全程CRP临床应用.ppt
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全程CRP临床应用.ppt
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全程C-反应蛋白的检测及临床应用,乌鲁木齐温泉康复医院郝万鹏,一、特点二、定义三、CRP的发现及结构四、CRP的生理作用五、常规CRP、hsCRP、全程CRP的区别六、检测方法七、健康人CRP浓度正常参考范围八、CRP检测的临床意义九、全程CRP的应用建议十、全程CRP的应用小结,全程CRP(hsCRP+常规CRP),一、特点,全程CRP检测项目,包括:
超敏CRP和常规CRP检测,检测线性范围:
0.5-200mg/L,一次检测同时出具超敏CRP和常规CRP两个检测结果,增加了CRP的临床运用价值。
二、定义,CRP是一种急性相蛋白,健康人血清中浓度很低,当人体受了微生物等多种因子侵袭后,人体的血清在几小时后很快产生一种急性期反应蛋白,这种蛋白以与肺炎球菌C多糖体超反应。
CRP由肝细胞合成,在人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中均可测出。
三、C-反应蛋白(CRP)的发现与结构,1930年由Tillet和Francis发现一种能在Ca2+存在时与肺炎链球菌的荚膜C多糖结合的蛋白质1941年,Avery等先后证实这是一种急性感染时出现的蛋白质(病情恢复后/健康人血清中没有这种物质)结构对称的盘状五聚体,归于五聚素家族由5个完全相同的非糖基化单体以非共价键联接形成每个单体每个含206个氨基酸残基(相对分子质量23017),C反应蛋白(c-reactiveprotein,CRP),C-反应蛋白(CRP)的生成,由肝细胞在IL6、IL2、TNF刺激下合成,炎症局部巨噬细胞也可少量产生。
正常合成率1-10mg/d,急性炎症时每天合成1g。
半衰期19h,不耐热,6530min破坏,沉淀系数615715S,等电点4182。
不能通过胎盘,在体内分布甚广,除血液外,胸水、腹水、心包液、关节液中均可测出。
四、C-反应蛋白(CRP)的生理作用,引发对侵入细胞的免疫调节和吞噬作用,与配体结合,激活补体,调理吞噬功能,促使内源性或外源性配体物质(载有配体的病理物质或病原体)的清除,表现为炎症反应在Ca2+存在下与磷酸胆碱、DNA、组蛋白等结合与凋亡坏死细胞膜脂质双层结构破坏时暴露的磷脂或外部侵入的细菌、真菌、寄生虫的细胞壁磷酸胆碱结合,C-反应蛋白(CRP)是急性时相反应蛋白,CRP升高见于急性和慢性炎症(如伴有细菌感染)、组织损伤(心梗、手术创伤、烧伤、放射线损伤等)、恶性肿瘤、风湿性疾病等疾病后68h开始升高,2448h达到高峰比正常值高1001000倍,升高幅度与感染的程度呈正相关病变好转时其含量急速下降,1周内可恢复正常(T1/2约19h),此反应不受放疗、化疗、皮质激素治疗影响时相性+灵敏性,NEnglJMed1999;340:
448-454.,血清淀粉样蛋白A,结合珠蛋白,纤维蛋白原,转铁蛋白,白蛋白,五、常规CRP、hsCRP、全程CRP的区别,六、检测方法,方法灵敏度参考献试管内沉淀试验-JExpMed1930;52561毛细管内沉淀试验1020mg/LAmJMed1950;8445改良平板双扩散法1020mg/LIntArchAllergy1962改良琼脂柱扩散法3.0mg/LProcSocExpBiol1955改良单扩散法1.0mg/LActaPatholMicrobiolScand琼脂糖凝胶电泳法1.0mg/LClinChimActa1969放射电免疫扩散法10g/LJClinLabInvest1973补体结合试验0.6mg/LProcSocExpBiol1954胶乳凝集试验1.0mg/LNature(London)1961高敏乳胶增强浊度0.35mg/mlDadeGermany2000荧光抗体法Nature(London)1961放射免疫测定法3g/LJLabClinMed1976,CRP定量检测C方法学线性分析,序号检测方法线性范围mg/L线性范围有效倍数检测项目1免疫荧光0.5-200400倍全程CRP2免疫比浊8-16020倍常规CRP3金标8-250或5-15032倍常规CRP4紫外分光光度0.5-5或5-5010倍常规CRP或超敏CRP5动态散射比浊0.08-3.4或5-23046倍常规CRP或超敏CRP,i-CHROMATM全程CRP检测原理,i-CHROMATM全程CRP检测使用的是免疫荧光,双抗体夹心法,将血液样本和检测缓冲液充分混匀,缓冲液中荧光标记的抗CRP抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原抗体复合物。
当混合样本加入到检测板的加样孔后,该复合物被固相在检测板上的抗CRP抗体所捕获。
荧光信号强度反映了被捕获的CRP数量。
i-CHROMATM全程CRP默认是以mg/L为单位,全程CRP检测步骤,检查并插入ID芯片确定检测板和ID芯片相匹配从冰箱中取出检测缓冲液,放置10分钟使其平衡至室温吸取15ul全血(10ul血清,血浆或质控品,EDTA抗凝)放入到有检测缓冲液的管子中,充分混匀。
取75ul样本混合液加入检测板的加样孔中,在室温下反应3分钟将检测板放在i-CHROMATM免疫荧光分析仪的检测板承载器中确保检测板方向正确并将其完全推入,按“选择”键,仪器开始自动扫描。
13秒内屏幕上即可读取结果或直接打印结果或通过LIS系统输出数据。
七、健康人CRP浓度正常参考范围,(A)FrequencydistributionofCRPconcentrationsinserafrom100healthyadults.(B)SerumCRPconcentrationinmonthlysamplesover10monthsin10healthysubjects.,Wilkins,J.etal.ClinicalChemistry.1998;44:
1358-1361.,正常情况下,CRP浓度很低儿童和成人10mg/L新生儿(16月)2mg/L成人3mg/L即表示存在潜在心血管炎症CRP一定要使用高敏感的检测方法(hsCRP)常规CRP:
8160mgLhsCRP:
0.58mg全程CRP:
0.5200mg=hsCRP+常规CRP三者检测血中相同的物质,全程CRP浓度的解释,八、CRP检测的临床意义,监测病情监控感染(术后、产后)鉴别细菌或病毒感染(首选指标)抗生素疗效观察,指导和监测治疗心血管病的风险评估和指导治疗,全程CRP用于评估疾病活动性和疗效监控,CRP的水平和持续时间与感染的存在及程度正相关CRP值越高说明炎性反应越明显,病情越重,预后越差CRP持续升高或再度升高提示临床应重视病情的变化,全程CRP用于感染的鉴别诊断(细菌性与非细菌性),当机体被细菌感染时,血清中CRP浓度明显升高,升高的幅度与细菌感染的程度呈正相关当被病毒感染时,CRP增高不明显,血清浓度正常或轻度升高这为疾病早期感染类型的鉴别提供了极其重要的依据,从而判定是否进行抗生素治疗,出生5天后,全程CRP与感染程度正相关,P0.01,各种菌性感染患者组hsCRP检测值均显著高于对照组细菌性感染患者组:
148例,男81例,女67例,年龄1个月至4岁,平均1.2岁对照组:
55例体检的健康儿童,男31例,女24例,年龄26(平均2.9)岁,现代诊断与治疗,2009,20(5):
268270.,45,33,29,11,8,N55,全程CRP用于感染监控组织损伤、手术、器官移植等,外科损伤患者血中CRP水平810h可增加10倍,手术后24h达到高峰;当机体受到强烈刺激后,在细菌感染特别是化脓性感染时,CRP明显升高若无并发症,术后57恢复正常如术后57天CRP仍持续高水平,甚至增高,应怀疑吻合口漏或合并感染,并配合治疗作随访监测作动态观察,2天后较快下降者,可基本肯定愈合良好CRP可作为一项特异感染和手术后并发症的诊断指标,用于早期诊断、外科手术指征及疾病预后的监测对中、大手术患者,在术前和术后37天各作常规检测一次。
手术病人的CRP值,医院感染分类I,医院感染分类II,CRP比WBC在诊断细菌感染能力方面要高,ROCforvariablesassociatedwithbacterialinfection与细菌感染相关指标的ROC曲线,CRP比WBC、GRA在诊断细菌感染能力方面要高,单小鸥,何时军,钱彩,等.C反应蛋白在预测细菌感染中的作用.中华急诊医学杂志,2007,16(3):
295298,常用感染指标的比较细菌或病毒感染鉴别的特异性、灵敏性:
CRPWBCESR,*林晓.小儿感染性疾病血清crp测定的意义.中国实验诊断学,2005,1:
78.,CRP用于观察抗生素治疗效果优于WBC、ESR,TurkJPediatr2003;45:
311-314.,24.2%,50.0%,28.8%,抗生素治疗有效时,CRP比WBC下降更快、幅度更大,hsCRP用于心血管疾病的治疗监测,TLC36个月后,复查达标则6个月1年复查持续达标,每年复查一次药物治疗后48周复查达标则6个月1年复查未达标则调整剂量或药物种类或联合治疗,再经48周后复查达标则6个月1年复查,中国成人血脂异常防治指南2007,九、全程CRP的应用建议中华医学会风湿病学分会:
类风湿关节炎诊断及治疗指南(2010年版),2009年美国风湿病学会(ACR)和欧洲抗风湿病联盟(EULAR)提出了新的RA分类标准和评分系统。
该标准对关节受累情况、血清学指标、滑膜炎持续时间和急性时相反应物4个部分进行评分,总得分6分以上可诊断RA。
抗环瓜氨酸多肽(CCP),手足口病诊疗指南(卫生部2010年版),手足口病是由肠道病毒(以柯萨奇A组16型(CoxA16)、肠道病毒71型(EV71)多见)引起的急性传染病,多发生于学龄前儿童,尤以3岁以下年龄组发病率最高。
病人和隐性感染者均为传染源,主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。
主要症状表现为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹。
少数病例可出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎、肺水肿、循环障碍等,多由EV71感染引起,致死原因主要为脑干脑炎及神经源性肺水肿。
潜伏期:
多为2-10天,平均3-5天。
实验室检查血常规白细胞计数正常或降低,病情危重者白细胞计数可明显升高。
血生化检查部分病例可有轻度谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)升高,病情危重者可有肌钙蛋白(cTnI)、血糖升高。
C反应蛋白(CRP)一般不升高。
乳酸水平升高。
中华医学会临床流行病学分会、儿科学分会中国0至5岁儿童病因不明的急性发热诊断处理指南(2008年版),发热为儿童最常见的症状之一,也是最常见的急诊和住院原因。
1周的发热为急性发热,应用建议妇产科,盆腔炎和子宫附件炎.CRP值升高盆腔肿块和子宫肌瘤通常多为阴性诊断胎膜早破宫内感染胎膜早破时,如母亲CRP在产前6-19h超过50mg/L可作为出现AIS的标准产后第一天出现的AIS的CRP将比正常分娩时高出2-3倍腺原位癌AIS(adenocarcinomainsitu,AIS)标准细胞排列为片状、条状或菊形团样,其核拥挤重叠。
成片细胞由于核浆比增加,胞浆减少和胞浆边界不清而失去蜂窝状结构。
呈栅栏状排列的细胞核向细胞团周围伸出。
外观似鸡毛弹样,或羽毛状。
细胞核增大、拉长并形成层状结构在多数病例可见。
细胞核形状和大小可能不一致。
胞核深染,染色质颗粒细到中等颗粒状。
核仁小或不明显。
核分裂也可能找到。
应用建议感染性疾病,在急性感染性疾病中:
一般共性是发热细菌性感染:
一般大于20mg/L,严重感染50mg/L,尤其G阴性菌感染更高病毒性感染:
一般小于20mg/L支原体感染:
小于30mg/L肺炎CRP100mg/L,强烈提示细菌感染,如化脓性支气管炎或肺炎典型的病毒性肺炎不会超过50mg/L泌尿系统:
CRP在区分一般的下尿路感染及较严重的上尿路感染时,是一个可靠的指标当CRP100140/,提示存在细菌性肾盂肾炎急性阑尾炎:
CRP与WBC均正常者则基本可排除急性阑尾炎(避免泌尿系统结石,泌尿系统感染,卵巢囊肿或蒂扭转,肠梗阻阑尾无炎症的患者被误诊为急性阑尾炎而行切除术者)WBC升高是炎性阑尾的早期现象(单纯性和化脓性阑尾炎)CRP升高多见于炎症扩展期如坏疽穿孔性、周围脓肿性阑尾炎,此时白细胞并不一定升高,hsCRP在心血管疾病中的应用建议,hsCRP是心血管炎症病变的生物标志物,在目前确认出的炎性标志中最宜用于临床hsCRP是心血管炎症病变的强有力的、独立的预测指标hsCRP是比TC、LDL-C、HDL-C等传统危险因素更有效的独立的心血管疾病预测指标,可以预测LDL-C130mg/L患者的危险hsCRP可以增加LDL-C、代谢综合征和Framingham危险评分对心血管事件的预后价值稳定性冠心病或ACS病人,hsCRP测定可能有作为独立预后标志,预告复发事件,包括死亡、MI以及PCI后再狭窄,Circulation2003;107;499-511;中华检验医学杂志,2006,29(9);774778.,hsCRP用于心血管疾病危险性评估,1mg/L,3mg/L,10mg/L,100mg/L,1.0低5%,1.03.0中5%10%,3.010.0高10%15%,10.0可能存在其他炎症应再测,并应查找感染或炎症来源检查非心血管原因,hsCRP用于心血管疾病危险性评估由于健康人体内的CRP水平通常3mg/L,因此筛查一定要使用高敏感的检测方法(hsCRP),急性左心衰竭的实验室辅助检查心电图:
胸部X线检查:
超声心动图:
动脉血气分析:
常规实验室检查:
包括血常规和血生化检查,如电解质(钠、钾、氯等)、肝功能、血糖、白蛋白及高敏C反应蛋白(hs-CRP)。
研究表明,hs-CRP对评价急性心衰患者的严重程度和预后有一定的价值。
心衰标志物:
N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)心衰的诊断和鉴别诊断心衰的危险分层:
评估心衰的预后:
临床过程中这一标志物持续走高,提示预后不良心肌坏死标志物:
cTnI、CK-MB、肌红蛋白Myo,十、全程CRP的应用小结:
CRP是灵敏的急性时相反应蛋白(炎症标志物)CRP被认为是鉴别细菌感染与非细菌感染的一个首选指标CRP比WBC在诊断细菌感染能力方面要高,较外周血WBC作为炎性反应的标志更为可靠急性感染性疾病:
临床上常见于肺炎、支气管炎、咽喉炎、细菌性脑膜炎、伤寒、化脓性关节炎、尿路感染、骨盆炎、阑尾炎等等在鉴别细菌或病毒感染方面,CRP比白细胞计数及分类计数更准确,特别是老年人,免疫系统反应顺应性下降,可能有感染发生但临床上并无发热、白细胞升高等情况,此时检测CRP有助于检出细菌感染。
CRP、WBC的联合检测或CRP连续检测能提高诊断的准确性,hsCRP值是评估疾病活动性的独立指标hsCRP的高低与感染的存在及程度正相关,hsCRP值越高说明炎性反应越明显,病情越重,预后越差术后57CRP未恢复正常,应怀疑吻合口漏或合并感染,并配合治疗作随访监测产后CRP不降反而升高、始终保持高水平、CRP浓度下降过程中突然升高,应怀疑产褥感染存在,进行一系列抗感染临床治疗对于烧伤病人,可检测CRP以警示是否发生败血症,以便及时应对治疗对中、大手术患者,在术前和术后37天各作常规检测一次,hsCRP是评价抗生素治疗效果的独立指标根据hsCRP水平的变化来决定抗炎药物的剂量对抗菌治疗有良好反应的患者,其hsCRP值下降迅速(24h50%);hsCRP值连续缓慢下降且D440%提示患者预后良好在hsCRP下降至正常时,中断抗菌素治疗对抗生素治疗患者,在治疗前和治疗后24h、治疗结束前各作常规检测一次(严重感染患者在第4天也检测一次),小结:
CRP与疾病的活动性及检测的临床意义,检验医学与临床,2010,7
(2):
193194,报告结束谢谢大家,
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