章实验室生物安全.ppt
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24231第七章微生物实验室生物安全第七章微生物实验室生物安全LaboratoryBiosafety实验室生物安全事件实验室生物安全事件2003年以,新加坡、台和北京相来湾继生室人发实验员SARS病毒感染播事件传。
SARS重临,北京和安徽在不到4天内,确诊或疑似病例9例,其中1人死亡,另有千人隔离,源头直指26岁的免疫学系研究生宋某。
这位高材生,上月被选往位于北京的中国疾病预防控制中心(简称疾控中心)的病毒所实习。
不料这所国家级、有世卫组织认可的高风险病毒中心却设备陈旧,连本来在无SARS的低危区工作的宋某也染上SARS,并传给自己父母、同事和照顾她的护士。
其中,她的母亲病死。
实验室生物安全事件实验室生物安全事件史上,立克次体的命名。
历实验室生物安全事件实验室生物安全事件布氏杆菌引起的实验室感染(北京,杭州)肾病综合症出血热的实验室感染世界范围内共有126例感染。
(自1985年)中国数次感染,导致曾经一段时间的实验动物荒。
实验室感染概况实验室感染概况80%是不明原因的感染。
20%感染的原因是明确的。
80%是由工作人员操作失误引起的;20%是由设备故障引起的。
导致感染最多的4种实验室事故溢出和泼洒针头和注射器锐器、碎玻璃动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤生物安全的概念生物安全的概念生物安全:
在处理具有生物危害物质的过程中,为避免自身或他人的感染以及对环境的污染,所采取的各种措施。
生物安全涉及到多科和域:
防、个学领预医学境保、植物保、野生物保、生、环护护动护态、林等。
农药业实验室生物安全的概念实验室生物安全的概念实验室生物安全主要考虑:
通过在实验室设计建造、使用个体防护设施、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施,确保实验室工作人员不受实验对象的感染,确保周围环境不受实验对象的污染。
第一节微生物实验室生物安全水平感染性微生物的危险度等级分类BSC:
生物安全柜;GMT:
微生物学操作技术规范。
BSL-4BSL-3BSL-2BSL-1生物安全水平分级生物安全水平分级根据生物因子危害程度和采取的防护措施,将生物安全防护水平(biosafetylevel,BSL)分为4级(BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示);动物实验室以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示。
一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物;二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物;三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素;四级适用于对人体具有高度的危险性,通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室BSL-1实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。
E.coliBSL-1BSL-1实验室实验室1)普通建筑物,防节肢动物和啮齿动物。
2)每个实验室设洗手池,宜靠近出口处。
3)实验室门口设挂衣装置,个人便装与工作服分开。
4)实验室各表面平整、易清洁、不渗水、耐腐蚀。
5)实验台面防水,耐腐蚀、耐热。
6)橱柜和实验台牢固,保持一定距离以便于清洁。
7)如有可开启的窗户,应设置纱窗。
8)保证工作照明,避免不必要的反光和强光。
9)有适当的消毒设备。
典型的一级生物安全水平实验室典型的一级生物安全水平实验室不需要特殊的一级和二级屏障、除需要洗手池外,依靠标准的微生物操作即可获得基本的防护水平。
二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室BSL-2实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。
hepatitisA,B,andC,influenzaA,Lymedisease,denguefever,Salmonella,mumps,Bacillussubtilis,measles,MRSA,VRSABSL-2BSL-2实验室实验室1)满足BSL-1的要求。
2)实验室门带锁并可自动关闭,门应有可视窗。
3)应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。
在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。
4)在实验室内使用专门的工作服,戴乳胶手套。
5)在实验室工作区域外有存放个人衣物的条件。
BSL-2BSL-2实验室实验室6)建筑内应配备高蒸汽菌器压灭。
7)在实验室内配备生物安全柜。
8)设洗眼设施,必要时应有应急喷淋装置。
9)通风,如使用窗户自然通风应有防虫纱窗。
10)有可靠的电力和应急照明,必要时设备用电源。
11)实验室出口有在黑暗中可明确辨认的标识。
BSL-2BSL-2实验室实验室在处理危险度2级或更高危险度级别的微生物时,在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。
典型的二级生物典型的二级生物安全水平实验室安全水平实验室三级生物安全防护实验室三级生物安全防护实验室BSL-3实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗。
Anthrax(炭疽杆菌);WestNilevirus(西尼罗河病毒);Easternequineencephalitis(东方马脑炎病毒);SARS;tuberculosis(结核杆菌);RockyMountainspottedfever(落基山斑点热);yellowfever.BSL-3BSL-3实验室实验室在建筑物中自成隔离区或为独立建筑物。
由清洁区、半污染区和污染区组成。
污染区和半污染区之间应设缓冲间。
污染区与半污染区之间、半污染区和清洁区之间应设置传递窗。
我国的第一个P3实验室建于1987年,当时主要用于艾滋病研究。
BSL-3BSL-3实验室实验室围护结构实验室内表面应光滑、耐腐蚀、防水;所有缝隙应可靠密封,防震、防火。
围护结构外围墙体应有适当的抗震和防火能力。
天花板、地板、墙间交角均为圆弧圆弧形且可靠密封。
不应有可开窗户;内设窗户应防破碎、防漏气。
出入口处应采用防止节肢动物和啮齿动物的设计。
BSL-3BSL-3实验室实验室送排风系统独立的送排风系统以控制气流方向和压力梯度。
送风口和排风口的布置对面分布,上送下排。
送排风系统应为直排式,不得采用回风系统。
应安装风机和生物安全柜启动自动联锁装置。
BSL-3BSL-3实验室实验室环境参数相对室外大气压,污染区为-40Pa,并与生物安全柜等装置内气压保持安全合理压差。
BSL-3BSL-3实验室实验室其他其他实验室所需压力设备不应影响室内负压梯度。
实验室所需压力设备不应影响室内负压梯度。
实验室应设置通讯系统。
实验室应设置通讯系统。
实验记录等资料应通过计算机等发送至实验室外。
实验记录等资料应通过计算机等发送至实验室外。
清洁区设置淋浴装置。
清洁区设置淋浴装置。
典型的三级生物典型的三级生物安全水平实验室安全水平实验室全国仅2所P3实验室上海市公共卫生中心的P3实验室复旦大学医学院的P3实验室四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室BSL-4实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。
BolivianandArgentinehemorrhagicfevers,Marburgvirus;Ebolavirus;Lassafever;Crimean-Congohemorrhagicfever,andothervarioushemorrhagicdiseases.BSL-4BSL-4实验室实验室BSL-4实验室是指生物安全四级实验室,专门用于开展烈性传染病的研究,是全球生物安全最高级别的实验室。
P4实验室的安全措施比P3实验室更严格,研究人员入内不仅要穿全封闭的防护服,还要携带氧气瓶。
中科院武汉病毒所P4实验室2015年建成。
2015年1月31日,我国首个BSL-4实验室中国科学院武汉国家生物安全实验室(即武汉P4实验室)在湖北武汉竣工。
新落成的P4实验室位于武汉市江夏区的中科院武汉病毒所郑店园区内。
整个实验室呈悬挂式结构,共分为4层。
从下自上,底层是污水处理和生命维持系统;第二层是核心实验室;第三层是过滤器系统;二层和三层之间的夹层是管道系统;最上一层是空调系统。
第二节生物安全技术一、实验室技术样本容器样本运送与接收样本打开避免吸入或接触感染性物质二、意外事故处理潜在感染性物质溢出刺伤、切割伤、或擦伤潜在危害气溶胶释放离心杯发生破裂三、感染性废弃物处理四、感染性物质运输第三节微生物实验室常用仪器设备一、生物安全基本设备一、生物安全基本设备生物安全柜生物安全柜高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器个人防护设备个人防护设备超净工作台超净工作台生物安全柜生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护工作人员、实验室环境以及实验品,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。
其目的是保护实验过程、操作人员及环境免受危害。
通风柜和超净工作台不属于生物安全柜,不可使用在涉及微生物材料的实验或生产过程中。
生物安全柜生物安全柜BiologicalSafetyCabinets生物安全柜的要求:
颗粒经HEPA过滤去除气流有方向HEPA(HighefficiencyparticulateairFilter),高效空气过滤器,达到HEPA标准的过滤网,对于0.1um和0.3um的有效率达到99.998%,HEPA网的特点是空气可以通过,但细小的微粒却无法通过。
ClassI生物安全柜生物安全柜可开启前窗在负压下操作表面风速在0.36m/s,排出的气体经HEPA过滤保护操作人员和环境适用于要求生物安全等级1、2、3的工作适用于样品不需保护的实验工作生物安全柜ClassII生物安全柜生物安全柜所有的二级生物安全柜同一级生物安全柜一样,能够保护操作人员和实验室环境免受危害。
二级安全柜也能够保护产品样本在微生物操作过程中免受污染。
二级生物安全柜可以在一、二、三级生物安全水平的生物因子操作中使用。
ClassII生物安全柜空气流向生物安全柜的使用生物安全柜的使用操作者在移动双臂进出安全柜时,应该垂直地缓慢进出前面的开口。
级生物安全柜前面的进气格栅不能被阻挡。
放入柜内的物品应采用75%酒精来清除表面污染。
CLASSIII生物安全柜(手套柜)全封闭的、气密结构的通风柜;通过橡胶手套进行操作;柜内保持至少120Pa的负压;供气通过HEPA抽入内;外排的气流经过双层HEPA过滤或经HEPA后再经燃烧处理。
CLASS型BSC适用于BSL3、BSL4的生物实验。
生物安全柜的使用生物安全柜的使用所有物品应尽可能地放在工作台后部靠近工作台后缘的位置,并使其在操作中不会阻挡后部格栅。
可产生气溶胶的设备(例如混匀器、离心机等)应靠近安全柜的后部放置。
废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品,应该放在安全柜内的某一侧。
生物安全柜的使用生物安全柜的使用干的物品净干的物品净理想的工作台摆放理想的工作台摆放被染的域污区被染的域污区弃物托废盘弃物托废盘圾袋垃圾袋垃生物安全柜内接种针的灭菌生物安全柜内接种针的灭菌红外电热接种环灭菌器生物安全柜的使用生物安全柜的使用在每次使用前后,要清除生物安全柜内表面的污染。
工作台面和内壁要用消毒剂进行擦拭,所用的消毒剂要能够杀死安全柜里任何微生物。
在使用生物安全柜时应穿着个体防护服。
在进行一级和二级生物安全水平的操作时,可穿着普通实验服。
个体防护装备个体防护装备装备避免的危害安全性特征防护衣污染衣服背面开口罩在日常服装外鞋袜碰撞和喷溅不露脚趾护目镜碰撞和喷溅防碰撞镜侧面有护罩安全眼镜碰撞防碰撞镜片(必须有视力校正)侧面有护罩面罩碰撞和喷溅罩住整个面部发生意外时易于取下个体防护装备个体防护装备装备避免的危害安全性特征防毒面具吸入气溶胶在设计上包括一次性使用的、整个面部或一半面部空气净化的、整个面部或加罩的动力空气净化(poweredairpurifying,PAPR)的以及供气的防毒面具手套直接接触微生物得到微生物学认可的一次性乳划破胶、乙烯树脂或聚腈类材料保护手网孔结构超净工作台超净工作台正压柜流部或底部气从顶经过器后操作正面过滤从区流向工作台面,被品样染的流排出外,污气柜有循流。
没环气超台保品不受净护样污染,适用于普通实验室或1级生物安全水平中对人员和环境无保护要求的实验。
超净工作台实验设备培养箱冰箱离心机接种环
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