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海参
海参加工
海参离开海水易自溶,90%以上的海参需经蒸煮加工后保藏,会产生大量的海参加工液。
海参加工液中含有与海参自身几乎相同的化学组成,如海参多糖、蛋白、油脂、皂苷等;加工液中的海参蛋白和多糖大都是可溶性的,更容易被人体吸收消化。
如果这些有效成分被充分地开发利用,全国的海参加工液将产生近100亿元/年的经济效益。
目前,海参加工液几乎全部作为废液排放,不仅造成环境污染,而且经济损失巨大。
因此为提高海参的附加值,减少环境污染,本文针对海参加工液中的多糖、蛋白、油脂及皂苷等有效成分做了如下研究。
首先,以海参加工液及浓缩液为例,考察了不同亲水性有机溶剂/无机盐双水相组成的盐析萃取体系对海参有效成分的萃取能力。
结果显示,乙醇/碳酸钠和叔丁醇/硫酸铵体系对海参蛋白和多糖有较好的萃取效果。
乙醇/碳酸钠体系的最佳工艺条件为:
乙醇16%(w/w)/碳酸钠12%(w/w)/海参加工液72%(w/w),温度37℃,此时蛋白和多糖回收率分别为96.9%和90.6%;叔丁醇/硫酸铵体系的最佳工艺条件为:
硫酸铵30%(w/v)/海参加工液与叔丁醇比为1:
1.5(v/v)、室温,此时蛋白和多糖回收率最高分别为99.6%和92.1%。
因此利用盐析萃取技术可有效地将海参加工液中的蛋白和多糖进行粗分离。
同时,考察了乙醇/碳酸钠体系对金属离子的去除情况,结果显示该体系可有效降低重金属含量。
汞、铅和砷离子经此体系处理后的残留率均为0,镉离子经此体系处理后的残留率为13.8%。
其次,对正己烷/乙醇/碳酸钠组成的三液相盐析萃取体系同时萃取海参加工液中的油脂、皂苷、蛋白和多糖等多种有效成分进行了研究,考察了不同乙醇/碳酸钠体系、正己烷浓度和温度对分离效果的影响。
结果表明,当体系为28%(w/w)正己烷/16%(w/w)乙醇/12%(w/w)碳酸钠,温度37℃时,86.9%的海参油脂分配在上相,82.9%皂苷及少量可溶性蛋白和多糖分配在中相,92.9%蛋白和93.2%多糖分配于中、下相界面,以固相形式存在,同时汞、铅、砷和镉等重金属离子被富集在下相。
将体系逐级放大到40mL、3L、20L和30L时,结果显示体系从20mL放大到30L后多糖回收率降低1%,蛋白回收率降低2.8%,油脂萃取率降低1%,因此放大效应不明显。
同时考察了对各成相物质的回收及循环利用情况,结果表明上相中正己烷的回收率为90%,醇相中乙醇的回收率为80%,下相中盐的回收率为72%。
利用所回收的物质进行循环萃取,循环萃取1次蛋白回收率较纯溶剂和盐组成的体系降低1.9%,油脂得率降低5.4%,仍能达到分离要求。
综上所述,盐析萃取体系可以同时提取与分离海参加工液中的多种有效成分、具有操作简便、条件温和、成本低廉、易于放大,并有效降低重金属的作用。
最后,基于实验参数,对海参加工液中有效成分盐析萃取技术进行工艺及设备的设计与经济估算。
整个设计内容分为三部分,第一部分主要是原辅料储罐的设计;第二部分为萃取器及体系各相储罐的设计;第三部分是旋蒸仪、蒸发器、盐洗涤器等各部分分离设备及各相产品储备设备的设计。
对整个工艺流程进行经济估算,结果显示,从构成要素来看,原辅材料和销售成本是生产成本的决定性因素,两者共占总成本的77.8%敏感性分析表明,销售费用对生产成本的变化最为敏感,其次是正己烷价格,最后是乙醇的价格。
因此,可以考虑通过提高盐和溶剂的回收率,降低销售成本来降低生产总成本,提高经济效益。
利用木瓜蛋白酶酶解海参脏器提取多糖,探讨酶解温度、酶解时间、pH值、料液比、加酶量等对海参脏器多糖得率的影响,确定最适提取条件为:
酶解温度55℃,pH8.0,加酶量3.0%,料液比1∶30(g/mL),酶解时间4h,在此条件下,海参脏器多糖的得率为14.76%。
从刺海参中,通过正己烷提取,乙醚分配,甲醇重结晶,乙酸酐酯化和GC/MS分析等方法分离、鉴定出5种甾醇。
经过鉴定海参体内含有的甾醇分别是:
胆甾醇、5α-胆甾-7-烯-3β醇、胆甾-7-烯-3β醇、5α-麦角甾-7,22-双烯-3β醇、豆甾醇,其中胆甾-7-烯-3β醇的质量分数占66.68%,这是首次从海参体内提取得到甾醇。
皂苷(或皂甙)广泛存在于部分陆生植物和海洋棘皮动物海参和海星中,具有溶血、抗肿瘤、抗真菌、细胞毒、免疫调节、抑制Na+-K+-ATP酶等多种生理和药理学活性。
海参体内富含的海参皂苷,是一类主要的次生代谢产物。
目前,对海参皂苷的分离制备主要采用乙醇或甲醇等有机溶剂萃取法,但这类方法不仅有机溶剂使用量大、成本高、易污染环境、不适于工业化生产,而且所得海参皂苷制品的水溶性较差,限制了海参皂苷在医学临床上的应用途径和应用范围。
遗憾的是,至今还未见到有关水溶性海参皂苷分离纯化及生物活性的研究报道。
为此,本文以仿刺参(Apostichopusjaponicus)为材料建立了其水溶性海参皂苷的提取方法,利用各种层析技术对水溶性海参皂苷进行了分离纯化,并对各种皂苷制品的抗菌活性进行了研究,利用体外培养的肿瘤细胞进行了抗肿瘤活性研究,并进行了抗氧化和驱蝇活性研究,旨在筛选出具有强抗真菌和抗肿瘤活性的水溶性海参皂苷纯化样品,为利用水溶性海参皂苷研制高效抗真菌、抗肿瘤及驱蝇药物创造条件。
利用正交实验对从冻干仿刺参加工废弃液中制备水溶性海参皂苷的技术工艺进行了优化,结果显示,从冻干仿刺参废弃液中分离制备水溶性海参皂苷的最佳技术工艺条件为:
仿刺参废弃液pH值为10,AB-8大孔树脂柱的上样速率为2倍柱体积(BV)/h、洗脱用乙醇浓度为70%、洗脱体积为6BV。
该技术工艺具有操作简单、有机溶剂使用量少、适合于工业化生产等诸多特点,不仅可用于水溶性海参皂苷的大规模制备和生产,而且还充分利用了冻干仿刺参加工废弃液,有效避免了因该废弃液排放所造成的环境污染问题。
从冻干仿刺参废弃液中分离制备出的水溶性海参皂苷属于三萜皂苷;抑菌结果表明,水溶性海参皂苷对裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)、酵母菌啤酒酵母(Saccharomyescerevisiae)、白色念珠菌(Candidaalbicans)、葡萄炭疽病菌(Colletotrichumgloeosporioides)、黄瓜枯萎病原菌(Fusariumoxysporumf.sp.cucumerinum)和霉菌黑曲霉(Aspergillusniger)均具有显著的抑菌活性,其最低抑菌浓度MIC值分别为0.002、0.016、0.063、0.063、0.125和0.250mg/mL,而对枯草芽胞杆菌(Bacillussubtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大肠杆菌(Eschetichiacoli)和绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)均没有抑制作用;所得皂苷对体外培养的HeLa宫颈癌细胞、A-549肺癌细胞、SGC-7901胃癌细胞和Bel-7402肝癌细胞均具有显著的增殖抑制活性,IC50值分别为16.39、13.98、14.51和15.29μg/mL;浓度为20mg/mL的皂苷在24h内具有显著的驱蝇活性;所得皂苷没有明显的抗氧化活性。
将所得水溶性海参皂苷再次上样于AB-8大孔树脂柱,分别利用30%、50%、70%、80%和95%进行洗脱,发现70%、80%和95%乙醇溶液洗脱组分不仅对6种真菌具有显著的抗真菌活性,而且对体外培养的4种癌细胞也均具有显著的抗肿瘤活性。
所得具有显著抗真菌活性和抗肿瘤活性的70%乙醇溶液洗脱组分,经硅胶柱层析和SephadexLH-20柱层析进一步纯化后,获得了4种水溶性海参皂苷单体组分SC1~4,其中SC-2、SC-3和SC-4的纯度分别为99.6%、99.8%和96.2%;SC-2和SC-3具有极强的抗真菌和抗肿瘤活性,它们对裂殖酵母菌、啤酒酵母菌、白色念珠菌、葡萄炭疽病原菌、黄瓜枯萎病原菌和黑曲霉的MIC值相同,分别为0.25、4、8、﹤32、32和﹤32μg/mL;SC-2和SC-3对体外培养的HeLa细胞、A-549细胞、SGC-7901细胞和Bel-7402细胞具有极强的抗肿瘤活性,SC-2对4种癌细胞的IC50值分别为3.23、4.13、4.41和3.04μg/mL,SC-3的IC50值分别为3.49、4.11、4.26和3.15μg/mL。
利用S180荷瘤小鼠对水溶性海参皂苷单体组分SC-2体内抗肿瘤活性的鉴定结果表明,剂量为2、5和10μg/g体重的SC-2单体组分,能显著抑制小鼠S180实体瘤的生长,其对实体瘤的抑制率分别为33.88%、38.93%和47.84%;剂量为2、5和10μg/g体重的SC-2单体组分能显著提高S180荷瘤小鼠的胸腺指数(P﹤0.01),也能不同程度地提高S180荷瘤小鼠的脾指数。
利用体外培养HeLa细胞和吖啶橙/溴化乙锭双染色法对SC-2单体组分的抗肿瘤作用机理进行了初步研究,发现SC-2具有诱导HeLa细胞发生凋亡的能力,浓度为50μg/mL时在12h内可诱导几乎所有细胞发生凋亡,且浓度为10和50μg/mLSC-2处理12h后的HeLa细胞均出现了明显的DNA断片化。
说明水溶性海参皂苷单体组分SC-2之所以具有抗癌活性,主要是通过诱导癌细胞发生细胞凋亡来实现的。
本文在国内外首次建立了制备水溶性海参皂苷的最佳技术工艺及其单体组分的纯化方法,分离纯化出具有极强抗真菌和抗肿瘤活性的水溶性海参皂苷单体组分,不仅可以作为纯天然新型海洋抗肿瘤药物和抗真菌药物研制的理想候选者,而且对其它海洋棘皮动物水溶性皂苷的分离纯化具有重要的指导价值,对于深入研究棘皮动物水溶性皂苷的性质及其药理活性也具有重要的科学意义。
目的研究东海刺海参冻干粉对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫功能的影响。
同时研究了海参冻干粉对大鼠乳腺癌的抑制作用并探讨了其机理。
方法1健康昆明小鼠50只,皮下接种S180肿瘤细胞,次日随机分成模型对照组,阳性对照组(20mg/kg.d),低、中、高三个剂量组(0.4g/kg.bw,0.8g/kg.bw,1.6g/kg.bw),连续给予受试物10天后,观察瘤重、抑瘤率;瘤组织的病理改变,免疫组化法测定瘤组织中caspase-3蛋白以及bax和bcl-2的蛋白表达;脾指数、胸腺指数;利用ELISA法检测血清中IL-2和TNF-α的含量。
2健康SD大鼠80只,随机分成2大组,对照组20只,海参组60只。
对照组又分为空白对照组10只与模型对照组10只(DMBA),海参组分为DMBA致癌前喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组(0.5g/kg.bw、1.0g/kg.bw、2.0g/kg.bw)和DMBA致癌后喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组(0.5g/kg.bw、1.0g/kg.bw、2.0g/kg.bw)。
模型组与DMBA致癌前喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组:
先用海参冻干粉溶液灌胃2周,再给予致癌剂DMBA(即从第3周开始),再持续灌胃到24周结束;DMBA致癌后喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组:
先给予致癌剂DMBA(即从第3周开始),2周之后再灌胃海参冻干粉溶液,持续灌胃到24周结束。
观察各组大鼠肿瘤的平均潜伏期、肿瘤诱发率,乳腺标本经光镜观察,免疫组化法测定VEGF、bFGF、PCNA的蛋白表达。
结果1海参冻干粉对小鼠S180肉瘤的抑制作用:
①海参中、高剂量组与模型对照组比较瘤重明显减小,体积明显减小,抑瘤率显著增加,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。
②模型对照组的病理改变较之中高剂量组非常明显,各剂量组caspase-3蛋白表达明显高于模型对照组(P<0.01),低于阳性对照组。
中、高剂量组的bcl-2的蛋白表达远远低于模型对照组的表达(P<0.05),海参低、中剂量组与阳性对照组相比其bcl-2的蛋白表达则明显升高(P<0.05)。
海参冻干粉高剂量组的bax蛋白表达远远高于模型对照组的蛋白表达(P<0.01),与阳性对照组相比,海参各剂量组的bax蛋白表达显著降低(P<0.05)。
③脾指数、胸腺指数有一定的增加趋势,海参各剂量组与模型对照组和阳性对照组相比无统计学意义。
④与模型对照组相比海参中、高剂量组的IL-2含量显著增加(P<0.01),海参各剂量组IL-2的含量显著高于阳性对照组(P<0.01)。
海参冻干粉高剂量组TNF-α的含量与模型对照组相比显著增加,具有统计学意义(P<0.05),阳性对照组的TNF-α的含量显著高于海参冻干粉各剂量组(P<0.01)。
2海参冻干粉对大鼠乳腺癌的抑制作用:
①各个海参冻干粉组与模型对照组相比,其乳腺癌的潜伏期明显延长(P<0.01)。
②模型组的乳腺癌诱发率达到了70%,其余海参冻干粉各个组的乳腺癌诱发率分别都达到了60%、60%、40%、60%、60%、50%。
③抗VEGF:
海参冻干粉剂量组与空白对照组相比,各个剂量组的VEGF的蛋白表达均明显升高(P<0.01),与模型对照组比较,海参冻干粉各个剂量组除了DMBA致癌前后喂饲海参冻干粉低剂量组外其VEGF的蛋白表达则明显降低,有统计学意义(P<0.01)④抗bFGF:
海参冻干粉各个剂量组与空白对照组相比较其bFGF的蛋白表达明显升高(P<0.01),与模型对照组相比海参冻干粉剂量组除了DMBA致癌前喂饲海参冻干粉低剂量组、DMBA致癌后喂饲海参冻干粉低、中剂量组外,其余各个组的bFGF的蛋白表达明显降低(P<0.05)。
⑤抗PCNA:
海参冻干粉各个剂量组PCNA的蛋白表达显著高于空白对照组(P<0.01),与模型对照组比较海参冻干粉各剂量组除DMBA致癌前后喂饲海参冻干粉低剂量组以外,其余各个剂量组均显著降低(P<0.01)。
结论刺海参冻干粉对荷瘤小鼠有明显的抗肿瘤作用,对其免疫系统具有一定的保护和恢复作用。
刺海参冻干粉对诱导性大鼠乳腺癌有明显的抑制作用。
海参制品中盐分测定方法。
对比煮制法、沉淀蛋白法和灰化法3种方法处理样品后,再利用直接滴定法、间接滴定法和电位滴定法3种方法测定样品中的盐分。
结果表明,灰化法制备试液具有操作简便、测量结果准确度高等优点;直接滴定法精密度满足试验需求,操作简便,适合海参制品的盐分测定。
海参岩藻聚糖硫酸酯是海参体壁中重要的活性硫酸多糖,具有抗肿瘤、抗病毒、免疫调节、降血糖和降血脂等广泛的药理活性,其活性受多糖支链和硫酸根含量等结构影响。
其中,美国肉参岩藻聚糖硫酸酯是一类具有很高粘度和较高相对分子量的直连硫酸多糖,使用TSKG4000PWXL色谱柱测定其分子量达435KDa。
PMP法测定单糖组成,分析其单糖仅含有岩藻糖。
离子色谱法测定其硫酸基含量约为32.9%。
本实验以美国肉参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)为研究对象,通过建立体外化学缺氧模型和体内自发肺转移模型,系统地评价了SC-FUC抗肿瘤活性及初步探讨了其作用机制。
主要研究结果如下:
采用MTT法对不同分子量海地瓜SC-FUC低聚糖和美国肉参SC-FUC的体外抗肿瘤活性进行了筛选。
结果显示,不同分子量的海地瓜SC-FUC低聚糖对体外培养的肿瘤细胞的生长抑制作用不同,多种肿瘤细胞株对海地瓜SC-FUC低聚糖的作用不敏感;美国肉参SC-FUC具有显著抑制肿瘤细胞增殖活性的作用,人胃癌HGC-27细胞对其作用最为敏感,72和96h的IC50值分别为399.74和126.97μg/mL,具有时间和剂量效应关系。
以HGC-27细胞为研究对象,采用MTT法和RT-PCR法筛选化学缺氧诱导剂CoCl2诱导HGC-27细胞的缺氧浓度,建立化学缺氧模型。
结果表明:
25μMCoCl2对HGC-27细胞的生长无显著影响,且细胞HIF-1αmRNA的表达量较高,故以浓度为25μM的CoCl2建立缺氧模型。
采用MTT、AO/EB染色、TUNEL和RT-PCR法及Westernblotting法对缺氧条件下SC-FUC体外抗肿瘤活性及其可能机制进行了探讨。
结果表明:
SC-FUC能显著抑制缺氧诱导的HGC-27细胞的增殖活性(72和96h的IC50值分别为169.85和100.04μg/ml),改变细胞的周期,形成G2/M期阻滞,并诱导肿瘤细胞凋亡。
RT-PCR和Westernblotting法实验结果显示,SC-FUC能下调HIF-1α及其介导的Bcl-2、Bcl-xl的表达,上调Bax、细胞色素c和caspase3的表达,增加PARP-1的裂解。
提示SC-FUC具有显著抑制缺氧条件下肿瘤细胞生长的活性,其作用机制可能与阻滞细胞周期,并通过HIF-1α及其介导的线粒体信号通路激活肿瘤细胞的凋亡相关。
通过研究SC-FUC对缺氧诱导的HGC-27细胞转移活性及其作用机制,结果表明,SC-FUC可显著抑制缺氧条件下肿瘤细胞的迁移(P<0.01)、粘附(P<0.05,P<0.01)和侵袭能力(P<0.01)。
在转录和翻译水平上,RT-PCR和Westernblotting法结果表明,SC-FUC可下调Hpa和HIF-1α及其介导的MMP-2/-9的表达,上调TIMP-2/-1的表达,从而通过降低肿瘤细胞外基质的侵袭能力而发挥抗转移作用。
采用MTT法、体外小管形成和鸡胚尿囊膜实验,研究SC-FUC对肿瘤血管新生的影响。
结果说明SC-FUC能显著抑制内皮细胞的生长和新生血管的生成。
RT-PCR和Westernblotting检测显示,SC-FUC可以抑制血管内皮生长因子VEGFmRNA和蛋白的表达。
提示SC-FUC可通过抑制VEGF的活性抑制血管新生。
通过建立小鼠Lewis肺癌自发肺转移模型,进一步验证SC-FUC在体内抑制肿瘤生长和转移的作用。
结果表明,SC-FUC可以显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长和肺转移,平均抑制率分别为45.6%和65.9%;可降低荷瘤小鼠肿瘤组织中HIF-1α、Hpa及MMP-2/-9、VEGFmRNA和蛋白的表达。
提示SC-FUC能显著抑制肿瘤细胞在小鼠体内的生长和转移,可通过降低ECM降解酶的活力,减少VEGF的释放,从而抑制肿瘤转移和血管新生。
综上所述,本论文系统地研究了SC-FUC体外、体内抗肿瘤生长和转移作用,并初步阐明了其抑制肿瘤生长、转移和血管新生的机制,为深入挖掘海参岩藻聚糖硫酸酯药用价值,推动海参多糖的加工利用提供理论基础和科学依据。
比较大西洋海参(HolothuriacoluberSemper)、东海海参(AcaudinamobpadioidesSemper)、刺参(Apostichopusjaponicus)和加州拟刺参(Parastichopuscalifornicus)这4种海参多肽的抗氧化活性。
方法经酶解、超滤得到海参多肽,通过其对DPPH.、.OH和O2-.的清除效率来比较4种海参多肽的抗氧化活性。
结果与结论4种海参多肽对自由基的清除能力总体上均随样品质量浓度的增加而增强,但同一种海参多肽对3种自由基的清除能力各不相同。
大西洋海参多肽、刺参多肽和加州拟刺参多肽分别对.OH、DPPH.和O2-.的清除能力最强。
此外,4种海参多肽中含有的主要氨基酸均为甘氨酸和丙氨酸。
海参是营养价值极高的海产品,但鲜活海参因有自溶现象,不易保存。
因此,鲜海参被加工成多种海参制品在市场上流通,而干海参便是最为主要的海参制品。
随着海参加工技术的提高和海参加工行业的发展,全面评价干海参产品的各项指标并制定干海参国家标准的需求已经十分迫切。
本论文以刺参为研究对象,进行了以下几个部分的研究:
1、研究了干海参外源性总糖的检测方法。
研究比较确定了提取溶剂、乙醇浓度、提取温度、提取时间和料液比。
最终确定最佳的干海参总糖提取条件为:
称取1g样品,加入50mL80%的乙醇溶液,40℃水浴震荡提取1小时。
利用苯酚-硫酸法进行测定。
该外源性总糖的检测方法线性范围为0-80mg/L;检出限为1.16μg/mL;测试液在1h以内稳定性良好;方法精密度满足实验需求,相对标准偏差在2%以内;以淡干和盐干海参为本底,样品加标回收率在82.97%~98.68%之间,相对标准偏差为1.38%~3.45%。
该方法可以有效区分掺糖干海参。
考虑到实验误差和加工方式不同,建议将外源性总糖含量大于3%的干海参判定为掺糖干海参。
2、研究了干海参复水后干重率的检测方法和复水后干重率与蛋白质、盐分的关系。
实验结果表明复水后干重率的最佳测定方法为:
将干海参清洗、预浸泡,并将整只海参切成5mm段,大火煮沸,小火保持微沸1小时后,浸泡放置24h,再切成约5mm×5mm小块,烘6h称重测定。
将复水后干重率同干海参的蛋白质、盐分进行相关性分析得出复水后干重率同蛋白质含量呈显著正相关,同盐分含量呈显著负相关。
实验结果显示,利用复水后干重率这一指标可以有效的区分出淡干海参、盐干海参及掺糖干海参并可以很好的评判干海参的优劣。
3、研究了干海参的最佳水发工艺,探讨了干海参水发前后嫩度、重金属、兽药残留等指标的变化。
实验结果表明,最佳的干海参水发工艺为:
干海参经预浸泡24h后,清洗泥砂,去除嘴部石灰质,剥离纵肌,大火煮沸、小火保持沸腾30min,冷却后,在0-5℃冷藏20h。
盐干海参重复上述煮沸、冷藏放置操作1次,发制2天;淡干海参重复2次,发制3天。
若不确定干海参的种类,可根据情况发制2-3天。
海参经此法发制后,弹性适中,口感较好。
实验中海参嫩度值随发制时间延长而降低,与淡干海参相比盐干海参嫩度下降较快。
达到可食用状态的干海参的嫩度范围为:
5.72±0.72~8.84±0.59,与市售火腿肠的嫩度值:
5.71±0.36~8.27±0.81相似。
可见合理的水发工艺可以提高海参的适口性。
4、对干海参的盐分测定方法进行了优化。
实验结果表明:
灰化法为干海参盐分测定滤液制备的首选方法,其操作简便、精密度高,十分适用于海参制品盐分含量的测定。
直接滴定法准确度和精密度均能满足实验需求,操作简单,成本低廉,适用于一般实验需要。
使用自动电位滴定仪测定干海参的盐分含量,可以减少人为操作误差,适合批量测定,但自动电位滴定仪价格昂贵,测定少量样品步骤复杂,不适用于日常实验需求。
间接滴定法操作复杂,不建议采用。
5、对《干海参》标准中,其他一些指标进行了说明。
包括干海参复水前后重金属和兽药残留量、蛋白质、水分及含砂量指标。
实验对比了干海参水发前后的重金属和兽药残留的变化。
检测结果显示,干海参经水发达到可食用状态时,重金属的含量会大幅度降低。
干海参的兽药残留较少,对氯霉素、孔雀石绿、磺胺总量、多氯联苯、土霉素、呋喃代谢物进行测定后发现,只有呋喃唑酮代谢物有检出,且在干海参水发之后,呋喃唑酮也未检出,可见合理的水发工艺可以提高海参的食用安全性,并且干海参是在水发后食用,所以应以重金属和兽药残留的检测应以水发后质量计算。
因为干海参蛋白质与水分的测定方法可以满足检测需要,本研究对这两项指标只进行了样品测定,为国家标准《干海参》的制定提供数据支持。
64个样品中,蛋白质含量在72.6%~19.8%之间,水分含量在1.75~23.24%之间,对72个样品进行含砂量的检测,含砂量不含海参嘴部石灰质计算,含量在0.31~7.17%之间。
利用海参自身的蛋白酶使其机体自溶,研究酶解液中不同分子量的海参多肽的抗氧化活性。
采用超滤膜将海参酶解液分级分离,得到SPHI(>10kDa)、SPHII(5~10kDa)、SPHIII(3~5kDa)、SPHIV(<3kDa)4个分子量范围的海参多肽。
采用化学发光体系,通过测定不同分子量海参多肽清除.OH/O2-·/H2O2的IC50,比较不同分子量海参多肽的抗氧化性,以VC做阳性对照。
结果表明,4种组分对3种活性氧(ROS)的清除能力均强于VC,4种组分对3种活性氧的清除顺序分别是SPHIV>SPHIII>SPHII>SPHI。
说明海参多肽对3种活性氧均有良好的清除效果,并呈现量效关系。
比较7种大孔吸附树脂对革皮氏海参总皂苷的静态吸附和解吸效果,从中筛选出适合该海参总皂苷分离纯化的树脂,并对其动态吸附和解吸性能进行研究。
结果表明,XAD761树脂最适合革皮氏海参总皂苷的纯化。
当上样液质量浓度2mg/mL,流速0.8mL/min,上样液体积9BV时,树脂达到动态吸
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