)、成熟、裂解(细胞释放)五阶段的噬菌体。
一步生长曲线:
又称一级生长曲线,是定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。
裂解量:
平均每一个宿主细胞裂解后释放出的子代噬菌体数称作裂解量
朊病毒:
又称蛋白侵染因子,是一类不含核酸的传染性蛋白质分子。
详见P82。
包膜:
部分病毒外被有的一层含蛋白质或糖蛋白的类脂双层膜。
溶源性:
温和噬菌体侵入相应宿主细胞后,由于前者的基因组整合到后者的基因组上,并随后者的复制而进行同步复制,故而不会引起宿主细胞快速裂解,此即溶源性或溶源性现象。
包含体:
表达外源基因的宿主细胞。
病毒粒:
专指成熟的、结构完整的和有感染性的单个病毒。
裂解性周期:
烈性噬菌体所经历的繁殖过程。
噬菌斑形成单位:
表示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数。
前噬菌体:
11.什么叫烈性噬菌体?
简述其裂解性生活史。
答:
能在短时间内完成吸附、侵入、增值、成熟和裂解5个阶段,而实现其繁殖的噬菌体成为烈性噬菌体。
它的裂解生活史大致为:
1尾丝与宿主细胞特异性吸附2病毒核酸侵入宿主细胞内3病毒核酸和蛋白质在宿主细胞内的复制和合成4病毒DNA分子的缩合,通过衣壳包裹DNA而形成完整的头部,尾丝和尾部的其他“部件”独立装配完成,头部和尾部相结合后,最后再装上尾丝。
从而完成病毒核酸和蛋白质装配5大量子代噬菌体裂解释放到宿主细胞外
15.什么是一步生长曲线?
它可分哪几个期?
各期又有何特点?
答:
定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线,称为一步生长曲线。
它包括:
1潜伏期:
细胞内已经开始装配噬菌体粒子并可用电镜观察到。
2裂解期:
宿主细胞迅速裂解溶液中噬菌体粒子急剧增多。
3平稳期:
感染后的宿主细胞已全部裂解,溶液中的噬菌体效价达到最高点。
3个特征参数:
潜伏期长短、裂解期范围、裂解量大小。
16.什么是溶源菌,它有何特点?
溶源菌(溶源性细菌):
是一类被温和噬菌体感染后能互相长期共存,一般不会出现迅速裂解的宿主细菌。
A自发裂解:
在没有任何外来噬菌体感染的情况下,极少数溶源细胞中的原噬菌体偶尔也可恢复活动,进行大量的复制成为营养噬菌体核酸,并接着成熟为噬菌体粒子,引起宿主细胞裂解。
B诱发裂解:
理化因子如紫外线、丝裂霉素C等处理溶源性细菌能导致原噬菌体活化
C免疫性:
溶源性细菌对其本身产生的噬菌体或外来的同源噬菌体不敏感。
D复愈性:
溶源性细胞有时消失了其中的原噬菌体,变成非溶源性细胞,溶源转变
E溶源转变.
检出溶源菌的方法:
是将大量溶源菌与大量的敏感性指示剂(遇溶源菌裂解后所释放的温和噬菌体会发生裂解循环者)相混合,然后与琼脂培养基混匀倒一个平板,经培养后溶源菌就一一长出菌落。
由于溶源菌在细胞分裂过程中有极少数个体会自发裂解,其释放的噬菌体可不断侵染溶源菌菌落周围的指示菌菌苔,于是形成了一个个中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈围着的这种独特噬菌斑。
第四章:
微生物的营养和培养基(3)
1.生长因子:
是一类对调节微生物正常代谢所必需,但不能用简单的碳、氮源自行合成的微量有机物。
2.PTS系统:
由热稳载体蛋白(Hpr)、酶1、酶2这三部分组成,用于运送各种糖类、核苷酸、丁酸、和腺嘌呤等物质的系统。
3.鉴别性培养基:
一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。
4.基团移位:
指一类既需特异性载体蛋白的参与,又需耗能的,溶质在运送前后分发生分子结构变化的一种物质的主动运送方式。
5.培养基:
是人工配制的、含有六大营养要素、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。
6.主动运输:
是指一类须提供能量并通过细胞膜上特异性载体蛋白构象的变化,而使膜外环境中低浓度的溶质运入膜内的一种运送方式。
7.选择性培养基:
根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学,物理因素抗性的原理而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。
8.促进扩散:
指溶质在运送过程中,必须借助细胞膜上的底物特异载体蛋白的协助,但不消耗能量的扩散性运送方式。
4.试以能源为主、碳源为辅对微生物的营养类型进行分类。
营养类型
能源
氢或电子供体
基本碳源
举例
光能无机营养型
(光能自养型)
光
无机物
CO2
紫硫细菌、蓝细菌、绿硫细菌、藻类
光能有机营养型
(光能异养型)
光
有机物
CO2及简单有机物
红螺菌科的细菌
化能无机营养型
(化能自养型)
无机物
无机物
CO2
硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌
化能有机营养型
(化能异养型)
有机物
有机物
有机物
绝大多数原核生物,全部真菌和原生动物
5.什么叫自养微生物?
它们有几种主要生理类型?
举例说明。
答:
自养微生物是能以CO2为主要或唯一碳源。
自养微生物一般分为光能自养型(有光和色素能进行光合作用)例如:
蓝细菌和化能自养型(利用化学能,将CO2等无机物合成自身需要的有机物)例如:
硝化细菌。
8.试述通过基团转移运送营养物质的机制。
答:
基团移位主要用于运送各种糖类(葡萄糖、果糖、甘露糖和N—乙酰葡糖胺等)、核苷酸、丁酸和腺嘌呤等物质。
其运送机制在E.coli中研究得较为清楚,主要靠磷酸转移酶系统(phosphotrasferasesystem)即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统进行。
此系统由24种蛋白组成,运送某一具体糖至少有4种蛋白参与,其特点是每输入一个葡萄糖分子,就要消耗一个ATP的能量。
具体运送分两步进行:
(1)热稳载体蛋白(heat-stablecarrierprotein)的激活
(2)糖经磷酸化而运入细胞膜内
15.什么叫鉴别性培养基?
以EMB(伊红美蓝乳糖琼脂培养基)为例,分析鉴别作用原理。
答:
鉴别性培养基:
一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。
EMB鉴别作用原理:
其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。
在低酸度时,这两种染料结合形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。
因此试样中的多种肠道细菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落,因而易于辨认。
第五章:
微生物的新陈代谢(4)
1.呼吸:
有机体利用氧气通过代谢分解有机化合物释放化学能的过程。
2.发酵:
细菌和酵母等微生物在无氧条件下,酶促降解糖分子产生能量的过程。
3.同型酒精发酵:
酿酒酵母能够通过EMP途径进行同型酒精发酵,即由EMP途径代谢产生的丙酮酸经过脱羧放出CO2,同时生成乙醛,乙醛接受糖酵解过程中释放的NADH+H+被还原成乙醇。
4.异型酒精发酵:
一些细菌能够通过HMP途径进行异型乳酸发酵产生乳酸、乙醇、CO2等
5..Stickland反应:
某些专性厌氧细菌如梭状芽孢杆菌在厌氧条件下生长时,以一种氨基酸作为氢的供体,进行氧化脱氨,另一种氨基酸作氢的受体,进行还原脱氨,两者偶联进行氧化还原脱氨。
这其中有ATP生成。
6.两用代谢途径:
既可用于代谢物分解又可用于合成的代谢途径。
如三羧酸循环。
7.代谢回补顺序:
是指能补充两用代谢途径中因合成代谢而消耗的中间代谢物的那些反应。
8.固氮酶:
一种能够将分子氮还原成氨的酶。
9.紫膜:
为盐生盐杆菌和红皮盐杆菌等嗜盐性细菌在厌氧条件下和明亮处生长时于细胞膜上形成的斑状紫色膜。
10.ED途径:
又称2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡糖酸(KDPG)途径,这条途径是在研究嗜糖假单胞菌的代谢时发现的,所以简称为ED途径。
这是存在于某些缺乏完整EMP途径的微生物中的一种替代途径,为微生物所特有。
特点是葡萄糖只经过4步反应即可快速获得由EMP途径须经10步反应才能够形成的丙酮酸。
22.什么叫乙醛酸循环?
试述它在微生物生命活动中的重要功能。
答:
乙醛酸循环:
在异柠檬酸裂解酶的催化下,异柠檬酸被直接分解为乙醛酸,乙醛酸又在乙酰辅酶A参与下,由苹果酸合成酶催化生成苹果酸,苹果酸再氧化脱氢生成草酰乙酸的过程。
是TCA循环的一条回补途径,可使TCA循环不仅仅具有高效产能功能,而且还兼有可为许多重要生物合成反应提供有关中间代谢物的功能。
26.列表比较固氮酶两个组分的特点
项目
固二氮酶(组分I)
固二氮还原酶(组分II)
蛋白质亚基数
4(2大2小)
2(相同)
分子量
22万左右
6万左右
Fe原子数
30(24-32)
4
不稳态S原子数
28(20-32)
4
Mo原子数
2
0
Cys的SH基数
32-34
12
活动中心
铁钼辅因子(FeMoCo)
电子活化中心(Fe₄S₄)
功能
络合,活化和还原N₂
传递电子到组分I上
对O₂的敏感性
较敏感
极敏感
28.试用简图表示细菌细胞壁上肽聚糖的3个阶段。
哪些化学因子可抑制其合成?
其抑制部位如何?
答:
抑制因子抑制部位
环丝氨酸细胞质中Park核苷酸过程中合成D-丙胺酰-D-丙氨酸两步反应
万古霉素细胞膜上由太聚糖类脂到磷酸类脂的过程
杆菌肽细胞膜上由二磷酸类脂脱Pi生成一磷酸类脂的过程
青霉素细胞膜外转肽酶的转肽作用过程
第六章微生物的生长及其控制(4)
5菌落形成单位(cfu):
把稀释好的一定量菌样,通过浇注或涂布的方法,让微生物单细胞一一分散在琼脂平板上(内),待培养后,每一个活细胞形成一个单菌落。
4平板菌落计数法:
是种统计物品含菌数的有效方法。
方法如下:
将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂布到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
采用平板菌落计数法测定样品中微生物的数量时可以采用浇注平板、滚管法和涂布平板接种方法。
7生长曲线:
定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线。
如以细胞数目的对数值作纵坐标,以培养时间作横坐标就可画出一条由延滞期、指数期、稳定期和衰亡期4个阶段组成的曲线。
8生长速率常数R:
微生物每小时的分裂次数R。
G=1/R。
12代时G:
细菌每分裂一次所需的时间,又称世代时间、增代时间
21连续培养:
是指向培养容器中连续流加新鲜培养液,使微生物的液体培养物长期维持稳定、高速生长状态的一种溢流培养技术,又称开放培养。
是相对于单批培养或密闭培养而言的。
22单批培养:
又称分批培养,指微生物在一定容积的培养基中经过培养一段时间后,最后一次性地收获培养物的培养方式。
23生长温度三基点:
指最低生长温度、最适生长温度、最高生长温度3个指标。
55灭菌:
采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施,包括杀菌和溶菌,后果:
无活菌。
56消毒:
采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部部分对人体或动、植物有害的病原菌,后果:
仍有部分微生物存在。
62加压蒸汽灭菌法:
常称作“高压蒸汽灭菌法”。
一般121℃(压力为0.1MPa或1kg/cm2或15磅/英寸2),时间维持15~20min。
有时较低温度(115.℃)(压力为0.07MPa或0.7kg/cm2或10.5磅/英寸2)下维持35min(防止培养基成分破坏)。
操作简便、效果可靠,被广泛使用,适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵工厂中对培养基及多种器材或物料的灭菌。
63连续加压蒸气灭菌法:
在发酵行业里也称“连消法”,原理是让培养基在管道的流动过程中快速升温、维持和冷却,然后流进发酵罐。
培养基一般加热至135~140℃下维持5~15s。
仅用于大型发酵厂的大批量培养基的灭菌。
65热死时间:
在特定的环境条件和特定的温度条件下,杀死某种微生物(水悬浮液群体)所需要的时间。
66热死温度:
在特定的环境条件和特定的温度条件下,杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最低温度。
2.平板菌落计数法有何优缺点?
试对浇注平板法和涂布平板法作比较。
(网上找的)
答:
平板菌落计数法的优点是能测出样品中的活菌数;缺点是操作烦琐,而且测定值常受各种因素的影响。
浇注平板法和涂布平板法是两种最常用的菌种分离纯化方法,它们不可用分离纯化,还可以用于计数等。
浇注平板法较适合兼性厌氧的细菌和酵母菌的分离,而涂布平板涂布法则更适合于好氧性或有气生菌丝的放线菌和细菌分离。
4.指数期有何特点?
处于此期的微生物有何应用?
答:
特点:
1.菌体细胞生长的速率常数R最大、代时最短2.细胞处于平衡生长,菌体在培养基中分布均匀。
3.酶系活跃,代谢旺盛。
应用:
是用作代谢、生理和酶学等研究的良好材料,是增殖噬菌体的最适宿主,也是发酵工业中用作种子的最佳材料。
3.延滞期有何特点?
如何缩短延它?
答:
特点:
1)生长速率常数为零;2)细胞形态增大或增长;3)DNA含量增多,RNA特别是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性;4)合成代谢旺盛,核糖体、酶类和ATP的合成加快,易产生诱导酶;5)对不良环境敏感.
缩短延滞期:
1)以对数期的菌体作种子菌(对数期的菌体生长代谢旺盛,繁殖能力强,抵抗不良环境和噬菌体能力强)2)适当增大接种量(一般采用3%~8%的接种量,最高不超过1/10;接种量大,延滞期短,接种量小,延滞期长)3)培养基的成分(种子培养基尽量接近发酵培养基,微生物在天然培养基中比在组合培养基中生长快)
5.稳定期有何特点?
为何会到来?
答:
特点:
1)生长速率常数为零(新繁殖与衰亡细胞数达到正负生长达动态平衡);2)菌体产量达到最高;3)活菌数相对稳定;4)芽孢杆菌开始形成芽孢;5)细胞开始积累糖原、异染颗粒等内含物;6)有些微生物在此时形成次生代谢产物。
形成原因:
1)营养物质特别是生长限制因子的耗尽;2)营养物质的比例失调,例如C/N比值不合适等;3)酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的累积;4)pH、氧化还原势等环境条件由适宜变成不适宜。
10.什么是高密度培养,如何实现好氧菌或兼性厌氧性菌的高密度培养?
答:
高密度培养:
是指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上的生长状态或培养技术。
方法主要有:
1)选取最佳培养基成分和各成分含量2)适时补料
3)提高溶解氧的浓度4)防止有害代谢产物的生成5)保持适当的pH。
15.现代实验室中研究厌氧菌“三大件”技术指什么?
试列表比较它们的特点和优缺点。
答:
“三大件”技术是厌氧罐技术、厌氧手套箱技术和亨盖特滚管技术。
比较项目
厌氧罐技术
厌氧手套箱技术
亨盖特滚管技术
除氧原理
以氮取代空气,残氧用氢去除
以氮取代空气,残氧用氢去除
用高纯氮驱除各小环境中的空气
基本构造
透明可密闭罐体;钯催化剂盒;美蓝指示剂;外源或内源法供氮、CO2和氢
附有2个操作手套和交换室的大型密闭箱体;箱内有恒温培养箱和钯催化剂盒等;另有供氮、氢和CO2等附件
制纯氮的铜柱;专用试管;“滚管”装置
操作要点
放入物件→紧闭罐盖→抽气换气(或内源产气袋供气)→恒温培养
物体经交换室入箱→自动抽气换气→接种→培养
用铜柱制高纯氮→配PRAS培养基→接种→制“滚管”→恒温培养
优缺点
设备廉价,操作简单;除培养时为无氧外,其余过程无法避氧
各环节能达到严格除氧;设备昂贵;操作、维护较烦琐
各环
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- 特殊限制:
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- 关 键 词:
- 微生物 重点
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