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ColiDOWN:
-TTCACTTCTGAGTTCGGCATG-3'
载体标签:
C-HSV,N-His,C-His,N-Thrombin,N-Nus,N-EK
载体抗性:
氨苄
备注:
载体同时含有N端及C端His标签;
含有N端Thrombin和EK蛋白酶酶切位点;
pET44a,b,c载体的差异主要是在多克隆位点.
产品目录号:
71122-3
稳定性:
瞬时表达
组成型:
组成型
病毒/非病毒:
非病毒
pET44a载体质粒图谱和多克隆位点信息
pET44a载体简介
pET44系列载体是设计用来克隆和高水平表达含有495个氨基酸的Nus标签的蛋白表达载体。
与pET-43.1系列载体相比,pET44系列载体额外编码一个N端的His蛋白纯化标签。
pET42a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。
注意:
载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。
质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat.No.69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
对pET44a载体的单链测序可以使用COLIDOWNprimer(Cat.No.70845-3).
把表达的基因插入到载体的PshAI或者SmaI限制性内切酶位点时,可以通过EK蛋白酶或者Thrombin蛋白酶将融合表达的Nus标签完全切除。
pET44a载体序列
LOCUSpET-44a(+)7311bpDNAcircularSYN
DEFINITIONpET-44a(+)
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISMothersequences;
artificialsequences;
vectors.
COMMENTThisfileiscreatedbyVectorNTI
COMMENTORIGDB|GenBank
COMMENTVNTAUTHORNAME||
COMMENTVNTOAUTHORAD1|NovagenInc.|
FEATURESLocation/Qualifiers
source1..7311
/organism="
pET-44a(+)"
/mol_type="
otherDNA"
misc_feature69..87
/label="
T7_Terminal_primer"
terminatorcomplement(141..168)
rrnB_T2_terminator"
terminatorcomplement(300..343)
rrnB_T1_terminator"
terminatorcomplement(309..466)
rrnB_terminator"
CDScomplement(549..2354)
ORFframe2"
CDS618..2132
ORFframe3"
misc_featurecomplement(681..695)
EK"
misc_featurecomplement(747..791)
S15"
CDS2325..3083
misc_featurecomplement(2325..2342)
6xHIS"
misc_featurecomplement(2363..2379)
T7_transl_en_RBS"
misc_featurecomplement(2397..2424)
lacO"
promotercomplement(2424..2442)
T7_promoter"
gene2478..2741
tet(300-563)"
/gene="
misc_featurecomplement(2530..2549)
pBRrevBam_primer"
misc_feature2824..3915
lacI"
CDS2956..3915
ORFframe1"
misc_feature4487..4678
ROP"
misc_featurecomplement(4672..4694)
pGEX_3_primer"
rep_origincomplement(5093..5712)
pBR322_origin"
promoter5799..5827
AmpR_promoter"
gene5870..6730
Ampicillin"
CDS5870..6730
ORIGIN
1atccggatatagttcctcctttcagcaaaaaacccctcaagacccgtttagaggccccaa
61ggggttatgctagttattgctcagcggatacatatttgaatgtatttagaaaaataaaca
121aaagagtttgtagaaacgcaaaaaggccatccgtcaggatggccttctgcttaatttgat
181gcctggcagtttatggcgggcgtcctgcccgccaccctccgggccgttgcttcgcaacgt
241tcaaatccgctcccggcggatttgtcctactcaggagagcgttcaccgacaaacaacaga
301taaaacgaaaggcccagtctttcgactgagcctttcgttttatttgatgcctggcagttc
361cctactctcgcatggggagaccccacactaccatcggcgctacggcgtttcacttctgag
421ttcggcatggggtcaggtgggaccaccgcgctactgccgccaggcaaattctgttttatc
481agcctaggaacgcccaacttaattaacattagtggtggtggtggtggtgctcgagatcct
541ctgggtcttcaggagcgagttctggctggcttgcacgtgtatacagctgtgcggccgcaa
601gcttcgaacgcgtatcgatggtaccgtcgacgtcctgcaggcgcgcctgtacagaattcg
661gatccacgagctcccggactcttgtcgtcgtcatcaatcgtaccagaacccgcgctgccc
721cgggggaccagaccagttggcggtggcgagtccatgtgctggcgttcaaatttcgcagca
781gcggtttctttacccgcggagtgatggtgatggtgatgaccagaaccactagtcgcttcg
841tcaccgaaccagcaaatattacgggcagccataatcagtgctccggctttttcgtcggtc
901aacccttcgatatcagccagatcatcaatgccctgttcggcgagatcttccagcgtacaa
961acgccacgggcggccagtttgaatgccaaatcacgatctaccccttcaaggttcagcaga
1021tcgtcagccggtttgttatcaccgaggctttcttcctgggcctgtgcaatggtggccagt
1081gcatttttagcacgctcgcgcagtgcttcaacggtcggctcatcaaggccttcgatttcc
1141aacagctctttcatcggcacataggccaattcttccagcgtcgagaagccttcttctacc
1201agaacagtcgcgaagtcttcgtcgatgtcgagatatttggtgaaggtgtcgatcgctgcg
1261tgcgcttccgcctgatgcttagcttgcaggtcgtcaacggtcatcacgttgagttcccaa
1321ccgctcagttgcgaagccagacgcacgttctgaccgttacggccaatcgcctgcgccaga
1381ttaccggcttcaacggcgatgtccatggtgtgtttatcttcatccaccacgatagaagca
1441acgtctgccggtgccattgcgttaatcacgaactgcgccgggttatcatcccacaggacg
1501atatcgatacgctcgccacccagttcagtagacaccgcctgaacacgcgcgccacgcata
1561cctacgcaagcacctaccggatcgatacgtttatcgttggttttcaccgcgattttcgca
1621cgagaacccggatcgcgagccgctgctttaatttcaatcacttcttcgccgatttctggc
1681acttcaatacggaacagttcgatcagcatttccggcttggaacgagtgacgaacagttgc
1741gcgccacgcgcttccgggcgaacggaatagagcacgccacgaacgcggtcgccagggcgg
1801aagttttcacgcggcagcatatcttcgcgcaggatcacggcttcagcgttgttgcccaga
1861tccagagagatgttgtcgcggtttacttttttcaccacgccggtgatgatttcaccttcg
1921tgttcacggaactgatcaaccaccatcgcacgttcggcttcacgcactttctgcacgata
1981acctgttttgccgtctgggtagtgatacggtcaaaggtaacagactcaatctgatcttca
2041acgtaatcgcccaggttcaggctttcatcttcataacgtgcggcttcaagggtgatttcc
2101ttggtcggctgggtgacttcatcaacaactaaccagcgacggaaagtgtcaaaatcaccg
2161cttttgcgatcgatctgtacgcggacgtcgatctcttgttcatattttttctttgttgct
2221gtcgccagcgcgctttccaatgcttcgaaaatcttctcgcgaggtagcgccttttcattg
2281gatacggcttcaactacagccaaaatttctttgttcatactagaatggtgatggtggtga
2341tggctgctgcccatatgtatatctccttcttaaagttaaacaaaattatttctagagggg
2401aattgttatccgctcacaattcccctatagtgagtcgtattaatttcgcgggatcgagat
2461cgatctcgatcctctacgccggacgcatcgtggccggcatcaccggcgccacaggtgcgg
2521ttgctggcgcctatatcgccgacatcaccgatggggaagatcgggctcgccacttcgggc
2581tcatgagcgcttgtttcggcgtgggtatggtggcaggccccgtggccgggggactgttgg
2641gcgccatctccttgcatgcaccattccttgcggcggcggtgctcaacggcctcaacctac
2701tactgggctgcttcctaatgcaggagtcgcataagggagagcgtcgagatcccggacacc
2761atcgaatggcgcaaaacctttcgcggtatggcatgatagcgcccggaagagagtcaattc
2821agggtggtgaatgtgaaaccagtaacgttatacgatgtcgcagagtatgccggtgtctct
2881tatcagaccgtttcccgcgtggtgaaccaggccagccacgtttctgcgaaaacgcgggaa
2941aaagtggaagcggcgatggcggagctgaattacattcccaaccgcgtggcacaacaactg
3001gcgggcaaacagtcgttgctgattggcgttgccacctccagtctggccctgcacgcgccg
3061tcgcaaattgtcgcggcgattaaatctcgcgccgatcaactgggtgccagcgtggtggtg
3121tcgatggtagaacgaagcggcgtcgaagcctgtaaagcggcggtgcacaatcttctcgcg
3181caacgcgtcagtgggctgatcattaactatccgctggatgaccaggatgccattgctgtg
3241gaagctgcctgcactaatgttccggcgttatttcttgatgtctctgaccagacacccatc
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3421cgtctggctggctggcataaatatctcactcgcaatcaaattcagccgatagcggaacgg
3481gaaggcgactggagtgccatgtccggttttcaacaaaccatgcaaatgctgaatgagggc
3541atcgttcccactgcgatgctggttgccaacgatcagatggcgctgggcgcaatgcgcgcc
3601attaccgagtccgggctgcgcgttggtgcggacatctcggtagtgggatacgacgatacc
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3961atctcgaccgatgcccttgagagccttcaacccagtcagctccttccggtgggcgcgggg
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6001catcgaactggatctcaacagcggtaagatccttgagagttttcgccccgaagaacgttt
6061tccaatgatgagcacttttaaagttctgctat
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- PET44A