人教版高中生物选修3知识点清单文档格式.docx
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质粒(常用)、γ噬菌体的衍生物、动植物病毒。
(3)作用:
①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内;
②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。
二、基因工程基本操作程序
1、目的基因的获取途径(目的基因:
编码蛋白质的结构基因。
)
(1)从基因文库中获取
(2)人工合成目的基因,人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法。
(原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。
(3)PCR技术扩增目的基因
①原理:
DNA双链复制
②过程:
第一步:
加热至90~95℃DNA解链;
第二步:
冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;
第三步:
加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
2、基因表达载体的构建
(1)目的:
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)组成:
目的基因+启动子+终止子+标记基因
①启动子:
是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。
②终止子:
也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。
③标记基因的作用:
是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
常用的标记基因是抗生素基因。
3、将目的基因导入受体细胞
生物种类
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用方法
采用最多的方法是农杆菌转化法其次还有基因枪法和花粉管通道法等
显微注射技术
Ca2+处理法使其处于感受态
受体细胞
体细胞
受体细胞多是受精卵受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入Ti质粒的T—DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞
的DNA→表达
将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育
→获得具有新性状的动物
Ca2+处理细胞→微生物细
胞壁的通透性增加→重组
质粒与感受态细胞混合→
感受态细胞吸收DNA分子
4、目的基因的检测与鉴定
(1)分子水平检测
①导入检测即转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因:
DNA分子杂交技术,即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针。
②转录检测即检测目的基因是否转录出了mRNA:
分子杂交法,即目的基因作探针与mRNA杂交
③翻译检测即检测目的基因是否翻译成蛋白质:
抗原─抗体杂交法
(2)个体生物学水平鉴定:
对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。
1.3基因工程的应用--1.4蛋白质工程的崛起
一、基因工程的成果
1.植物基因工程:
抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程:
提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。
3.基因治疗:
把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。
二、蛋白质工程与基因工程的比较
蛋白质工程
基因工程
区别
过程
预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列
获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
实质
定向改造或生产人类所需的蛋白质
定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品
结果
可产生自然界没有的蛋白质
只能生产自然界已有的蛋白质
(1)蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程
(2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质进行修饰、改造
专题2细胞工程
2.1植物细胞工程
一、植物细胞工程
1、原理:
细胞全能性:
细胞具有该生物的全部遗传信息并具有发育成完成个体的能力。
全能性表达的难易程度:
受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;
植物细胞>动物细胞
2、植物组织培养技术
概念:
是指依据细胞全能性的原理,在无菌条件下,分离植物的器官、组织、细胞或原生质体(称为外植体),并在培养基上培养,在适宜的条件下使其长成部分或完整植株的技术。
(1)过程:
离体的植物器官、组织或细胞―→脱分化―→愈伤组织―→再分化―→试管苗―→植物体
(2)用途:
微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。
(3)地位:
是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
●愈伤组织:
是一团没有特定结构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞。
●脱分化:
由已分化的植物细胞形成愈伤组织的过程。
●再分化:
愈伤组织生长一段时间后再移植到新的培养基(人教版:
分化培养基)上继续培
养,重新诱导分化形成根、芽等器官的过程。
(4)条件:
首先用消毒剂除去外植体表面的微生物,在无菌条件下将其放到适宜的培养基上。
培养基一般有五类成分:
(1)水
(2)无机营养:
包括大量元素和微量元素。
(3)有机营养:
主要有糖、维生素、氨基酸。
(4)生长物质:
指植物激素,常用的有生长素和细胞分裂素,离体培养物的根芽分化取决于激素间的比例。
此外,赤霉素对刺激细胞的伸长也有一定的作用。
(5)天然附加物:
如椰子乳、酵母提取物等。
3.植物体细胞杂交技术
(2)诱导融合的方法:
物理法包括离心、振动、电刺激等。
化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。
(3)意义:
克服了远缘杂交不亲和的障碍。
二、植物细胞工程的应用
1、植物繁殖的新途径
(1)微型繁殖:
用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
特点:
保持优良品种的遗传特性;
高效快速的实现种苗的大量繁殖。
(2)作物脱毒:
植物分生区附近,如茎尖、根尖,很少被病毒感染,甚至无病毒,因而被用来培育无病毒植株。
(3)人工种子:
以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。
2、作物新品种的培育:
单倍体育种和突变体的利用。
3、细胞产物的工厂化生产:
细胞产物有蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。
【要点名师精解】
植物组织培养和植物体细胞杂交的比较
名称
植物组织培养
植物体细胞杂交
原理
细胞的全能性
细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性
注意事项
①选材:
选取根尖、茎尖、形成层部位、最容易诱导脱分化
②光照:
脱分化过程不需光照,再分化过程一定要有光
①去细胞壁的方法:
酶解法,所用的酶是纤维素酶和果胶酶
②人工诱导融合的方法:
物理法:
离心、振动电激
化学法:
用聚乙二醇诱导
2.2动物细胞工程
一、动物细胞培养
就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
这项技术是动物细胞工程的基础。
用于培养的动物细胞和组织大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织
细胞增殖
2、过程:
相关概念
●细胞贴壁:
培养时悬液中分散的细胞很快就会贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
●接触抑制:
当贴壁细胞分裂生长到表面相互相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
●原代培养:
是指从供体获取组织或细胞后的初次培养。
●传代培养:
将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养。
(一般情况下,传代培养10-50次后,细胞增殖会明显放缓,甚至完全停止,但有少部分细胞克服细胞寿命的自然极限,获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正在朝着等同于癌细胞的方向发展。
3、结果:
获得细胞群
4、传代培养的原因:
培养到一定时期细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭。
5、条件:
(1)无菌、无毒的环境
•培养液和培养用具进行无菌处理
•培养液中添加一定量的抗生素
•定期更换培养液
(2)营养
•葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐、微量元素、促生长因子等。
•合成培养基中还需加入动物血清、血浆等
(3)温度和PH
•温度:
细胞体外培养的温度一般与动物的体温相近,哺乳动物多以36.5±
0.5℃为宜。
•PH:
多数细胞最适PH为7.2-7.4。
(4)气体环境
•细胞培养所需气体主要是O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的PH。
•进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱
中进行培养。
附:
培养基的的种类(按来源分)
天然培养基:
主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等,具有营养价值高、成分复杂的特点。
合成培养基:
是人工配制的,具有成分明确、便于控制实验条件的特点。
4、应用:
(1)许多有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,都可以借助动物细胞的大规模培养来生产。
(2)作为基因工程的受体细胞。
(3)用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性。
(4)用于医学研究
二、动物体细胞核移植
概念:
将供体体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合,借助于卵细胞的发育能力,经过培养发育成胚胎,进而形成个体的技术。
1、不同细胞全能性的表现程度不同,
如:
受精卵>胚胎干细胞>多能干细胞>单能干细胞>体细胞。
2、动物细胞核的移植技术
项目
细胞核的移植
概念
利用一个细胞的细胞核(供体核)来取代另一个细胞中的细胞核,
形成一个重建的“合子”
动物体细胞核具有全能性
获得与供体遗传物质基本相同的个体
意义
①有利于遗传疾病的治疗,优良品种的培育
②对物种的优化、濒危动物的保护和转基因动物的扩群有重要意义
③降低畜牧业的成本,缩短育种年限,提高生产效率
三、动物细胞融合与单克隆抗体制备
指在一定条件下将2个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。
(融合成的细胞称为杂交细胞)
细胞膜的流动性、细胞增殖
2、诱导融合的因素:
聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。
3、意义:
制备单克隆抗体。
4、单克隆抗体的制备:
(1)过程
(2)主要优点:
特异性强、灵敏度高,并可大量制备。
动物细胞融合与植物体细胞杂交的不同
比较项目
细胞融合的原理
细胞融合的方法
诱导手段
用法
细胞膜的流动性
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、振动,聚乙二醇等试剂诱导
克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株
动物细胞融合
使细胞分散后诱导细胞融合
除应用植物细胞杂交手段外,再加灭活的病毒诱导
制备单克隆抗体的技术之一
专题3胚胎工程
是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和技术处理,经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内产生后代,以满足人类的各种需求。
技术:
体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术、胚胎干细胞移植技术、胚胎冷冻保存技术、性别控制技术等
操作对象:
生殖细胞、受精卵和早期胚胎细胞
3.1动物胚胎发育的基本过程
(一)精子的发生
1、场所:
睾丸
2、时间:
初情期
3、过程:
第一阶段:
位于曲细精管管壁的精原细胞进行数次有丝分裂,产生多个初级精母细胞。
第二阶段:
初级精母细胞连续进行两次分裂(即减数分裂,包括MⅠ和MⅡ),第一次分裂产生2个次级精母细胞,每个次级精母细胞再分裂一次产生2个精子细胞。
第三阶段:
圆形的精子细胞经过变形成为精子。
(二)卵子的发生
卵巢
2、时间及过程:
●胎儿期
动物的胚胎在性别分化后以后,卵原细胞通过有丝分裂不断增加数量,并进一步演变为初级卵母细胞,这时,它被卵泡细胞包围,形成卵泡。
●初情期后
减数第一次分裂:
是在雌性动物排卵前后完成的,结果产生1个次级卵母细胞和1个第一极体,进入输卵管,准备与精子受精。
减数第二次分裂:
是在精子和次级卵母细胞(减Ⅱ中期)结合的过程中形成的,次级卵母细胞经分裂产生1个卵子和1个第二极体。
(当在卵细胞膜和透明带的间隙观察到2个极体时,说明卵子已经完成了受精,这是判断卵子是否受精的重要标志)
(三)受精
准备阶段1——精子获能
刚刚排出的精子,不能立即与卵子受精,必须在雌性动物的生殖道(子宫和输卵管)发生相应的生理变化后,才能获得受精的能力,这种现象称为“精子获能”。
(苏教版:
卵泡液、输卵管分泌物、血清等液体可使精子获能)
准备阶段2——卵子的准备
卵子在受精前也要经历类似精子获能的过程。
动物排出的卵子成熟程度不同,有的可能是次级卵母细胞,有的可能是初级卵母细胞,它们都要在输卵管内进一步成熟,当达到减数第二次分裂中期时,才具备与精子受精的能力。
受精阶段
(1)场所:
输卵管
(2)主要过程(哺乳动物):
精子穿越放射冠和透明带,进入卵细胞膜,原核形成和配子结合。
获能后的精子与卵子相遇时,首先发生顶体反应,使顶体内的顶体酶释放出来,以溶解透明带外面的放射冠(由卵泡细胞构成的放射状结构),形成精子穿越的通道。
精子穿越透明带后,在接触卵细胞膜的瞬间,会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应,这个反应称作透明带反应。
这是防止多精子入卵受精的第一道屏障。
精子外膜与卵细胞膜相互融合,精子入卵。
精子入卵后,卵黄膜会立即发生一种生理反应,拒绝其他精子再进入卵内,这种生理反应称作卵细胞膜反应。
这是防止多精子入卵受精的第二道屏障。
精子入卵后的另一个变化,是尾部脱离,并且原有的核膜破裂;
随后,精子形成一个新的核膜,最后形成一个比原来精子核还大的雄原核。
与此同时,精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂,排出第二极体后,形成雌原核。
雄、雌原核充分发育后,相向移动,彼此接触,二者体积缩小、合并,形成一个含二倍染色体的合子,即受精卵。
受精过程至此结束,受精卵的发育也由此开始。
注意:
1、一个卵泡中一般能形成一个成熟的卵子。
2、排卵是指卵子从卵泡中排出而不是指卵泡从卵巢中排出。
3、刚排出的卵子尚未完全成熟,一般仅完成减数第一次分裂,需要在输卵管内进一步成熟。
4、成熟的精子无受精能力,需要在生殖道内获能后方能受精
2、动物排出的卵子并未成熟,只有达到减数第二次分裂中期时,才具备受精能力。
3、受精卵的遗传物质中,核遗传物质一半来自精子,一半来自卵子,细胞质遗传物质几乎全来自卵子。
二、哺乳动物胚胎发育的基本过程
1、胚胎发育概念:
是指受精卵发育成幼体的过程,包括卵裂、囊胚、原肠胚、胚层分化等主要阶段。
(卵裂期细胞数目为32个左右时的胚胎,叫做桑椹胚)
2、胚胎发育过程:
苏教版:
胚胎发育分为3个阶段
胚卵期(受精卵→第1周末)→胚胎期(第2周→第8周)→胎儿期(第9周始)
1、发育中的细胞分裂均为有丝分裂,原肠胚阶段是个体发育中分化程度最高的阶段,但要注意细胞分化贯穿整个个体发育过程中。
3.3胚胎干细胞的移植
(一)干细胞
1、概念:
是动物(包括人)胚胎及某些器官中具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,是重建、修复病损或衰老组织、器官功能的种子细胞。
2、类型:
专能干细胞:
只能分化为一种或功能密切相关的两种细胞。
如上皮组织基底层的干细胞,肌肉中的成肌细胞。
多能干细胞:
能分化为多种细胞或组织。
如造血干细胞。
全能干细胞:
能分化为各种细胞、组织或器官。
如胚胎干细胞。
(二)胚胎干细胞
是在人胚胎发育早期的囊胚(受精后约5~6d)中未分化的细胞。
(人教版:
是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞,简称ES或EK细胞。
2、特点(人教版)
形态上:
体积小,细胞核大、核仁明显。
功能上:
具有发育的全能性。
3、胚胎干细胞的分离途径:
见下图
4、胚胎干细胞的应用
(1)用于治疗人类的某些顽症。
人类的某些顽症是由于细胞坏死、退化或功能异常引起的,如帕金森综合症、少年糖尿病和老年痴呆等。
利用ES细胞可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性,移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能。
目前,在动物实验方面,用ES细胞诱导分化出的某些组织细胞已成功治愈糖尿病、肝衰竭等。
也许将来当我们身体某一类细胞功能出现异常或退化时,可以通过诱导ES细胞定向分化来及时修补。
(2)通过诱导ES细胞体外诱导分化,可以培育出人造组织器官,解决目前临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。
(3)ES细胞是研究体外细胞分化的理想材料
3.4胚胎工程的应用
一、体外受精
是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。
人工模拟体内环境,包括营养、温度、PH等,使初级卵母细胞成熟,同时使精子获能,最终完成受精作用,并有计划地保存胚胎等。
见图下
加快优良家畜的繁殖速度。
二、胚胎早期培养
精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。
当胚胎发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。
2、胚胎培养液:
成分包括无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,及血清等物质。
3、牛体外受精胚胎工程化生产流程:
三、胚胎移植
是指将良种母畜(供体)配种后,从其生殖道取出受精卵或早期胚胎(人教版:
或通过体外受精及其他方式得到的胚胎),移植到生理状态相同的同种母畜(受体)体内,使之继续发育成为新个体的技术。
见右图
【特别提示】
①用于移植的胚胎应为桑葚胚或囊胚。
②胚胎移植的供体和受体必须是同种生物,同一物种的动物才有可能具有相同的生理特征。
③作为供体的是优良品种,受体的雌性动物则是常见或存量大的品种。
3、关键技术:
超数排卵(促性腺激素处理)、人工授精、同期发情、胚胎采集等。
4、意义:
大大缩短了供体本身的繁殖周期,充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能。
5、胚胎移植的生理学基础
(1)排卵后,供、受体生殖器官的生理变化是相同的
(2)哺乳动物的早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态,这就为胚胎的收集提供了可能。
(3)受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(4)供体胚胎可与子宫建立正常的生理和组织联系,但移入受体的供体胚胎的遗传特性,在孕育过程中不受任何影响。
四、胚胎分割
用显微手术的方法将一枚胚胎分割成二分胚、四分胚甚至八分胚,经体内或体外培养后植入受体,以得到同卵双生或同卵多生后代的技术。
这种方法可视为一种胚胎克隆方法。
2、材料:
发育良好,形态正常的桑椹胚或囊胚。
(注意:
对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育)
2、意义:
提高家畜的胚胎利用率。
桑椹胚以前的细胞均未分化,细胞全能性高,是胚胎分割的最佳时期
桑椹胚到囊胚的发育过程中,细胞开始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎分割
(三)胚胎冷冻保存技术
将动物的早期胚胎,通过特殊的保护剂和降温措施,使其长期保存在超低温环境下。
可以使胚胎移植不受时间和地域的限制,简化引种过程。
(五)性别控制技术
通过人为干预,使动物按照人们的愿望繁衍所需性别的后代的技术。
2、应用:
•在临床上,避免与性别有关的遗传病胎儿的出生;
•在畜牧业生产上,按生产需要控制动物性别以提高经济效益。
3、牛胚胎性别鉴定和分割技术:
专题4生物技术的安全性和伦理问题
一、转基因生物的安全性问题
1、对转基因生物安全性的担忧:
(1)食用是否安全:
•转基因生物可能产生毒性蛋白、新的过敏原,导致营养成分的改变。
(2)对生态系统的影响;
•对生物多样性的影响;
•导入的目的基因是否会扩散到其他物种而导致自然界的混乱;
•转基因植物的残体分解物、根际分泌物等是否会对生态与环境造成大规模的负面效应等。
2、我们应该采取的态度和措施
(1)对于转基因生物及其产品,我们应该科学地认识、评估和利用,保障公众的知情权;
(2)国家应建立相应的评估及预警机制,更加理性地利用转基因生物。
二、生物武器对人类的威胁
1、生物武器的危害性
(1)许多细菌和病毒具有强大的感染力和致病力;
(2)利用转基因技术,在一些不致病的微生物体内插入致病基因,或在一些致病的细菌或病毒中插入能对抗普通疫苗或药物的基因;
(3)人类基因组计划的完成也为生物武器的研制创造了条件。
如,不同种群基因组成的特性的阐明,就有可能被用于研制针对特定种群的生物武器。
2、禁止生物武器的措施
(1)1972年4月10日,苏、美、英签署了《禁止生物武器公约》,我国1984年加入。
(2)全球刑警合作,共防生物袭击。
三、生物技术中的伦理问题
1、热点讨论1——克隆人(人教版)
(1)争论焦点
•反对者认为,①克隆人严重违反了人类伦理道德,是克隆技术的滥用,克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念,克隆人是在人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人等;
②由于克隆技术尚不成熟,很有可能孕育出有严重生理缺陷的孩子。
•支持者认为,①克隆人是一项科学研究,既然是科学,就应该允许科学家研究克隆人;
②担心可能孕育出有生理缺陷孩子的问题可以通过基因诊断、染色体检查等方法得到解决,不成熟的技术只有通过实践,才能使之成熟。
(2)中国政府的态度:
•禁止生殖性克隆人,不反对治疗性克隆。
•四不原则:
不赞成、不允许、不支持、不接受。
2、热点讨论2——设计试管婴儿(人教版)
(1)设计试管婴儿与为解决不孕夫妇的生育问题的试管婴儿区别:
设计试管婴儿
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