果蝇的性状、生活史观察及饲养.ppt
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果蝇的性状、生活史观察及饲养.ppt
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,实验十二、果蝇的性状、生活史观察及饲养(3学时),一、实验目的1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点;2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征;3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。
二、实验材料、用具及试剂果蝇:
野生型,白眼黑身,白眼小翅,红眼残翅,黑檀体。
双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、新毛笔、乙醚、酒精,三、实验内容1.果蝇的生活史果蝇(Drosophilamelanogaster2n=8)中文名:
黑腹果蝇果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属,与家蝇是不同的种。
果蝇的优点:
1、生活史短,20-25条件下完成一个世代需12-15天。
2、繁殖率高,一对果蝇可产卵400-500只。
3、饲养方便。
4、突变率高。
5、形态容易辨认。
果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。
30以上的温度能使果蝇不育和死亡,低温则使它的生活周期延长,同时生活力也降低,果蝇培养的最适温度为20-25。
从表中可以看出,25时,从卵到成虫约10天;在25时成虫约活15天。
生活史:
完全变态:
最适温度:
20-25生活史周期:
12-15day(20-25)10day(26)57day(10)羽化后:
8-12h交配两天后产卵成虫存活:
15day(25),卵:
羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配,两天后才能产卵。
卵长0.5mm,为椭圆形,腹面稍扁平,被绒毛膜,在背面的前端伸出一对触丝(filament),它能使卵附着在食物(或瓶壁)上,不致深陷到食物中去。
三龄幼虫4.5mm,在培养基上作沟穿孔。
幼虫:
从卵孵化出来后,经过两次蜕皮,发育成三龄幼虫,此时体长可达4-5mm。
肉眼可见其前端稍尖部分为头部,上有一黑色斑点即为口器。
口器后面有一对透明的唾液腺,透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧,精巢较大,外观上是一明显的黑点,而卵巢则较小,可以此作为鉴别。
幼虫活动力强而贪食,它们在培养基上爬行时,留下很多条沟,沟多而且宽时,表明幼虫生长良好。
蛹:
幼虫生活7-8天准备化蛹,化蛹前从培养基上爬出,附着在瓶壁上,逐渐形成一梭形的蛹。
在蛹前部有两个呼吸孔,后部有尾芽,起初蛹壳颜色淡黄而柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,表明即将羽化了。
成虫:
幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化,最后从蛹壳前端爬出。
刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长,翅膀尚未展开,体表尚未完全几丁质化,故呈半透明的乳白色。
透过腹部体壁,可以看到黑色的消化系统。
不久,变为短粗圆形,双翅展开,体色加深。
如野生型初为浅灰色,然后呈灰褐色。
果蝇的寄生虫螨虫,2.形态构造头部:
有一对复眼,三个单眼和一对触角。
胸部:
有三对足,一对翅和一对平衡棒。
腹部:
背面有黑色环纹,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身有许多体毛和刚毛。
3.成虫雌雄的鉴别,4.果蝇常见的几种突变类型,5.果蝇的性别决定1)染色体组成果蝇为二倍体2n=8,核内有丝分裂:
不涉及细胞分裂和核分裂的染色体分裂方式。
体联会:
一些特殊的体细胞中(如果蝇唾腺细胞)的染色体经多次复制却不分开,依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。
染色体组:
来自二倍体生物的正常配子的所有染色体。
连锁群:
来自配子中的每条染色体及其携带的基因。
2)果蝇的性别决定果蝇的性别决定为XY型,Y染色体在性别决定上不起作用,只与育性有关。
含有Y染色体,可产生正常的配子,不含Y染色体,则配子不育。
性别决定与性比值(性指数)有关。
X/A=1则为雌性;X/A=0.5则为雄性。
X/A1,为超雌;X/A0.5,则为超雄;0.5X/A1则为中间性。
雌雄基因平衡理论:
果蝇X染色体上有很多雌性基因,常染色体上有很多雄性基因,Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因,因此性别决定于基因的平衡。
3)果蝇的连锁群X染色体上有141个基因;第2染色体上有228个基因;第3染色体上有156个基因;第4染色体上有12个基因。
4)同源染色体:
来源相同、结构相似、控制的性状相同,在减数分裂中配对的一对染色体。
四、实验步骤1.果蝇的饲养1)培养基的配制果蝇以酵母菌为食,常采用发酵的培养基繁殖酵母菌来饲养果蝇。
培养基常用玉米粉、米粉或香蕉配制,本实验采用玉米培养基,其配方如下:
果蝇培养基成份(100ml),配制方法,玉米粉,配制时先将水分成两份:
一份用于溶解琼脂和糖,另一份煮玉米粉,待两份分别溶解煮好后再合到一起煮沸,关掉火后再加入丙酸,这时的培养基很粘稠,要充分,搅拌后再分装培养瓶。
待培养基冷却后,在培养基的表面洒上一层酵母粉,插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。
注:
分装前将饲养瓶、棉塞、吸水纸及其它用具和器皿高压蒸气灭菌(15磅,15min)。
分装时若瓶口较小,用大漏斗将饲料倒入,勿使饲料粘附瓶壁。
若无干酵母粉,可于饲料分装后滴几滴酵母液于饲料表面。
待饲料冷却后,用酒精棉球或吸水纸将瓶壁上的水汽擦净,塞上棉塞。
培养瓶的灭菌,准备灭菌的培养瓶,准备灭菌的棉塞,准备灭菌的滤纸,包好的棉塞,灭菌锅,12120min,配制好的培养基,2)果蝇继代培养,将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。
转移时要注意转移的手法,不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞出。
一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶,使其飞入带有新培养基的培养瓶,准备转移果蝇的亲本及培养基,果蝇的转移,幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。
2果蝇性状的观察1)果蝇的麻醉处理在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中,应先将果蝇麻醉,使其保持安静状态。
麻醉方法如下:
(1)准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶,并配以脱脂棉塞。
(2)去掉培养瓶棉塞,立即与麻醉瓶口相对,培养瓶在上,一手稳住两瓶,另一手轻轻震拍培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶中。
(3)滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内,迅速将两瓶塞住,约30s,麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。
注意不能麻醉过度。
若蝇翅与蝇体呈45角翘起,表明麻醉过度,不能复苏而死亡。
(4)将麻醉后的果蝇放在白瓷板或白纸板上,用毛笔刷移动检查,根据需要用肉眼、放大镜或解剖镜观察。
不再用的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死,防止品系间混杂。
转移到麻醉瓶中观察结果,麻醉时转移果蝇手法,果蝇的麻醉,滴加乙醚的方法,果蝇的麻醉剂,死亡果蝇的标志,死亡果蝇的标志,2)果蝇识别,果蝇识别,果蝇识别,果蝇识别,果蝇识别,果蝇识别,3)突变性状的观察,果蝇性状观察,3、眼睛的颜色,2、翅的大小,1、身体的颜色,残翅,野生型,小翅,黑檀体,白眼,红眼残翅,白眼小翅,白眼小翅,白眼小翅,黑身白眼,白眼wX染色体,白眼w,小翅m,X染色体,白眼w、小翅m、焦刚毛sn(刚毛卷曲如烧焦状)(全在X染色体),刚毛形态,刚毛形态,黑檀体Ebony(e)黑体(b),观察后的结果填入下表,性状、染色体和基因型,红眼(+)白眼(w),第一连锁群,长翅(+)残翅(vg),第二连锁群,灰身(+)黑檀体(e),第二连锁群,第三连锁群,长翅(+)小翅(m),第一连锁群,直刚毛(+)卷刚毛(sn),第一连锁群,灰身(+)黑体(b),第二连锁群,注意事项,1、配制培养基时要将玉米粉及琼脂和绵白糖要分开煮。
2、转移果蝇时要防止果蝇飞走。
3、麻醉果蝇时要掌握麻醉尺度,需要用活体时,不可以麻醉过度使果蝇致死。
实验后不用的果蝇要及时处死,不可放飞。
思考题,1、绘制雄性果蝇性梳图。
2、如何区分果蝇的性别?
3、简述果蝇被麻醉死亡后的状态。
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- 果蝇 性状 生活史 观察 饲养