新藤黄酸的研究Word格式文档下载.docx
- 文档编号:3788612
- 上传时间:2023-05-02
- 格式:DOCX
- 页数:8
- 大小:35.36KB
新藤黄酸的研究Word格式文档下载.docx
《新藤黄酸的研究Word格式文档下载.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《新藤黄酸的研究Word格式文档下载.docx(8页珍藏版)》请在冰点文库上搜索。
研究表明,藤黄酸、新藤黄酸均具有较强的抗肿瘤作用,其抗瘤谱广,毒性较低,能选择性地作用于肿瘤细胞,而对正常动物造血系统和免疫功能影响较小,对肺癌、胰腺癌、胃癌等具有较好的疗效[3-6],是极具开发前景的天然抗肿瘤药物。
在藤黄中,新藤黄酸的含量可达到8.01%~37.8%[7],新藤黄酸的熔点m.p.76.4~78.0℃。
因此如何优化其提取分离工艺具有实际意义。
二.药物当前制剂的类型
1.新藤黄酸纳米粒
新藤黄酸水溶性较差,易降解,且毒性和不良反应较大,将其制备成新藤黄酸纳米粒可以提高它的生物利用度,减少对正常组织的毒性和不良反应,新藤黄酸纳米粒由安徽中医学院胡容峰等研制[8]。
2.新藤黄酸包合物冻干粉
新藤黄酸是一种难溶的弱酸性药物,经L-精氨酸助溶后制成的静脉注射剂对给药部位有一定的刺激性,为了降低其用药刺激性,选用注射用羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)作为包合材料对其进行包合,再采用真空冷冻干燥法制备包合物冻干粉针。
冻干粉具有较好的稳定性和溶解性,可供溶血性和血管刺激性实验研究。
该制剂由安徽中医学院胡海霞等研制[9]。
3.新藤黄酸固体脂质纳米粒
新藤黄酸固体脂质纳米粒以生理相容的高熔点脂质为骨架材料制备,将药物包裹或内嵌于类脂核中,制成粒径约为50~1000nm的固体胶粒给药系统,副作用小,室温及体温下呈固态粒子[10]。
结合临床需求和目前制剂的发展情况,安徽中医学院陈卫东等将新藤黄酸药制备成固体脂质纳米粒,控制粒径大小,期望减小新藤黄酸的血管刺激性,提高体内生物利用度,更好地发挥其药理作用[11]。
4.新藤黄酸亲水凝胶骨架缓释片
骨架缓释片是目前制药工业应用和开发最活跃的剂型之一,它具有制备工艺简单,安全性好,组方容易等特点。
新藤黄酸具有显著的抗肿瘤活性,对小鼠腹水型肝癌、艾氏腹水癌、肺癌等有显著的抑杀作用,作为一种天然抗肿瘤药物,具有广阔的开发前景[11]。
安徽中医学院赵煤矿等采用羟丙甲基纤维素(HPMC)为主要缓释材料,研制12h给药1次的新藤黄酸亲水凝胶骨架片,并优化处方,得到最佳制剂工艺[12]。
三.新藤黄酸固体分散体的制备
新藤黄酸是一种弱酸性的难溶性物质,毒性和不良反应大,而且静脉给药时有强烈的血管刺激性,此外,新藤黄酸在体内的半衰期短,由于这些特性限制了其临床应用。
其特点是提高难溶性药物的融出速率和溶解度,以提高药物的吸收和生物利用度。
固体分散体可看作是中间体,用以制备药物的速释和缓释制剂,也可制备肠溶剂[13]。
藤黄醇提物中含量最多的是藤黄酸,其次为新藤黄酸。
将藤黄树脂溶于一定体积的吡啶,使得藤黄树脂中含量最多的酸性成分藤黄酸与吡啶成盐而析出,含量少的成分留在母液中。
这样,可使母液中新藤黄酸的含量增加,达到富集的目的。
1.新藤黄酸的制备
1.1藤黄酸吡啶盐的制备
取藤黄醇提物(40g),按质量:
体积(M∶V)比1∶1.5加入吡啶60mL于70℃水浴上加热溶解,趁热抽滤,滤液转移至200mL烧杯中,用少许吡啶润洗抽滤瓶,合并洗液和滤液,按体积比(V∶V)100∶13加入10mL40℃温水充分搅拌,放置冰箱冷却过夜。
析出橘红色沉淀,抽滤,滤饼依次由70%吡啶溶液,水各洗3次,80℃烘干得到黄色藤黄酸吡啶盐粗品12.5g进一步精制,酸化得藤黄酸,滤液待用[14]。
1.2新藤黄酸的制备
将滤液用1%盐酸水溶液调pH=4,乙酸乙酯萃取。
合并有机层,水洗至近中性,用无水硫酸钠干燥。
过滤,减压回收溶剂,得桔红色粉末。
取5g置100mL圆底烧瓶中,用丙酮溶解,加100~200目硅胶适量拌样。
选用长约为50cm内,径为4cm的层析柱,用100~200目硅胶装柱,柱长高度为20cm,在用真空泵抽负压1h,加入制备好的拌样硅胶,再加1cm100~200目硅胶,真空泵抽负压0.5h先以乙酸乙酯∶石油醚∶二乙胺=1∶10∶0.05为流动相进行洗脱,再依次用乙酸乙酯∶石油醚∶二乙胺=1∶1∶0.05,乙酸乙酯∶二乙胺=1∶0.05、甲醇∶乙酸乙酯∶二乙胺=1∶20∶0.05、甲醇∶乙酸乙酯∶二乙胺=1∶10∶0.05等不同组成的流动相进行梯度洗脱,TLC检测,收集不同的组分。
TLC显示,洗脱液为甲醇∶乙酸乙酯∶二乙胺=1∶10∶0.05的组分即为目标物新藤黄酸。
将收集液减压浓缩至干,残留物加乙酸乙酯溶解,1%HCl水溶液洗涤至有机层不含二乙胺,再水洗至近中性,乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥。
过滤,滤液减压浓缩,得亮黄色粉末新藤黄酸1.24g,收率为24.8%(以母液处理物计)[15]。
2.载体材料
固体分散体的融出速度在很大程度上取决于所用载体材料的特性。
载体材料应具有下列条件:
无毒、无致癌性、不与药物发生化学变化、不影响主药的化学稳定性、不影响药物的疗效与含量检测、能使药物得到最佳分散状态或缓释效果、价廉易得。
常用的载体材料可分为水溶性、难溶性和肠溶性三大类[16]。
因为综合考虑的新藤黄酸的化学特性和物理性质,新藤黄酸固体分散体的载体材料采用肠溶性载体材料。
常用的载体材料有纤维素类和聚丙烯酸树脂类:
2.1纤维素类常用的有纤维醋法酯、邻苯二甲酸羟丙甲纤维素以及羧甲乙纤维素,因为均能溶解于肠溶液中,用来制备胃中不稳定的药物在肠道释放和吸收、生物利用度高的新藤黄酸的固体分散体。
由于它们的化学结构不同,黏度有差异,释放速率也不相同。
CAP和PEG联用制成固体分散体,可控制释放速率,有较好的临床开发应用前景。
2.2聚丙烯酸树脂类常用EudragitL100和EudragitS100。
3.固体分散体的类型
共沉淀物(也称共蒸发物)是由药物与载体材料以恰当的比例混合,形成共沉淀无定形物,有时也称玻璃态共熔体,因其有如玻璃的质脆、无确定的熔点[17]。
4.分散体的制备
4.1仪器:
UV-1601型紫外可见分光光度计(日本岛津),ZRS-8G智能溶出试验仪,ZK-82A真空干燥箱,HWS24型温水浴锅,DPL-0.5流化床包衣机(重庆精工制药机械有限公司),DTA1700差热分析仪(美国Perkin-Elmer公司)
4.2材料:
新藤黄酸原料药(过80目筛),PEG6000、PEG4000、PVPK30,聚乙烯吡咯烷酮K30,泊洛沙姆188(F68,BASF),十二烷基硫酸钠(SLS),空白小丸(100目,自制),其他试剂均为分析纯。
4.3实验方法NGA固体分散体的制备:
溶剂一熔融法
称取处方量的NGA与载体,将载体置80℃水浴中加热,将NGA用适量无水乙醇溶解,待载体完全熔融时加入NGA溶液,同时剧烈搅拌,待混合物至黏稠状态时,在冰浴中剧烈搅拌至完全固化,在冰箱中冷冻30min,然后置真空干燥箱中40℃干燥过夜,取出,粉碎,过80目筛备用[18]。
5溶出速率的测定
5.1检测波长的确定精密称取NGA12.5mg,置25mL量瓶中,用少量无水乙醇溶解,加0.25%SLS溶液稀释至刻度,然后精密量取适量,用0.25%SLS溶液配制成浓度为50mg/L溶液;
分别配制浓度为300mg/L的PEG6000、PEG4000、F68和PVPK30的0.25%SLS溶液,按照中国药典2010年二部附录ⅣA紫外一可见分光光度法在200~400nm波长范围内进行扫描。
结果NGA在结果在220nm和360nm均有最大吸收波峰,而辅料在此无吸收,为了排除溶剂的干扰,选择360nm为新藤黄酸的检测波长。
5.2标准曲线的绘制精密吸取对照品溶液(0.2mg/ml)0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml分别置于7个10ml棕色容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,混匀,0.45μm微孔滤膜滤过依次进样20μl,按上述色谱条件,以峰面积为纵坐标,质量浓度为横坐标进行线性回归,得回归方程为:
A=52216c-12098(n=7),r=0.9999。
5.3回收率试验精密称取NGF对照品12.0,15.0,0.18.0mg各3份,置25mL量瓶中,按处方比例加人相应的载体,用用少量无水乙醇溶解,加0.25%SLS溶液稀释至刻度,分别制成高、中、低3个浓度的溶液各3份,滤过,取续滤液1mL置10mL量瓶中,加0.25%SLS溶液稀释至刻度,摇匀,在360nm处测定吸光度,计算回收率[19]。
表一不同载体分散体3种浓度的回收率实验结果
载体高浓度中浓度低浓度
PEG6000
PEG4000
F68
PVPK30
5.4溶出度实验将相当于NGA30mg的固体分散体装入胶囊,按照中国药典2010年版二部转篮法,以0.25%SLS溶液900mL为溶出介质,转速为100r·
min-1,温度(37±
0.5)oC,分别在15、30、45、60min取样10mL,滤过,同时补加10mL同温同体积溶出介质,取续滤液于360nm波长处测定吸光度。
测定结果代入标准曲线计算浓度,并换算成累计溶出百分率。
6.正交试验设计取新藤黄酸,按所选因素及水平(表2),采用L9(33)正交表设计试验(表3)进行新藤黄酸固体分散体的制备,得1~9号产物,备用[20]。
表二新藤黄酸固体分散体制备工艺因素水平
水平A载体用量B干燥时间C干燥温度
/oC/g·
g-1/h-1
14150
251.560
36270
表三新藤黄酸固体分散体制备工艺正交设计及其结果
NoABC新藤黄酸2h累计融出率/%
1111
2122
3133
4222
5231
6212
7332
8313
9321
K1
K2
K3
R
五讨论
新藤黄酸制成固体分散体后其溶出速率提高,可能是因为新藤黄酸分散到载体材料的分子中,在冷却析出时,载体材料阻滞药物分子聚集进而形成较小的晶粒,甚至转变成无定型,使得药物溶解度增加。
此外,高分子载体材料本身具有很好的亲水性,易润湿,也可加速药物溶出。
参看文献:
[1]刘卫海,赖小平,周兴挺.新藤黄酸的研究进展,[J],时针国医国药,201021(9):
2347~49.
[2]刘卫海,肖国丽,赖小平等。
新藤黄酸诱导HepG2细胞凋亡与Bax及Bcl-2的关系,[J],中国药理学通报,201228(3):
439~40.
[3]朱国旗,王效山,李庆林等.新藤黄酸体外抑制肺腺癌A549细胞增殖的作用,[J],安徽中医学院学报,201130
(1):
53~56.
[4]陈葆仁.藤黄抗癌成分的研究,江西医学学报,1980
(2)1.
[5]QinglinLI,HuiCheng,GuoqiZHU.GambogenicAcidInhibitsProliferationofA549CellsthroughApoptosis-InducingandCellCycleArresting,J,Biol.Pharm.Bull.33(3)415—420(2010).
[6]周兰贞,晏烽根,李庆林.新藤黄酸诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡的作用机制研究,[J],基础研究·
BasicResearch,20117(31):
580~584.
[7]胡钟,何黎琴,王效山.新藤黄酸制备工艺优化,[J],广州化工,201139(24)36~37.
[8]胡容峰,朱金燕.高效液相色谱法测定新藤黄酸纳米粒中新藤黄酸的含量和包封率,[J],安徽中医学院学报,200929
(1)49~51.
[9]胡海霞,王效山,彭代银.新藤黄酸包合物冻干粉针制备及工艺优化,[J],ChineseTraditionalandHerbalDrugs,201243
(1)65~69.
[10]AnnettezurMuhlen,CoraSchwarz,WolfgangMehnert.Solidlipidnanoparticles(SLN)forcontrolleddrugdelivery–Drugreleaseandreleasemechanism,J,EuropeanJournalofPharmaceuticsandBiopharmaceutics,45(1998)149–155.
[11]陈延杰,陈卫东.新藤黄酸固体脂质纳米粒的制备与质量评价,[J],制剂技术,201120(21)36~38.
[12]赵煤矿,周晶,张帆.新藤黄酸亲水凝胶骨架缓释片的处方工艺研究,[J],安徽化工,200733(5)32~33.
[13]张惠平,向大雄,罗杰英.固体分散技术在药剂学中的研究进展,[J],中国药学杂志,200762(41)807~810.
[14]刘举,王洋,周云鹏等.藤黄酸的提取工艺改进,[J],辽宁大学学报,201138
(2)97~99.
[15]刘修树,周娟,黄鹏等.新藤黄酸提取工艺的优化研究,[J],安徽中医学院学报,200726
(1)54~55.
[16]张佳良,杨秋霞,陈建.固体分散体在缓控释制剂中的应用,[J].药学实践杂志,201028(4)248~250.
[17]李标.固体分散体在药剂学中的应用,[J],中国药房,200920(10)790~792.
[18]黄好武,罗玉鸿,梁飞华.硝苯地平固体分散体制备工艺的研究,[J],PharmacyToday,201121(01)20~24.
[19]刘少梅,张蜀,姚俏云.硝苯地平固体分散体的制备和溶出速率研究,[J],广东药学院学报,200723
(2)148~150.
[20]王可,周娟,周安.正交试验法优选新藤黄酸的醇提工艺,[J],安徽医药,200913
(1)15~16.
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 藤黄 研究
![提示](https://static.bingdoc.com/images/bang_tan.gif)