性病实验室规章制度.docx
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性病实验室规章制度.docx
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性病实验室规章制度
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性病实验室规章制度
篇一:
性病实验室操作手册
第一章
淋病的实验
淋病(gonorrhea)是指由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖道的化脓性感染,如尿道炎、宫颈炎和直肠炎等。
如不及时治疗,淋球菌可侵入泌尿生殖器的其他部位,引起附睾、前列腺、输卵管及盆腔等器官的炎症,甚至可经血液传播到全身其他部位,形成淋菌性关节炎、腱鞘炎、心内膜炎、脑膜炎等合并症。
但另一方面,也有5%-20%的男性和60%的女性病人呈现无症状经过。
淋球菌好侵犯人类泌尿生殖道的柱状上皮细胞,凭借特异的结构和粘膜表面与之相匹配的部位粘附。
继而侵入细胞内增殖,使粘膜上皮破坏,形成炎症,出现一系列症状。
一、淋病诊断步骤
人类尿道上皮尤其是柱状上皮细胞对淋球菌相当敏感。
在感染淋球菌后,经过一段时间的潜伏期(平均3天~5天)。
由于细菌和毒素的作用,粘膜坏死、脱落、神经末梢暴露、炎症浸润、组织液渗出,病人会出现尿急、尿痛和尿道流脓等急性尿道炎症状。
淋球菌感染男性病人,常会出现尿痛和尿道流脓等临床症状。
这时取尿道分泌物作涂片,经革兰染色后,如见到有符合淋球菌形态特征的革兰阴性细胞内双球菌,则初步诊断阳性,可对病人进行治疗;如涂片查菌阴性,应从尿道取标本进行淋球菌培养。
淋球菌感染的女病人,常仅有脓性宫颈分泌物或无症状。
对女病人不推荐用涂片法检查,而主张直接从宫颈取材进行培养。
标本经培养后,菌落形态典型、氧化酶试验阳性,菌体为革兰阴性双球菌,则初步诊断为阳性培养物,如有某些性状不符合,则可进一步用糖发酵试验及直接免疫荧光法等作鉴定加以确诊。
二、标本的采集和运送
在取材作涂片时,应先用灭菌等渗盐水洗净尿道口,然后用手指由后向前挤出脓液,用棉拭或白金耳蘸取脓液后轻轻涂布于载玻片上。
待自然干燥后作染色。
如由男性病人前尿道取材作培养时,应用白金耳或藻酸钙拭子深入尿道2cm~4cm,取出的分泌物应略带粘膜。
从女病人的宫颈取材时,应将棉拭插入宫颈口1.5cm,稍转动并停留10s~30s,让棉拭充分吸附分泌物。
从肛门取材时,应将棉拭插入肛门2.5cm以上,从紧靠肛环边的隐窝中取材。
检查淋菌性咽炎时从扁桃体或扁桃体窝或咽后壁取材。
淋球菌对外环境因素如干燥抵抗力很弱。
因此,为了保证培养成功,应尽量缩短标本离体时间。
在医院门诊部,从病人取材后,应立即接种到培养基上进行培养。
如取材本处离实验室较远时,可将标本置于无营养性的stuart或Amies运送培养基或选择性生长培养墓如Trmlsgrow中运送到实验室。
标本在无营养运送培养中(在室温25℃条件下),12h对分离率无影响,在24h内分离大于90%。
如需时再应使用生长运送培养基,但即便如此,也不应超过2天。
淋病的涂片检查
【原理】
急性淋菌性尿道炎病人常有大量黄色脓性分泌物。
在有些脓细胞内可有许多淋球菌。
淋球菌革兰染色呈阴性反应,具有特殊的菌体形态。
因此,取病人尿道分泌物制成涂片后做革兰染色,检查有无典型细胞内革兰阴性双球菌,可作初步诊断的依据。
【方法】
1.先用灭菌等渗盐水的拭子揩洗尿道口,然后用手指由后向前挤出脓液,蘸取脓液后轻轻涂布于载玻片上。
待自然干燥后加热固定,染色,镜检。
常用革兰染色,也可用美蓝染色。
2.涂片后,待自然干燥后火焰固定,
革兰氏染色:
结晶紫染色1min。
碘媒染液染色1min。
乙醇丙酮脱色1min左右。
石炭酸复红复染1min。
晾干后油镜镜检。
【结果】
在急性病人的尿道脓性分泌物革兰染色涂片中,常可见到大量红色多形核白细胞。
在有些细胞中吞噬有淋球菌。
淋球菌为革兰阴性,呈卵圆形或圆形,常成对排列,接触面扁平或稍凹。
菌体长约0.7μm,宽约0.5μm。
但两菌大小可有差异。
多数多形核细胞中并不含淋菌,但不少脓细胞中常含有一至数对,甚至20对30对淋球菌,淋球菌常存在于细胞浆内。
在病期较长的淋病病人的涂片中淋球菌比较少,有时呈单个、四联和八叠状,位于细胞外。
对有些菌有时难以下结论,需进行培养和鉴定。
【注意事项】
1.涂片时不要用力涂擦,而应将棉拭在玻片上轻轻滚动,因急性病人诊断标准为见到“细胞内革兰阴性双球菌”。
涂擦过劲,细胞破裂或变形,菌从细胞内逸出,会造成诊断上的混淆。
2.涂片厚薄要合适。
涂片过厚,加之染色过程中脱色时间不足,革兰阴性菌也会呈现紫色。
因此,脱色时间要视涂片厚薄而定。
在大量染片时,最好用一已知的革兰阳性菌(如葡萄球菌)和阴性菌(如大肠杆菌)作对照。
3.固定涂片,只要将涂片迅速通过火焰2~3次,避免加热过度使细胞变形扭曲。
当把加热的涂片放到手背上时应不感到太烫。
4.不推荐用涂片检查来诊断淋菌性直肠和咽部的感染,也不推荐用作判愈。
【临床意义】
涂片检查方法简便、有效、价格低廉且有一定的敏感性和特异性。
但其特异性随着取材部位的不同而有所不同。
例如,从男性尿道取材特异性高,而从女性宫颈取材特异性低。
因女性宫颈分泌物中杂菌很多,有的在形态上很像淋球菌。
因此,世界卫生组织不推荐用涂片法来检查女性病人。
淋球菌的分离培养
【原理】
如果标本中有淋球菌,则在合适的培养基上经培养后可长成菌落。
各种细菌在培养基上生长成的菌落形态各不相同。
根据菌落的大小、表面高起或扁平、光泽、色素和边缘的情况等,作为细菌鉴定的标准。
【方法】
1.取材
培养要获得成功,取材的部位和方法要准确。
由男性病人前尿道取材时,应该用细小棉拭子或藻酸钙拭子或白金耳伸入尿道口2cm~4cm,取出的分泌物应略带粘膜。
从女病人的宫颈取材时,应先用温水湿润扩阴器(不要用液体石蜡等润滑油)。
应将棉拭插入宫颈口1.5cm处,稍转动并停留10s~30s,让棉拭充分吸附分泌物。
从直肠取材时,应将棉拭插入肛门2.5cm以上,如果棉拭碰到粪便,应换一个棉拭重取。
检查淋菌性咽炎时,应从扁桃体及扁桃体窝取材。
为了提高阳性率,可同时取二份标本进行培养。
2.培养基
由于淋球菌的营养要求较复杂,所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。
目前国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂。
为抑制杂菌,在培养基中可加入少量抗菌物质如多粘菌素b(25μg/ml)和万古霉素(3.3μg/ml)等。
所用血液如羊血、兔血和人血均可,浓度为8%~10%。
但避免血液中加入抗凝剂等药物。
培养基的ph值以7.4为好。
目前国外常用的培养基有Thayer-martin(T-m)培养基、newYorkcity(nYc)培养基和martin-Lewis(mL)培养基等。
T-m培养基是在gc基础培养基中,加入血红蛋白(1%)、抗生素(万古霉素3μg/ml、粘菌素
7.5μg/ml和制霉菌素12.5μg/ml)和淋球菌增菌剂,使绝大多数杂菌被抑制而淋球菌菌落长得较大,在乎皿中几乎呈纯培养,从而大大提高了由子宫颈、尿道,尤其是咽和直肠部位分离出淋菌的阳性率。
3.培养条件
淋球菌对外环境变化颇为敏感,对寒冷和干燥抵抗力很弱。
因此,为了保证培养有足够的成功率,取材后应立即接种,标本离体时间越短越好。
取材处离实验室距离较远时,应将标本接种于smart或Amies运送培养基或1%葡萄糖肉浸液中,并注意在运送过程中保温。
接种的血平皿应先放在37℃温箱中预温。
培养的最适温度为35℃~36℃,超过38.5℃或低于30℃便生长不良。
因此,孵育的温度要恒定。
淋球菌为需氧菌,但最初从人体分离时,为促进生长,需用5%二氧化碳环境培养。
为保持一定的湿度,可在培养缸中放些浸水棉球。
【结果】
淋球菌在血平皿上经24h~48h的培养后,可形成圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色菌落。
边缘呈花瓣状,直径为0.5mm~1.0mm。
用白金耳触之有粘性。
如继续培养,菌落面积增大,表面变得粗糙,边缘出现皱缩。
若从菌落上取材作涂片,可见到菌的大小及染色的深度有差异,排列也不一致,约有25%的菌为典型的双球菌,其他75%为单球菌、四联形或八叠形。
淋球菌在液体培养基中生长于液体表面,或稍有轻度混浊和颗粒沉淀。
【注意事项】
1.培养要获得成功,取材是关键之一。
取材的深度一定要够,因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。
男性尿道前端包括舟状窝都为复层鳞状上皮覆盖,所以要深人到尿道内2cm~4cm处,并蘸取少量粘膜,阳性率才高。
女性病人取材时,要求将棉拭插入宫颈管,转动并停留10s~30s也是这个道理。
有些人只在阴道口取少量分泌物作分离培养,阳性率当然会降低,因为有生活力的菌从宫颈随分泌物由阴道流出需一定时间,阴道内ph值低,又因各种杂菌的作用,到阴道口时淋菌的生活力较低,再加(:
性病实验室规章制度)上培养过程中各种因素的影响,培养成功的机会就会减少。
2.对症状不典型的男病人取材,最好是在晨起排尿前或排尿后2~3h之后。
另外,
篇二:
性病实验室sop
东莞市高埗医院作业指导书第1页共1页
第1版第0次修改主题:
性病实验室质量控制制度颁布日期:
20XX年11月
性病实验室质量控制制度
1目的
规范性病实验室质量控制制度,保证实验室安全、顺利进行。
2适用范围
适用于性病实验室试剂、仪器、操作过程的质量控制。
3职责
检验科性病实验室技术人员负责实验室质量控制与记录。
4性病实验室质量控制制度
4.1对实验室仪器:
水浴箱,冰箱,高压锅,显微镜进行功能监测。
4.2做好对培养基的配制,外观检查,灭菌试验,培养基的功能检测及保存工作。
4.3做好染色液,血清学诊断试剂的质量控制。
4.4做好标本的管理,检测的记录,结果的存档,报告的完整性的质量工作。
4.5每批检测阴阳性对照与标本一起检测。
4.6若有超控现象一定要做失控分析,处理意见。
4.7并做好质控原始记录。
东莞市高埗医院作业指导书第1页共2页
第1版第0次修改主题:
LDZ5-2离心机颁布日期:
20XX年11月
LDZ5-2离心机
1目的
规范LDZ5-2离心机的正确操作。
2适用范围
适用于检验科人员对LDZ5-2离心机的使用。
3职责
检验科性病实验室技术人员负责LDZ5-2离心机的维护与保养。
4工作原理
根据离心力的作用原理,密度大的成份向下沉,以至液体成份与固体成份达到分离的目的。
5使用方法
5.1三眼安全插座,使用前应接地线。
工作时应放置在平整而坚实的台面上。
5.2电源开关,指示灯亮,电源即接通。
5.3打开盖板,选择合适的离心护管将试管小心放置在护管内。
5.4合上盖板。
5.5先调节转速开关至所需转速,后调定时器至所需时间。
5.6开启启动开关离心机开始工作。
5.7工作一这定时间后,离心机自动停止工作,盘停止旋转之后,方可打开盖板,取出试管。
5.8本机使用完毕后,须关闭电源开关,熄灭指示灯。
将本机放于干燥,通风处,并保持其清洁。
6注意事项
6.1对称的离心护管内要放同样重量有试管,以免重量偏太大而产生严重晃动。
6.2一定要等到转盘完全停止转动,才能打开盖板。
7相关性文件
《LDZ5-2离心机使用说明书》
东莞市高埗医院作业指导书第1页共1页
第1版第0次修改主题:
pYx—Dhs-4000恒温培养箱颁布日期:
20XX年11月
pYx—Dhs-4000隔水式恒温培养箱
1目的
规范pYx—Dhs-4000隔水式恒温培养箱的操作。
2适用范围
适用于检验科人员对pYx—Dhs-4000隔水式恒温培养箱的使用。
3职责
检验科性病实验室技术人员负责pYx—Dhs-4000隔水式恒温培养箱的维护与保养。
4操作方法
4.1在恒温培养箱后面右侧孔加水至左侧浮起止水标志。
4.2把电源开关拨至“开”处,此时电源指示灯亮,调节温度,直到温度在35℃,批示灯灭,控制进入恒温状态。
可以使用。
5注意事项
5.1每次注水要用蒸馏水。
5.2每日保持箱内的干净,做好箱面的清洁工作。
5.3培养箱外壳必须有效接地,以保证使用安全。
5.4水位降低应及时加水。
5.5箱内物品切勿过挤,必须留出空间。
5.6开门操作完成后要及时关上门,保证箱内温度流失。
6相关性文件
《pYx—Dhs-4000隔水式恒温培养箱使用说明书》
东莞市高埗医院作业指导书第1页共1页
第1版第0次修改主题:
TL-2000c型自动旋转振荡仪颁布日期:
20XX年11月
TL-2000c型自动旋转振荡仪
1目的
规范TL-2000c型自动旋转振荡仪的操作。
2适用范围
适用于检验科人员对TL-2000c型自动旋转振荡仪的使用。
3职责
检验科性病实验室技术人员负责TL-2000c型自动旋转振荡仪的维护与保养。
4工作原理
利用稳定的旋转速度,使试剂与标本得到充分的混合作用。
5操作步骤
5.1打开后面电源开关;5.2选择“V1”或“V2”,V1:
慢速,V2:
快速;5.3放好需旋转混合的标本混合液在旋转盘上;5.4调节定时器到所需时间;
5.5调节所需的旋转速度;
5.6旋转时间到终点,仪器会自动停止;5.7及时观察结果。
6注意事项
6.1每日保持仪器清洁。
6.2调好的常用转速最好不要随便改动。
6.3时间停止后,及时观察结果,避免结果难以判断。
7相关性文件
《TL-2000c型自动旋转振荡仪使用说明书》
篇三:
20XX年性病实验室质量管理工作计划
20XX年四川省性病实验室质量管理工作计划
根据新的《性病防治管理办法》、《中国预防与控制梅毒规划(20XX-2020年)》和“20XX年全国性病防治工作要点”(征求意见稿),结合我省性病实验室质量管理具体情况,20XX年计划完成以下工作。
一、制定“四川省性病实验室质量管理办法”意见稿,并组织讨论。
二、20XX年9月15日前申报四川省性病中心实验室,并申请验收。
三、组织省内国家级性病监测单位参加中国疾病预防控制中心性病控制中心的性病实验室检测能力验证,参与率及合格率在去年基础上有所提高。
四、对省内328家医疗机构(或疾控单位)进行梅毒检测能力验证,拟定梅毒血清质控品组成,遴选质控品并委托省医院按程序采购,发放质控品。
五、举办一期省内国家级性病监测单位实验室人员培训班。
六、举办二期参加省内梅毒检测能力验证单位实验室人员培训班及总结会。
七、针对省内国家级性病监测单位开展一次性病实验室的现场考察和督导。
八、完成100株以上淋球菌临床分离株的淋球菌耐药监测检测。
九、组织或参加一种新的性病检测试剂的评估。
- 配套讲稿:
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