常用pH缓冲液缓冲液缓冲范围Word格式.docx
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把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与mlmol/LHCl混合均匀,加水稀释至100ml
5
邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠
把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
6
六亚甲基四胺-盐酸
在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g,加浓HCl10ml,再加水稀释至1L
7
磷酸二氢钾-氢氧化钠
把mlmol/L的磷酸二氢钾与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
8
硼酸-氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
9
氯化铵-氨水
把mol/L氯化铵与mol/L氨水以2:
1比例混合均匀
10
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
11
氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠
把mlmol/L氨基乙酸-氯化钠与mlmol/LNaOH混合均匀
12
磷酸氢二钠-氢氧化钠
把mlmol/LNa2HPO4与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
13
氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/LKCl与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
一、常用溶液的配制
(一)溶液配制注意事项
1.药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteedreagent,G.R.)、分析试剂(Antalyticalreagent,A.R.)化学纯(Chemicalpure,C.P.)和实验试剂(Laboratoryreagent,L.R.)等等。
工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2.药品称量要精确。
3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在~之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。
(二)(1/15)Mol/L磷酸缓冲液
1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:
称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.),用蒸馏水溶解后,倾入1000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1000ml)。
2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:
称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,.)(或者Na2HPO4·
2H2O)用蒸馏水溶解后,放入1000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1000ml)。
3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。
附表1磷酸盐缓冲液配制法(单位:
毫升)
pH
1/15Mol/LNa2HPO4
1/15Mol/LKH2PO4
(三)LPB液
附表2LPB液配制法
LNa2HPO4(ml)
LNaH2PO4(ml)
Na2HPO4·
2H2O分子量=L溶液含L。
12H2O分子量=L溶液含L。
NaH2PO4·
H2O分子量=L溶液含L。
(四)LPB缓冲液
附表3LPB缓冲液配制法
Mol/LNa2HPO4(ml)
LNa2HPO4·
2H2O溶液L
12H2O溶液含L
LNaH2PO4·
H2O溶液含L
2H2O溶液含L
欲配LPB缓冲液则在LPB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。
欲配制PBS液时,则在溶液中加%的NaCl溶液即可。
(五)无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)
(LPH)
NaCl
KCl
Na2HPO4
(如为Na2HPO4·
12H2O,则为)
KH2PO4
将上述试剂依次溶于1000ml去离子水中,完全溶解后,115℃高压灭菌10min~15min,存在4℃冰箱中备用。
此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
(六)硼酸盐缓冲液(Boratesalinebuffer)
1.硼酸(H3BO3)
L硼酸:
硼酸加水至1000ml。
2.硼砂(Na2B4O7)
L硼砂:
硼砂加水至1000ml。
附表4不同pH的L硼酸缓冲液配制法
L硼砂(ml)
L硼酸(ml)
(七)巴比妥缓冲液
1.离子强度L巴比妥缓冲液
巴比妥钠
蒸馏水3000ml
HCl
(NHCl=193ml浓HCl加1807ml蒸馏水)
⑴将巴比妥钠溶于3000ml蒸馏水。
⑵加NHCl55ml。
⑶用HCl调节pH到,并加蒸馏水至4265ml。
2.L巴比妥缓冲液
巴比妥
加蒸馏水至1
3.L巴比妥缓冲液
加蒸馏水1
(八)L醋酸盐缓冲液见表附表5
附表5L醋酸盐缓冲液配制法
L
Tris(ml)
HCl(ml)
23℃
37℃
25
5
(九)三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液(Tris—HCl缓冲液)
不同pH,L
L三羟甲基氨基甲烷加х,加水稀释至100ml(见下表)
附表6Tris—HCl缓冲液配制法
(ml)
三羟甲基氨基甲烷(Tris)
分子量=
L三羟甲基氨基甲烷:
,加水至1000ml。
:
取,加水至1000ml。
(十)L碳酸盐缓冲液
NaHCO3
Na2CO3
溶于蒸馏水中即得。
不用时塞紧瓶塞,以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。
最好小量配制。
(十一)甘油磷酸缓冲液
1.配制磷酸缓冲液
LNa2HPO4
NaH2PO4
混合即可
2.9份甘油与1份磷酸缓冲液混合,即为甘油磷酸缓冲液。
用途:
用于免疫荧光试验。
(十二)Hank’s液
1.贮存液
12H2O
葡萄糖
%酚红液
双馏水加至
115℃高压灭菌15min,冰冻保存。
2.工作液
贮存液1份
双馏水9份
115℃高压灭菌15min。
临用时用灭菌的%NaHCO3液调pH值至左右(溶液呈橙红色)。
(十三)萘(钠)氏试剂(Nessler’sreagent)
配方1:
氯化汞
碘化钾
20%NaOH30ml
加蒸馏水至100ml
配方2:
碘化汞
碘化钾8g
蒸馏水50ml
(完全溶解后)过滤,加20%NaOH50ml。
检测溶液中氨离子。
(十四)阿氏(Alsever’s)液
柠檬酸钠
氯化钠
蒸馏水100ml
溶解后,以10%柠檬酸调节pH至,过滤,分装,10磅10min灭菌,4℃保存。
(十五)青、链霉素混合液(简称S.P.液或双抗液)
青霉素(40万U)5支
链霉素(200万μg)1支
分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中,混合后分装小瓶,置-10℃~-20℃冰箱保存备用(1万单位μg/ml)。
临用时,按1%的量加入营养液或其他溶液中,最后浓度是青霉素100U/ml,链霉素100ug/ml。
(十六)洗液(清洁液)
重铬酸钾150g
蒸馏水300ml
浓硫酸3000ml
将重铬酸钾加入蒸馏水中,使之自然溶解或水浴溶解,亦可在大坩埚中加热溶解,然后慢慢加入浓硫酸,边加边搅拌,见发热过剧则稍停,冷却后再继续加。
此为强洗液。
盛清洁液的容器要坚固,上加厚玻璃盖,操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套,以保安全。
洗液一旦变绿,表示铬酸已经还原,失去了氧化能力,不宜再用。
如将这样洗液加热,再加适量重铬酸钾,又可重新使用。
浓硫酸50%
蒸馏水50%
重铬酸钾5%
此为中等强度洗液。
配方3:
重铬酸钾100g
蒸馏水1000ml
加热溶解,冷却后缓慢加入
工业硫酸100ml
此液为弱洗液,为棕红色。
使用此液时,必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净,经自来水冲洗,沥干然后才能浸入,否则该洗液很快失效。
缓冲液名称及常用浓度缓冲pH范围主要物质分子量
MES(2吗啉代乙磺酸)
Bis-Tris
HEPES
PIPES
MOPS
Tricine
TEA(三乙醇胺)
甘氨酸-盐酸缓冲液(L)甘氨酸Mr=
邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(L)邻苯二甲酸氢钾Mr=
磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液磷酸氢二钠Mr=
柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液柠檬酸Mr=
柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(L)柠檬酸Mr=柠檬酸钠Mr=
乙酸-乙酸钠缓冲液(L)乙酸钠Mr=乙酸Mr=
邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液邻苯二甲酸氢钾Mr=
磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(L)
磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15molL)
磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(L)
巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)巴比妥钠Mr=
Tris-盐酸缓冲液L25℃)三羟甲基氨基甲烷(Tris)Mr=
甘氨酸-氢氧化钠缓冲液L)甘氨酸Mr=
硼砂-氢氧化钠缓冲液L)硼砂Na2B4O710H2OMr=
碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液L)碳酸钠Mr=碳酸氢钠Mr=
碳酸钠-氢氧化钠缓冲液L)
磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液
氯化钾-盐酸缓冲液(L)氯化钾Mr=
氯化钾-氢氧化钠缓冲液(L)氯化钾Mr=
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