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非妇科液基整理
非妇科液基细胞学检查
液基细胞薄层技术现已普遍应用于妇科标本的检测,主要用于阴道/宫颈上皮内瘤变的诊断与筛查,通过十连年临床单位的利用证明,液基细胞学技术在妇科宫颈癌初期诊断方面具有较高的阳性检出率,与传统方式相较,其优越性已取得国内外公认,但其用于非妇科细胞学检查方面尚未普遍开展。
液基细胞薄层技术在非妇科方面,主要可用于胸水、腹水、心包液、浆膜腔冲洗液、尿液、痰液、纤维支气管镜刷检和组织穿刺等多方面的细胞学检查,与传统方式相较,液基方式由于采用了一些特殊的细胞处置技术和粘附技术,制出的细胞涂片弃除无诊断意义的杂质、细胞铺展均匀、细胞数量多、背景清楚、易于病理医生阅片,从而能有效降低漏检率。
一浆膜腔积液
1浆膜腔积液细胞学
体腔的正常解剖生理学
。
人的身体有三个腔,称为体腔或浆膜腔
。
胸腔、心包腔、腹腔,其结构相似
。
体腔由单层扁平上皮细胞覆盖
。
正常状态下,脏层和壁层间有少量液体,
起润滑的作用
。
毛细血管静水压、血浆胶体渗透压、毛细
血管通透性、淋巴回流
2浆膜腔积液的形成
。
低蛋白血症(血浆胶体渗透压下降)
。
循环障碍(毛细血管静水压升高)
。
淋巴系统引流障碍
。
淋巴结受阻或淋巴管受侵形成栓塞
。
肿瘤转移积液的形成涉及多个因素(淋巴回流、血浆胶体渗透压等)
。
恶性肿瘤时,积液中不必然有癌细胞:
积液常继发于癌性肺不张、动静脉癌栓、上腔静脉阻塞、多处淋巴结受累等
3积液形成的常见原因
。
肿瘤(恶性肿瘤是常见原因)
。
充血性心力衰竭
。
自身免疫性疾病
。
外伤
。
感染性疾病
。
肾病综合症
4渗出液与漏出液的辨别
漏出液渗出液
蛋白含量<3g/100ml>3g/100ml
密度>
李凡他实验阴性阳性
细胞数<*109>*109
其他不易凝固易凝固
5胸水原因的散布
原因百分比(%)
恶性45
感染性22
充血性心力衰竭12
不明原因10
肺栓塞3
胶原疾病5
其他5
6嗜酸性积液
。
积液中嗜酸性粒细胞达10%或以上
。
相当一部份原因不明,常发生于男性,多见于胸腔积液,大多可自行消退
。
常见于:
气胸、寄生虫、创伤、感染性肺炎、结核、血胸、肺梗死、淋巴瘤、
自身免疫性疾病、高敏反映、嗜酸粒细胞性胃肠炎
7结核性积液
。
积液没有特异性表现,按照细胞形态不能作出诊断
。
与结核有关的表现:
虽然已加入抗凝剂,仍会出现絮状物出现大量的淋巴细胞(非特异性表现)上皮样细胞和多核巨细胞的出现,尤其伴有纤维素成份
8与肺炎有关的积液
。
肺炎累及胸膜时,都可出现胸水
。
大多数炎症性积液都有组织细胞和间皮细胞,间皮细胞可以很多,形态可很异形
。
炎细胞的类型与病变的进程及病原微生物有关
9恶性积液
恶性积液细胞学的几个特点
。
转移性腺癌占大多数(约80%左右)
。
积液中肿瘤细胞来源普遍,细胞学形态之间有重叠,有时很难辨别
。
病史很重要
。
免疫细胞化学是一种很好的辅助手腕
10常见恶性积液细胞学
。
转移癌
。
恶性间皮瘤
。
造血系统肿瘤
。
转移性肉瘤
11积液中转移性癌
。
腺癌是积液的首要原因(约占80%)
。
胸水中最多见的腺癌来自肺及乳腺,腹水最多见的原发灶是卵巢
。
不同来源的腺癌细胞学形态有相当多的重叠,辨别很难。
。
腺癌细胞需同反映性间皮细胞、恶性间皮瘤及鳞癌细胞辨别
12积液中转移性鳞癌细胞
。
鳞癌累及浆膜很少见(约占3%)
。
大多来自头颅部和生殖器官(如:
宫颈)
。
肺的原发鳞癌常是中心型的,大多不累犯胸膜或不脱落的胸腔中
。
分化好的鳞癌易被识别,中到低分化的鳞癌诊断困难
13浆膜腔积液标本
从浆膜腔积液标本中找出恶性肿瘤细胞的方式可以追溯到一百余年前,迄今为止,仍然是诊断胸腔、腹腔等部位肿瘤的主要和有效的重要手腕。
它是所有病理科或细胞实验室的常规送检标本,也是分析或诊断其病变的重要途径。
造成积液的原因很多,如外伤、炎症及肿瘤等。
对积液中的细胞成份的分胸(腹)活检手术,因为手术所造成的切口不愈合和感染等并发症是很常见的,因此常利用细胞学对积液的诊断成为最终的诊断。
但在日常工作中辨别难度较大,许多病理工作者常感觉到积液的分析不是那么简单的识别肿瘤抑或非肿瘤细胞的进程,而这其中对标本的处置和制片在很大程度上影响着细胞学的敏感度。
影响浆膜腔标本制片质量的主要因素如下:
1大量的血细胞影响了对目标细胞的观察;
2细胞量不足;
3由于未能及时处置标本致使细胞自溶;
4细胞堆积;
浆膜腔液基细胞试剂盒通常包括一只细胞标本保留瓶,方便临床医生取样,该保留瓶内装有保留液,能有效保留标本细胞超过72小时,自动溶解红血球,标本通过浓缩处置,细胞通过制片机自动转移到通过粘附处置的载玻片上,可制成细胞量丰硕、铺展均匀、背景清楚的细胞涂片。
14浆膜腔积液细胞学诊断描述性报告语言
未见恶性细胞(阴性)
间皮细胞呈良性改变,未见其他上皮性细胞或恶性肿瘤细胞
伴有以下情况者应予以说明,这很重要,可能与医治有关:
多量中性粒细胞及其他炎细胞、多量淋巴细胞、坏死或其它改变、大量嗜酸性粒细胞
间皮细胞异样:
间皮细胞异样,偏向于良性改变;
间皮细胞异样,但其意义不明确;
间皮细胞异样,潜在意义上的间皮瘤可能;
高度怀疑恶性间皮瘤,建议影像学导引下经皮胸穿活组织检查进一步证明;恶性间皮瘤,须除外腺癌可能,建议活组织检查及免疫细胞化学染色证明并综合判断。
上皮细胞异样(转移性上皮肿瘤)
少量异样上皮细胞,但其存在的意义尚不能明确;
肯定恶性上皮细胞,其类型可能是:
癌状细胞癌、腺癌、小细胞癌、低分化癌
淋巴细胞异样:
淋巴细胞异样,可能是恶性淋巴瘤,但须除外结核;
淋巴细胞异样,恶性淋巴瘤,建议查找可能的病灶、活组织检查证明并作免疫细胞化学染色。
其他异性细胞
二痰标本和纤维支气管镜刷检
(一)痰标本
痰涂片是一个常规的有效的发现肺肿瘤细胞的方式,但长期困扰细胞学家的是始终不能达到理想的敏感度,这里有几个问题影响诊断的准确率:
1、痰液涂片的取材问题长期未取得解决,主如果患者留取痰液标本时的指导缺失,致使该标本可能是口水痰、鼻吸痰或其他不合格痰标本。
2、处置标本和制片的细胞学技术人员不采用规范的操作方式。
3、细胞学医生不习惯于非妇科标本的细胞学诊断,因为液基处置的标本中细胞更小,他们对于液基片感到陌生,加上在正式诊断之前缺乏培训,使得他们更习惯于对传统涂片的观察。
4、另外,痰标本的质量控制问题是一个不可轻忽的问题。
液基标本在留取时强调的是合格的标本和实验室精心的制作标本涂片,毋庸置疑液基标本镜下的细胞学表现更易判读,更不受各类不规范的因素的影响,因此也就更能提高其检出率。
(二)纤维支气管镜(FB)刷片标本
FB刷取涂片目前已是医院的常规检查项目,其敏感度已被证明是靠得住的,一般以为,在制片合格和有经验细胞学医生的情况下,刷片细胞学的检出率高于活检,细胞学为81%左右,而组织学则为67%左右。
需要指出的是,并非是组织学诊断的敏感度低,而是受到直视下取材准确性的制约。
纤维支气管镜的管径能够达到的深度与取材密切相关,也就是说不能进入比其管径小的支气管部位,而在这个位置上仍然可以采取将刷子深切盲视野刷取细胞标本,这是更适合刷取的支气管部位。
取材:
内镜室由呼吸内科或胸外科医生操作(步骤略)。
将刷取细胞的刷子头放进液基保留液内轻轻刷洗多次即可,若刷子头上仍有血凝块则需要用牙刷将血凝块或组织微粒刷入液基瓶内,拧好盖,写上编号和姓名等,送检。
呼吸系统细胞学诊断描述性报告语言
上皮细胞阴性:
上皮细胞形态正常,结构清楚,无退化变性细胞、炎细胞、坏死等现象出现;
上皮细胞形态大体正常,有炎性;
与微生物有关的病变
结核性肉芽肿改变,提示结核菌检查;
形态类似放线菌属的细胞群;
形态类似烟曲菌属的霉菌群;
形态类似白色念珠菌属的霉菌群;
单纯疱疹病毒所致的细胞改变;
巨细胞病毒所致的细胞改变;
卡氏肺蘘虫。
其他
上皮细胞异样:
发现具有非典型增生的细胞,但不能明确其意义或不能判断其意义;
发现具有非典型增生的细胞,为非典型增生细胞或原位腺癌细胞(自然咳痰标本,无此项)
高度怀疑癌细胞;
肯定癌细胞,可提示类型:
非小细胞癌(鳞状细胞癌)
非小细胞癌(腺癌)
小细胞未分化癌
不能区分类型的归入低分化癌,建议参考活检结果或进一步检查。
其他恶性肿瘤
尿液标本
尿细胞学检查的目的在于发现泌尿道上皮肿瘤,其报告以有无癌细胞为准绳,未见癌细胞并非等于没有癌的可能。
这一点在医务人员中应该是一个共识,阴性也并非等于正常。
尿细胞学标本收集的方式有自然排尿,导尿管收集和膀胱镜术中收集等多种方式,无论用哪一种方式都必需尽快送检,越快越好。
尿对于细胞是一个颇带敌意的环境,它造成细胞退变的原因有尿的酸性和尿中渗透压的改变。
尿液标本细胞学描述性报告
阴性:
未见癌细胞(UC--N)
无细胞成份存在,建议从头送检(UC--U)
未见癌细胞,有急性炎症存在
未见癌细胞,反映性尿路上皮细胞存在
未见癌细胞,反映性/增生性尿路上皮细胞存在
未见癌细胞,结晶体(或其他对临床有效的发现)存在
不典型细胞:
不典型尿路上皮细胞存在(UC--A)
不典型尿路上皮细胞存在,偏向于反映性转变,建议复查
不典型但严重退变的尿路上皮细胞存在,建议复查
不典型尿路上皮细胞存在,不排除低度恶性癌细胞,建议进一步检查
阳性:
癌细胞存在(UC--P)
可疑癌细胞存在,建议膀胱镜活检(UC--S)
低度恶性尿路上皮癌细胞存在,建议膀胱镜活检证明
尿路上皮癌细胞存在,偏向于高度恶性,建议膀胱镜活检证明
高度恶性尿路上皮癌细胞存在,建议膀胱镜活检证明
鳞状上皮癌,建议膀胱镜活检证明
腺癌,建议膀胱镜活检证明
(三)其他标本的液基细胞技术
除以上标本外,脑脊液、培育中的细胞和穿刺细胞学标本都可以用来制作液基涂片标本,它们在细胞学上应用的优势在于规范取材、制片、染色和镜下规范的阅片。
脑脊液标本的制作因为积液标本中的细胞量少而必需利用全数标本,也就是制片一次涂片后的剩余标本内的细胞量不够二次制片,尽可能将细胞集中在1~2张涂片中。
脑脊液标本对脑肿瘤或脑病变的诊断意义重大,因为开颅手术损伤过大或并非能完全解决诊断问题。
细胞学可以发现常见或少见的脑原发肿瘤、转移癌、淋巴肿瘤和白血病等,也可以发现某些微生物,如新型隐球菌等。
在诊断上需要专门的培训和实践经验。
在技术层次方面,免疫细胞化学(ICC)可以应用于大多数细胞学标本,包括细针穿刺(FNA)、浆膜腔积液、尿液、子宫颈涂片检查,和灌洗液和刷检标本。
上述标本采用液基薄层技术所做的涂片内的细胞相对分散,细胞量丰硕,固定及时,单个细胞包括核结构清楚,同一标本可以做3~5张涂片,这些都可以知足免疫细胞化学标记的条件若是细胞数量很多,可以做细胞块切片,就更能够多做切片和选择多项标记了。
在液基薄层技术方面,必需选择离心式或有离心步骤的液基制片,因为膜式过滤法并非适合免疫细胞化学,因为滤膜会吸收免疫试剂和色素原。
这将使得背景着色而致使染色不合格。
膜滤法在洗涤步骤时也很容易出现从载玻片上脱片的问题。
浆膜腔积液应用细胞离心涂片法时,若是蛋白质含量高,可能致使蛋白质薄膜沉淀覆盖于细胞上,从而阻止试剂充分渗透。
在这种情况下,离心前利用等渗盐水简单的洗涤细胞将去除过量的蛋白质。
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