食品微生物检验总结.docx
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食品微生物检验总结
食品微生物检验总结
食品微生物检验总结
1.食品微生物检验是应用微生物学的理论与方法,研究外界环境和食品中微生物的种类、数量、性质、活动规律、对人
和动物健康的影响及其检验方法与指标的一门学科。
2.食品微生物检验指标:
(1)菌落总数:
指食品检样经过处理,在一定条件下培养后1g[1ml或1cm2(表面积)]检样中
所含细菌菌落的总数。
(2)大肠菌群:
指一群在37摄氏度培养24小时能发酵乳糖、产酸、产气,需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌。
(3)致病菌:
即能够引起人们发病的细菌。
3.ICMSF取样方案:
A.三级法用做菌落总数和大肠菌群;B.二级法用做致病菌。
根据食品危害程度和指标严重程度划
分。
4.美国FDA取样方案P69自已画图
5.样品可分为大样、中样、小样。
要准确区分。
大样指一整批;中样是从样品各部分取的混合样,一般为200g;小样又称
为检样,一般以25g为准,用于检样.6.食品常用的采样方法:
(1)液体食品:
充分混匀,用无菌操作拆开包装,用100ml无菌注射器抽取,注入无菌盛样容
器。
(2)半固体食品:
用无菌操作拆开包装,用无菌勺子从几个部位挖取样品,放入无菌盛样容器。
(3)固体样品:
大块整体食的代表性,小块大包装食品应从不同部位的小块上切取样品,放入无菌盛样容器(4)冷冻食品:
大包装小块冷冻食品按小块个体采取,大块冷冻食品可以用无菌刀从不同部位削取样品或用无菌小手锯从冻快上锯取样品,也可以用无菌钻头钻取碎屑状样品,放入无菌盛样容品应用无菌刀具和镊子从不同部位割取,割取时应兼顾表面与深部,注意样品器(5)若需检验食品污染情况,可取表层样品;若需检验其品质情况,应取深部样品。
7.样品的制备是指对所采集的样品再进行分取、粉碎以及混匀等过程。
制备的方法可以根据被检食品的性状和检验要求,
采取剪碎振摇法、捣碎均质法、胃蠕动均质法、研磨法等。
8.检样处理:
25+225做成一个均匀的1:
10的10倍递增稀释液。
9.菌落总数的测定:
自已画示意图菌落总数检验程序水样
做几个适当倍数的稀释度
选择3个适宜稀释度,各取1ml加入到灭菌平皿内每个平皿内加入45摄氏度左右的适量琼脂
(36+-1)摄氏度(24+-1)h
菌落计数
报告
10.大肠菌群的检验:
自已画示意图大肠杆菌为革兰氏阴性菌
(1)检样的处理
(2)初发酵(3)分离培养(4)证实实验(5)报告:
查MPN表11.致病菌的检验:
自已画示意图
(1)沙门氏菌的检验:
沙门氏菌为革兰氏阴性菌
A.增菌:
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
B选择性增菌C分离D生化实验E血清学检验
(2)金黄色葡萄球菌的检验:
金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性菌
A检样的处理B增菌C分离培养D证实实验
扩展阅读:
食品微生物检验课件总结
1食品微生物检验定义:
应用微生物学的理论与方法,研究外界环境和食品中微生物的种类、数量、性质、活动规律及其对人和动物健康的影响。
2食品微生物检验的特点:
1.研究对象及范围广2.涉及学科多样3.实用性及应用性强4.采用标准化
3食品微生物检验的意义:
食品微生物检验方法为食品监测必不可少的重要组成部分。
首先,它是衡量食品卫生质量的重要指标之一,也是判定被检食品能否食用的科学依据之一。
其次,通过食品微生物检验,可以判断食品加工环境及食品卫生情况,能够对食品被细菌污染的程度作出正确的评价,为各项卫生管理工作提供科学依据,提供传染病和人类、动物的食物中毒的防治措施。
再次,食品微生物检验是以贯彻“预防为主”的卫生方针,可以有效地防止或者减少食物中毒和人畜共患病的发生,保障人民的身体健康;同时,它对提高产品质量,避免经济损失,保证出口等方面具有政治上和经济上的重大意义。
总之,食品微生物检验的目的:
为生产出安全、卫生、符合标准的食品提供科学依据。
4食品微生物检验的范围:
5食品微生物检验的指标
我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌落总数、大肠菌群和致病菌。
(1)、菌落总数
菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
(2)、大肠菌群
包括大肠杆菌和产气杆菌的一些中间类型的细菌。
寄居于人及温血动物肠道内随大便排出体外。
大肠菌群数越多,说明食品受粪便污染的程度越大。
(3)、致病菌
(4)、霉菌及其毒素
有很多霉菌能够产生毒素,引起疾病,故应检验。
6食品微生物检验的发展:
(一)致病菌检测阶段
(二)指示菌检测阶段
(三)微生态制剂检测阶段
(四)现代基因工程菌和尚未能培养菌的检测7微生物检验实验室
(一)微生物检验室基本条件
总要求:
对各室的共同要求是高度的清洁卫生,也就是要尽可能地创造无菌条件。
基本条件:
微生物检验实验室必须具备显微镜工作,微生物分离培养工作及基本化学工作顺利进行的基本条件。
具体要求:
1、光线明亮,但避免阳光直射室内;
2、洁净无菌,地面与四壁平滑,便于清洁和消毒;3、空气清新,应有防风、防尘设备;
4、要有安全,适宜的电源和充足的水源;
5、具备整洁、稳固、适用的实验台,台面最好有耐酸碱、耐腐蚀的黑胶板;
6、显微镜及实验室常用的工具、药品应设有存放橱柜。
(二)微生物检验室实验守则
在进行微生物检验时要时刻记住:
我们实验的许多对象可能是
病原微生物,如果不慎发生意外,不仅自身招致感染,而且可能造成病原微生物的传播。
检验实验室必须遵守以下守则:
1、包、衣物等勿带入实验室2、应戴口罩、帽子,换用专用鞋。
3、保持安静、有秩序,禁止饮食、吸烟等。
4、检验前应登记日期、批号,详记检验序号,日期,程序和结果5、室内保持整洁,完毕后清理桌面。
6、无菌室应备有专用开瓶器、金属勺、接种针等,使用前后应灼烧灭菌。
7、无菌室内应备有盛放3%来苏水或5%石炭酸溶液的玻璃缸,内浸纱布数块;备有75%酒精棉球;无菌室每
次使用前后,用紫外灯照射。
8、吸过菌液的吸管,投入上述玻璃筒中,不得放桌上;菌液流洒桌面,用抹布浸沾上述溶液泡在污染部位,半小时后可抹去。
若手上沾有活菌,也应在上诉消毒液中浸泡10~20min,再以肥皂及水洗刷。
9、遇火险,应立即关闭电门、煤气门,如果酒精、乙醚、汽油等着火,切勿用水,应以沙土等灭火。
10、离开前用肥皂将手洗净,脱去工作服、帽、专用鞋。
关闭门窗以及水电煤气等开关。
几种意外情况的处理:
(1)皮肤破伤:
先除尽异物,用蒸馏水和生理盐水洗净后,涂以2%碘酒。
(2)灼烧伤:
涂以凡士林、5%的鞣酸或2%的苦味酸。
(3)化学药品腐蚀伤:
若为强酸腐蚀,先用大量清水冲洗后,再用50g/L碳酸氢钠或氢氧化铵溶液洗涤中和;若为强碱腐蚀,也先用大量清水冲洗后,再用5%醋酸或5%硼酸溶液洗涤中和。
若受伤的是眼部,经上述处理后,最后滴入橄榄油或液体石蜡1~2滴。
使用前准备:
用紫外线杀菌灯进行空气消毒,开灯照射30min后关灯,间隔30min后方可进入室内工作;
霉菌较多时,先用5%石炭酸全面喷洒室内,再用甲醛熏蒸;细菌较多时,可采用甲醛与乳酸交替熏蒸。
一般情况下,可酌情间隔一定时间用2ml/m3甲醛溶液或20ml/m3
丙二醇溶液熏蒸消毒。
无菌室的熏蒸消毒主要采用甲醛熏蒸消毒法。
1、加热熏蒸
2、氧化熏蒸(甲醛熏蒸后关门密闭应保持12小时以上,为减弱甲醛刺激,熏蒸后12h,再量取等量氨水,速放入室内,同时敞开门窗以放出剩余刺激性气体。
)(三)无菌室无菌程度测定
测定无菌室无菌程度一般采用平板法:
灭菌的15ml营养琼脂培养基盖暴露于无菌室内不同地方,10min后,盖好皿盖。
倒置于37摄氏度培养24h后,观察菌落情况,统计菌落数。
每皿内菌落数不超过4个,则可认为无菌程度良好,若菌落数很多,则应对无菌室进一步灭菌,灭菌后再检验。
(四)常用仪器
超净工作台是箱式微生物无菌操作工作台,占地面积小,使用方便。
其工作原理是借助箱内鼓风机将外界空气强行通过一组过滤器,净化的无菌空气连续不断地进入操作台面,并且台内设有紫外线杀菌灯,可对环境进行杀菌,保证了超净工作台面的正压无菌状态。
高压蒸汽灭菌锅是应用最广、效果最好的湿热灭菌器,可用于培养基、生理盐水、废弃的培养物以及耐高热药品、纱布、采样器械等的灭菌。
高压蒸汽灭菌锅的种类有手提式、直立式以及横卧式等多种,它们的构造和灭菌原理基本相同。
高压灭菌锅为一双层金属圆筒,两层之间盛水,外壁坚厚,其上方或前方有金属厚盖,盖上装有螺旋,借以紧闭盖门,使蒸汽不能外溢,因而器内蒸汽压力可升高,其温度也相应增高。
高压蒸汽灭菌锅上还装有排气阀、安全阀,用来调节灭菌锅内蒸汽压力与温度并保障安全;高压蒸汽灭菌锅上还装有温度压力表,指示内部温度与压力。
常用玻璃器皿
微生物检验室所用玻璃器皿,通常以中性硬质玻璃制成。
硬质玻璃能耐受高热、高压,同时,其中游离碱含量较低,不至于影响基质的酸碱度。
试管,培养皿,三角瓶,刻度吸管,试剂瓶,玻璃缸,玻璃棒,玻璃珠,滴瓶,玻璃漏斗,载玻片、凹玻片及盖玻片,发酵罐,注射器及其大小针头,量杯、量筒。
新玻璃器皿洗涤
新玻璃器皿因含有游离碱,应先在清洁液或2%盐酸内浸泡数小时,再用自来水冲洗干净。
(2)温度计检查法
用一支150℃的水银温度计(其结构原理与体温温度计相似),使用前先将其水银柱甩到0℃以下,插入灭菌物品内层,按常规灭菌,灭菌完毕后,取出观察,确定是否达到要求的温度
2.灭菌效果检验常用方法
将有芽孢的细菌放在培养皿内,用纱布包好,按常法灭菌。
灭菌后取出培养皿,经培养后若无细菌生长,即表示灭菌效果良好。
玻璃器皿的灭菌
一般常用的玻璃器皿,在洗净晾干后,才能灭菌。
试管、三角烧瓶等,在灭菌之前,管口和瓶口塞好棉塞,在干热灭菌器内160℃,2h灭菌。
培养皿灭菌前,用牛皮纸或废报纸包好,每二对或五对为一包,排列在灭菌箱搁架上进行干热灭菌。
吸移管灭菌前,口上塞一小棉球,每支用纸包扎好,或置于金属盒里,放在灭菌器内灭菌。
(六)几个基本概念回顾:
一、灭菌
杀灭物体中或物体上所有微生物(包括病原微生物和非病原微生物)的繁殖体和芽孢的过程称为灭菌,即灭菌是杀灭或消灭一定环境中的所有微生物。
灭菌的方法分为物理灭菌法和化学灭菌法两大类。
二、消毒
用物理的、化学的或生物学的方法杀灭病原微生物的过程称为消毒。
具有消毒作用的药物称为消毒剂,一般消毒剂在常用浓度下,只对细菌的繁殖体有效,对于细菌芽孢则无杀灭作用。
三、防腐
防止或抑制微生物生长繁殖的方法称为防腐。
用于防腐的药物称为防腐剂。
某些药物在低浓度时是防腐剂,在高浓度时则为消毒剂四、无菌
无菌是不含有活的微生物的意思。
防止微生物进入机体或物体的方法叫无菌技术活无菌操作。
进行微生物学实验操作时,须严格注意无菌操作。
8食品微生物检验的一般步骤
9采样的要求
1、严格遵守样品采集的操作规程。
2、所采样品必须具有代表性。
3、采样操作要防止污染,防止变质、损坏、丢失。
4、不得加入防腐剂、固定剂等。
5、样品采集和现场测定必须有二人以上参加。
10食品微生物检验的取样方案①国际食品微生物学规范委员会(ICMSF)取样方案;②美国FDA微生物学取样方案;
③世界粮农组织(FAO)取样方案;4其他方案。
一、ICMSF方法
根据危害度的分类,将取样方案分成二级法和三级法。
在中等或严重危害的情况下使用二级抽样方案,对健康危害低的则建议使用三级抽样方案。
I类危害:
老人和婴幼儿食品及在食用前可能会增加危害的食品;
Ⅱ类危害:
立即食用的食品,在食用前危害基本不变;Ⅲ类危害:
食用前经加热处理,危害减小的食品。
将检验指标对食品卫生的重要程度分成一般、中等和严重三档
在进行详细叙述之前,先解释四个代号:
n:
系指同一批次产品应采集的样品件数。
c:
最大可允许超出m值的样品数。
m:
微生物指标可接受水平的限量值。
M:
微生物指标的最高安全限量值。
①二级法:
设定取样数n,指标值m,允许有c个样品其相应微生物指标检验值大于m值。
二级抽样方案:
自然界中材料的分布曲线一般是正态分布,以其一点作为食品微生物的限量值,只设合格判定标准m值,超过m值的,则为不合格品。
检查在检样是否有超过m值的,来判定该批是否合格。
以生食海产品鱼的副溶血性弧菌为例,n=5,c=0,m=100,n=5即抽样5个,c=0即意味着在该批检样中,不得有超过m值(100)的检样,此批货物为合格品。
如果c0表明该批产品不合格。
②三级法:
设定取样数n,指标值m,附加指标值M,介于m与M之间的样品数c。
按照三级采样方案设定的指标,在n个样品中,允许全部样品中相应微生物指标检验值小于或等于m值;允许有c个样品其相应微生物指标值在m值和M值之间;不允许有样品相应微生物指标检验值大于M值。
例如:
冷冻生虾的细菌数标准n=5,c=3,m=10,M=100,其意义是从一批产品中,取5个检样,经检样结果,允许≤3个检样的菌数是在m~M值(10~100)之间,如果有3个以上检样的菌数是在m~M值(10~100)之间或一个检样菌数超过M值(100)者,则判定该批产品为不合格品。
11食品微生物检验采样原则
能采取完整包装的样品就不拆开取样,必须拆开包装
取样的应按无菌操作进行取样。
12样品的送检要求
1、要快速运送:
不要超过3小时;
2、若路途遥远,可在1~5℃低温下运送;3、要注意防污染、防散漏、防变质;4、要填写检验申请单。
13样品的保留
(1)阴性样品:
在发出报告可及时处理;
(2)阳性样品:
在发出报告以后3天才能处理样品;
(3)进口食品的阳性样品:
要保留6个月才能处理。
(4)微生物检验不进行复检14无菌技术
(一)什么是无菌技术
指在微生物实验工作中,控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。
(二)无菌环境
无菌室;无菌柜;超净工作台
1、无菌室
(1)无菌室的结构:
更衣间、缓冲间、操作间
(2)无菌室的消毒和防污染每日(使用前)紫外线照射(1~2小时).每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸(2小时).每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。
2、超净工作台
超净台的使用与保养:
(1)风速保持在0.32-0.48米/秒;
(2)使用前开启紫外灯照射30分钟以上;
(3)让超净台预工作10~15分钟;
(4)使用完毕后,用70%酒精将台面和台内四周擦拭干净.
(四)无菌操作
1、无菌操作目的:
(1)保证待检物品不被环境中微生物的污染;
(2)防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员。
2、进入无菌室前的准备
(1)定期检查无菌环境的空气是否符合规定;
(2)用紫外线灭菌处理30~60分钟;(3)检查无菌器材是否完备;
(4)洗手消毒;
(5)手部消毒后,再穿戴无菌工作服。
3、检验操作过程的无菌操作要求
(1)在操作中不应有大幅度或快速的动作;
(2)使用玻璃器皿应轻取轻放。
(3)在正火焰上方操作;
(4)接种用具在使用前、后都必须灼烧灭菌;(5)在接种培养物时,协作应轻、准。
(6)不能用嘴直接吸吹吸管。
(7)带有菌液的吸管、玻片等器材应及时置于盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒。
15微生物的接种
将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
常用的接种方法有以下几种:
1)划线接种2)三点接种3)穿刺接种4)浇混接种5)涂布接种6)液体接种7)注射接种8)活体接种分离纯化方法:
1.orphology
有荚膜的细菌菌落较大并且表面光滑,而没有荚膜的则表面较粗糙;
具有芽孢的细菌菌落表面常有褶皱并且不透明。
没有鞭毛不运动的细菌,特别是球菌,常形成较小、较厚、边缘较整齐的菌落;有鞭毛的细菌则较大而扁平,边缘波状、锯齿状等;
17细菌的生化反应检查法
由于细菌各自酶系统不同,新陈代谢的产物也有所不同,而这些产物又各具有不同的生物化学特性。
为此,可利用生物化学的方法来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的细菌,这种试验称为细菌的生化反应试验。
1.在培养物中加入某种底物与指示剂,经接种、培养后,观察培养基的PH值变化。
2.在培养物中加入试剂,观察它们同细菌代谢产物所生成的颜色反应。
3.根据酶作用的反应特性,测定酶的存在。
4.根据细菌对理化条件和药品的敏感性,观察细菌的生长情况。
生化试验的注意事项
1、待检菌应是新鲜培养物。
培养18-24h。
2、待检菌应是纯种培养物。
3、遵守观察反应的时间。
观察结果的时间,多为24或48小时。
4、应做必要的对照试验。
5、提高阳性检出率,至少挑取2-3个待检的疑似菌落分别进行试验。
生化试验分类
(一)糖类代谢试验
(二)氨基酸和蛋白质代谢试验(三)有机酸盐和铵盐代谢试验(四)酶类试验
18糖(醇)发酵试验
原理糖类是作为碳源和能量来源提供细菌合成菌体成分必需的原料,由于细菌各自有不同的酶系统,故对糖(醇)类的分解能力不尽相同。
有的能分解某些糖类,生
成酸又生成气体,有的虽能分解这些糖类但只能生成酸不能生成气体,有的则根本不能分解。
借此特点,可作为鉴定细菌的依据之一。
该试验检查细菌对加在基础培养基中的特殊的糖发酵(降解)后产酸或产酸产气能力。
方法
(1)试剂:
糖发酵培养基中,常用的指示剂主要有酚红、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫和酸性复红等。
前二者颜色反应较敏感,但稳定性较差。
后二者比较稳定。
特别是对发酵迟缓的细菌,培养时间较长,则以后二者为优。
(2)培养基:
液体糖发酵管,半固体糖发酵管,固体糖发酵管,双糖(或三糖)高层斜面发酵管。
(3)操作:
以无菌操作的方法将经分离培养的纯种细菌接种到糖(醇)发酵培养基中,置温箱内,按各类菌所要求温度(通常为37℃)经一定时间(数小时至二周)培养,然后观察结果。
记录:
产酸不产气,阳性,以“+”表示产酸产气,阳性,以“”表示不产酸产气,阴性,以“-”表示
19甲基红(MR)试验
原理:
某些细菌分解葡萄糖的过程中产生丙酮酸,丙酮酸进一步被代谢成为乳酸,乙酸,甲酸等。
使培养基的pH下降至4.5以下,加入甲基红指示剂出现红色为阳性;有些细菌分解葡萄糖产酸量少,或产生的酸进一步转化为其他物质,最终的酸类较少,培养基pH较高,加入甲基红指示剂呈黄色为阴性反应。
因此该试验是检查细菌发酵葡萄糖产生并保持稳定的酸性终末产物和克服体系缓冲作用的能力,某些细菌比其他细菌能够产生更多的酸。
方法
(1)培养基:
葡萄糖蛋白胨水(MR/VP培养基)。
(2)试剂:
甲基红指示剂。
(3)操作:
待检菌18~24h纯培养物接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中;37℃培养2~3d,每2ml培养液加2滴甲基红指示剂,立即观察。
结果
MR阳性:
培养物有足够的酸,能使培养基表面甲基红试剂仍保持明显的红色(pH4.4);
MR阴性:
培养基表面呈黄色(pH6.0);
延迟反应:
橙色,应继续孵育到4天,并重复试验。
20硫化氢试验
原理:
某些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸生成H2S,H2S可与加入培养基中的铅或铁离子生成黑色硫化物。
方法与结果
(1)琼脂穿刺法:
培养基:
三糖铁培养基、含硫酸亚铁(或醋酸铅)的半固体培养基。
操作:
将试验细菌以接种针沿管壁穿刺接种到含醋酸铅或硫酸亚铁培养基中,经37℃24h培养后,观察结果。
结果:
培养基变黑色为阳性。
当产生硫化氢量少时,为了便于观察结果,在穿刺接种培养时,一定要沿培养基管壁进行。
(2)醋酸铅试纸法:
培养基:
含胱氨酸的半固体培养基、浸有醋酸铅的滤纸条。
操作:
待检菌穿刺接种培养基,悬挂醋酸铅纸条,37℃培养24~48h。
结果:
试纸呈黑色为阳性。
该法较敏感。
21血浆凝固酶试验
原理金黄色葡萄球菌可产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白,附着于细菌的表面,产生凝固。
凝固酶可分为两种,一种是与细胞壁结合的凝固酶,可用玻片法测定;另一种是菌体生成后释放于培养基中的游离凝固酶,可用试管法测出。
方法
(1)玻片法:
在玻片上分别滴加新鲜人或兔血浆及生理盐水各一滴,挑取待检菌的菌落,分别与血浆和生理盐水混合,立即观察结果,如血浆中有明显颗粒出现,而生理盐水中无自凝现象为阳性。
(2)试管法:
小试管3支内各加入l4稀释的新鲜人或兔血浆0.5ml,其中一支加待检菌18~24h肉汤培养物0.5ml,另一支加阳性菌株18~24h肉汤培养物0.5ml,再一支加肉汤培养基0.5ml为阴性对照,轻振混匀。
3支试管放37℃水浴中3~4h,观察结果。
结果待检菌株管和阳性菌株管出现凝固,阴性对照管不出现凝固,为阴性。
21抗原定义:
抗原是指进入动物体内能刺激动物的免疫系统发生免疫应答,从而引起动物产生抗体或形成致敏淋巴细胞,并能和抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
完全抗原包括下面两方面的免疫性能:
A免疫原性指抗原进入体内刺激免疫系统产生抗体或形成致敏淋巴细胞特性,具有这种能力的物质称为免疫原;B免疫反应性指抗原能和对应的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的特性,又称为反应原性。
半抗原:
有些物质,例如某些真菌毒素,单独存在时只有反应原性而无免疫原性,是非免疫原物质,被称为半
抗原。
半抗原必须经过改造后才具有免疫原性。
22抗体
定义:
抗体Ab是由抗原刺激动物的免疫系统后,由免疫系统产生分泌的能和相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白Ig。
通常Ab和Ig可作为同义词使用。
23抗原-抗体反应概念:
即抗原和抗体之间的特异性反应,可以发生在体内,也可以发生在体外,前者可以介导体内毒素中和、杀菌和溶菌等作用,后者在体外进行,是免疫检测技术的基础,但是它们的基本反应特性是相同的。
在进行体外免疫学实验时,通常是以存在于血清中的抗体(也是抗体的主要存在形式)为材料进行的,所以体外免疫学反应又称为血清学反应。
原抗体反应的原理
抗体(Ab)是球蛋白分子,在水溶液中,由于分子之间电荷等的相互作用而呈胶体状,不会自然沉淀,同样(可溶性)抗原(例如蛋白质)在溶液中一般也不会自然沉淀。
当抗原(Ag)和对应的特异性抗体结合反应时,电荷减少或消失从而使它们由亲水胶体变为疏水胶体,形成肉眼可见的抗原-抗体复合物。
反应过程:
①不可见阶段②可见阶段
抗原-抗体反应的特性:
特异性;可逆性;比例性
24常见的血清学反应
1、凝集反应2.沉淀反应
3、补体结合试验4.免疫标记技术
25菌落总数的几个概念
菌落总数:
AerobicPlateCount,食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培基、温度、时间、pH、需氧性质等)所得1mL(g)检样中形成微生物菌落的总数。
只包括一群在平板技术琼脂上生长发育的嗜中温需氧或兼性厌氧菌的菌落总数。
菌落总数不等于细菌总数。
菌落:
单个微生物在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度,形成肉眼可见有一定细菌群落。
CFU:
ColonyFormingUnits,菌落形成单位。
26大肠菌群的定义及范围
大肠菌群系一群在37℃,24h能发酵乳糖,产酸、产气,需
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