高中生物第一章基因工程章末综合检测一苏教版选修3Word文件下载.docx
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限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—,说明限制酶Ⅱ能识别和切割限制酶Ⅰ的识别序列,但限制酶Ⅰ不能识别和切割限制酶Ⅱ的识别序列,且两种限制酶切割后形成的黏性末端相同。
要将目的基因从DNA分子中提取出来,需要在目的基因左右切开,所以要用限制酶Ⅱ切割。
而质粒上的两种标记基因GeneⅠ和GeneⅡ中分别有限制酶Ⅱ和限制酶Ⅰ的识别序列,如果用限制酶Ⅱ切割,则两种标记基因都会被破坏,造成重组质粒无标记基因,所以只能用限制酶Ⅰ切割,以保留GeneⅠ基因。
因此,要用不同的限制酶剪切质粒和目的基因,A项正确,B、C、D项错误。
4.在高光强、高温和高氧分压的条件下,高粱由于含有磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶,其利用CO2的能力远远高于水稻。
从高粱的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因,利用农杆菌转化将其转入水稻体内,从而提高水稻的光合效率。
下列说法不正确的是( )
A.在此过程中会用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体等工具
B.此技术与单倍体育种技术相结合,可快速获得纯合子,缩短育种周期
C.PEPC基因导入受精卵是此技术的关键,否则不能达到该基因在各组织细胞都表达的目的
D.此项技术是否成功必须测定转基因植株与对照植株同化二氧化碳的速率
答案:
C
5.下列关于核酸分子杂交和抗原—抗体杂交的叙述,正确的是( )
A.核酸分子杂交是指两条脱氧核苷酸链的杂交
B.抗原—抗体杂交的原理为碱基互补配对原则
C.核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录
D.抗原—抗体杂交常以目的基因产物作为抗体
核酸分子杂交是指两条核苷酸链的杂交;
抗原—抗体杂交的原理为蛋白质的特异性结合原理。
抗原—抗体杂交常以目的基因产物作为抗原。
6.关于基因工程的叙述,正确的是( )
A.基因工程获得的新品种可以直接投放到环境中不会影响生态环境
B.细菌质粒是基因工程常用的运载体
C.通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理运载体DNA
D.为育成抗除草剂的农作物新品种导入的抗除草剂的基因只能以受精卵为受体
选B。
导入了特殊基因的新品种,直接投入到环境中很可能影响生态环境,A错误;
基因工程常用的运载体是质粒,B正确;
限制酶具有的特点是识别特定序列的DNA分子,并在特定的位点切割DNA分子,故含有目的基因的DNA和运载体要用同一种限制酶切割,露出相同的黏性末端,C错误;
植物体细胞具有全能性,并且全能性可以表达,D错误。
7.在用基因工程技术培育抗除草剂的转基因烟草的过程中,下列操作错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
限制性核酸内切酶只能识别DNA的核苷酸序列,并在特定的位点切割,而烟草花叶病毒的核酸是RNA,限制性核酸内切酶对其不能发挥作用,A错误。
8.美国生物学家安妮·
穆尔发现:
在美国南部有一种称为“黑寡妇”的蜘蛛,它吐出的丝比现在所知道的任何蜘蛛丝的强度都高,而且这种蜘蛛可以吐出两种不同类型的丝织成蜘蛛网,第一种丝在拉断之前,可以延伸27%,它的强度竟达到其他蜘蛛丝的2倍;
第二种丝在拉断之前很少延伸,却具有很高的防断裂强度。
科学家给这种物质取名叫“生物钢”。
下列叙述错误的是( )
A.生物钢的特性直接决定于“黑寡妇”蜘蛛的丝蛋白的结构
B.生物钢的特性由“黑寡妇”蜘蛛的DNA分子中脱氧核苷酸的特定排列顺序决定
C.将“黑寡妇”蜘蛛的丝蛋白基因转入奶羊或奶牛,通过它们的乳腺细胞可生产“生物钢”
D.将“黑寡妇”蜘蛛细胞与大肠杆菌融合构建“工程菌”可实现“生物钢”大规模生产
蛋白质的结构决定功能,“生物钢”的特性直接取决于“黑寡妇”蜘蛛丝的蛋白结构,A项正确;
生物性状是由蕴藏于遗传物质中的遗传信息(即DNA分子中脱氧核苷酸的特定排列顺序)决定的,B项正确;
由于密码子的通用性,将“黑寡妇”蜘蛛的丝蛋白基因转入奶羊或奶牛,就可通过它们的乳腺细胞生产“生物钢”,C项正确;
“黑寡妇”蜘蛛细胞与大肠杆菌细胞融合,构建的工程菌,由于不同生物间基因的相互作用,蜘蛛的丝蛋白基因不一定能够表达,D项错误。
9.基因工程产物可能存在一些安全性问题,但不必担心以下哪种情况的发生( )
A.三倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼杂交,进而导致自然种群被淘汰
B.载体的标记基因可能指导合成有利于抗性进化的产物
C.目的基因(如杀虫基因)本身编码的产物可能会对人体产生毒性
D.转基因生物释放到环境中,可能会对生物多样性构成威胁
由于联会紊乱,三倍体转基因鲤鱼是高度不育的。
10.据图分析,下列有关基因工程的说法,不正确的是( )
A.用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割质粒(假设切割完全),会获得3种长度的DNA片段
B.用限制酶Ⅰ、Ⅱ切割质粒和目的基因比只用限制酶Ⅰ更符合要求
C.与启动子结合的应该是RNA聚合酶
D.能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中,不一定会有目的基因的表达产物
A
11.科学家已经运用基因工程技术,让羊合成并由乳腺分泌抗体,下列相关叙述中正确的是( )
①该技术将导致定向变异
②DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来
③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供材料
④受精卵是理想的受体
A.①②③④ B.①③④
C.②③④D.①②④
DNA连接酶是将两个DNA片段末端之间的缝隙“缝合”起来,在相邻的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键,而不是形成氢键。
12.下列关于基因治疗的说法,正确的是( )
A.基因治疗只能治疗一些传染病,如艾滋病
B.基因治疗的主要方法是让患者口服一些健康的外源基因
C.基因治疗的主要原理是引入健康基因并使之表达
D.基因治疗在发达国家已成为一种常用的临床治疗手段
基因治疗是指将健康基因导入有缺陷的细胞内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。
基因治疗不能治疗传染病。
13.某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a,通过基因工程的方法,将a转到马铃薯植株中,经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。
这一过程涉及( )
A.目的基因进入受体细胞后,可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制,传给子代细胞并表达
B.基因a导入成功后,将抑制细胞原有的新陈代谢,开辟新的代谢途径
C.细菌的DNA分子较小,可直接作为目的基因,导入受体中不需要整合到马铃薯的DNA分子中
D.目的基因来自细菌,可以不需要运载体直接导入受体细胞
目的基因进入受体细胞后,会随着马铃薯DNA分子的复制而复制,传给子代细胞,使之定向变异,从而改变其遗传性状,故A正确;
基因a导入成功后,将改变马铃薯原有的代谢,开辟新的代谢途径,并没有抑制原基因表达,故B错误;
Amy基因只是细菌DNA分子众多基因中的一个,故需把Amy基因分离出来,然后通过运载体导入受体细胞,并整合到受体细胞的DNA分子中,故C错误;
目的基因一般需要通过运载体导入受体细胞,故D错误。
14.下列关于蛋白质工程的说法,正确的是( )
A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B.蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
蛋白质工程实质是通过改变基因结构来改造蛋白质,操作水平是分子水平,操作对象为基因,故A、C错误;
蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子,故B正确;
天然蛋白质是通过已有的基因控制合成的,故D错误。
15.下表有关基因表达的选项中,不可能的是( )
基因
表达的细胞
表达产物
细菌抗虫蛋白基因
抗虫棉
叶肉细胞
细菌抗虫蛋白
B
人酪氨酸酶基因
正常人
皮肤细胞
人酪氨酸
动物胰岛
素基因
大肠杆菌
工程菌细胞
动物胰岛素
D
兔血红蛋
白基因
兔成熟
红细胞
兔血红蛋白
16.如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,下列有关的叙述中错误的是( )
A.基因工程的核心是基因表达载体的构建
B.可以利用人的皮肤细胞来完成①过程
C.过程②必需的酶是逆转录酶
D.在利用A、B获得C的过程中,必须用限制性核酸内切酶切割A和B,使它们产生相同的黏性末端
基因工程的基本过程可以概括为“四步曲”:
即获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定,其中基因表达载体的构建是其核心内容。
不能利用人的皮肤细胞来完成①过程,因为皮肤细胞中的胰岛素基因未表达(或未转录),不能形成胰岛素mRNA。
过程②必需的酶是逆转录酶。
在利用A、B获得C的过程中,必须用限制性核酸内切酶切割A和B,使它们产生相同的黏性末端,再加入DNA连接酶。
二、非选择题(共68分)
17.(8分)为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
请回答下列问题:
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,从陆地棉和拟南芥的__________中获取酶D基因和转运肽基因,所含三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如图甲所示。
则用________和________酶处理两个基因后,可得到____端与____端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入如图乙所示Ti质粒的TDNA中,构建______________________________并导入农杆菌中。
将获得的农杆菌接种在含______的固体培养基上筛选培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是____________________。
(4)进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过植物组织培养技术,可培育成转基因油菜植株。
用________________技术在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功转录。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。
酶D基因的A端和转运肽基因的D端都含有限制酶ClaⅠ的切割位点,因此可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后,得到A、D端相连的融合基因。
(2)农杆菌中的Ti质粒上的TDNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
根据农杆菌的这一特点,如果将目的基因插入到Ti质粒的TDNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
因此,将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的TDNA中,构建基因表达载体并导入农杆菌中。
由图可知,标记基因是四环素抗性基因,因此将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的浸染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞,进一步筛选后获得转基因油菜。
(4)检测目的基因是否转录出了mRNA可以采用分子杂交技术。
(1)基因文库 ClaⅠ DNA连接 A D
(2)基因表达载体(或“重组质粒”) 四环素 (3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞 (4)分子杂交
18.(8分)为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。
其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;
LacZ基因被SHH基因插入后不表达),请回答下列问题:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,________(填“需要”或“不需要”)启动子。
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为____________细胞,然后导入重组载体。
实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有__________基因。
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。
根据上述原理可以初步判断________(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与______________________形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。
(1)需要
(2)感受态 Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性) (3)白色 (4)SHH基因转录的mRNA
19.(10分)白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。
由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如下图所示,请回答有关问题:
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。
已知该基因的全部序列,科研人员可通过________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。
据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是______________________。
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaⅠ酶处理,得到酶切片段。
重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止______________________。
将未用去磷酸化酶处理的Bar基因与重组质粒1连接,获得重组质粒2。
获得的重组质粒2是下图中的______________。
(3)将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。
一段时间后用含有________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入____________酶,获得cDNA,再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,根据是否有相应产物生成判断毒蛋白基因在白僵菌体内是否完成__________。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
已知该基因的全部序列,科研人员可通过人工合成(或“化学合成”)法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。
据图分析,图中首先利用NcoⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒,然后再用DNA连接酶形成重组质粒,所以将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是NcoⅠ、BamHⅠ和DNA连接酶。
(2)利用两种限制酶可以防止目的基因和质粒自身连接。
如果Bar基因未用去磷酸化酶处理,则形成的黏性末端两端都存在游离的磷酸基团,而重组质粒1利用了去磷酸化酶处理,两端没有游离的磷酸基团,因此将两者连接,获得重组质粒2,即两端都不能完全连接,可以用图中的C表示。
(3)将重组质粒2与用钙离子处理处于感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。
一段时间后用含有草丁膦的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入逆转录酶,获得cDNA,再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,根据是否有相应产物生成判断毒蛋白基因在白僵菌体内是否完成转录。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的死亡害虫数,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
(1)人工合成(或“化学合成”) NcoⅠ、BamHⅠ和DNA连接酶
(2)重组质粒1酶切片段自身连接(或“相互连接”) C
(3)草丁膦
(4)逆转录 转录
(5)死亡害虫数
20.(10分)科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组,并在大肠杆菌中成功表达。
如图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。
请据图回答问题:
(1)步骤①和②中常用的工具酶是________________和________。
(2)图中质粒上有抗氨苄青霉素和抗四环素两个标记基因,经过①和②步骤后,有些质粒上的______________基因内插入了外源目的基因,形成重组质粒,由于目的基因的分隔使得该抗性基因失活。
(3)步骤③是____________________的过程,为了促进该过程,应该用________处理大肠杆菌。
(4)步骤④:
将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养,目的是筛选________________________________________________________________________,
能在C中生长的大肠杆菌有________种。
(5)步骤⑤:
用无菌牙签挑取C上的若干单个菌落,分别接种到D(含氨苄青霉素和四环素)和E(含四环素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。
含目的基因的菌落位于________(填“D”或“E”)上,请在图中相应的位置上圈出来。
能在含四环素的培养基上生长的一定是含四环素抗性基因的大肠杆菌。
而具有该基因的大肠杆菌不是具有质粒,就是具有重组质粒,因而能在C中生长的大肠杆菌有两种。
步骤⑤的目的是从在C中生长的两种大肠杆菌中筛选出含重组质粒(目的基因)的大肠杆菌。
E培养基的条件与C相同,因而从C上挑取的菌落依然完全能在E上生长。
而D培养基除了含有四环素外,还含有氨苄青霉素,这样使得含重组质粒(目的基因)的大肠杆菌无法生长,因为在构建重组质粒时,氨苄青霉素抗性基因已被破坏,而含完整质粒的大肠杆菌可以生长,因为完整的质粒中氨苄青霉素抗性基因是完好无损的。
由此判断,在E中出现,而在D中相应位置上不出现的菌落即为含有目的基因的菌落。
(1)限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶
(2)氨苄青霉素抗性 (3)将重组质粒(目的基因)导入大肠杆菌(受体细胞) CaCl2溶液 (4)含四环素抗性基因的大肠杆菌 两 (5)E 如图
21.(8分)下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图。
Ⅲ是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。
经分析,该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。
已知几种氨基酸的密码子:
甲硫氨酸(AUG)、甘氨酸(GGA)、丝氨酸(UCU)、酪氨酸(UAC)、精氨酸(AGA)、丙氨酸(GCU),请据图结合你所学过的知识回答以下问题:
(1)①步骤为________________,该过程是基因工程操作程序的核心,Ⅱ包括________、四环素抗性基因、启动子、终止子以及复制原点等。
将Ⅱ导入双子叶植物棉花受体细胞最常用的方法是________________。
(2)为在短时间内大量获得目的基因,可用________扩增的方法,其原理是________________。
(3)③过程的原理是________________________。
理论上,在该转基因植物自交产生的F1中,仍具有抗虫特性的植株占总数的________。
(4)图中合成的多肽,其前三个氨基酸的序列是____________________________。
(1)①步骤为构建基因表达载体,该过程是基因工程操作程序的核心;
Ⅱ是基因表达载体,包括抗虫基因(目的基因)、四环素抗性基因(标记基因)、启动子、终止子以及复制原点等;
由于农杆菌在自然条件下能感染双子叶植物和裸子植物,而且其中的Ti质粒上的TDNA可转移至受体细胞,并整合到受体细胞染色体的DNA上,所以将Ⅱ导入双子叶植物棉花受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法。
(2)为在短时间内大量获得目的基因,可用PCR扩增的方法;
其原理是DNA双链复制。
(3)③过程是将含抗虫基因的棉花受体细胞经过植物组织培养技术培养成转基因抗虫棉花植株的过程,其原理是植物细胞的全能性;
根据题意,培育成功的该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子(设为Aa,A表示抗虫基因,a代表没有抗虫基因),根据基因分离定律,在该转基因植物自交产生F1中,仍具有抗虫特性的植株(A_)占总数的3/4。
(4)合成的多肽中的氨基酸序列是由mRNA上的密码子决定的,mRNA上的前三个密码子是AUG(甲硫氨酸)、GCU(丙氨酸)和UCU(丝氨酸),因此图中合成的多肽,其前三个氨基酸的序列是甲硫氨酸—丙氨酸—丝氨酸。
(1)构建基因表达载体 抗虫基因 农杆菌转化法
(2)PCR DNA复制
(3)植物细胞的全能性 3/4
(4)甲硫氨酸—丙氨酸—丝氨酸
22.(8分)在人类的遗传病中,有一种重症联合免疫缺陷病(简称SCID),这种患者缺乏正常的人体免疫功能,只要稍被细菌或病毒感染,就会发病死亡。
经研究证实,SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶(简称ADA)的基因发生了突变。
目前,人们已经找到了治疗该疾病的方案,如图所示,请据图回答问题:
(1)在图示过程中,所用到的基因操作工具分别是______________________________
________________________________________________________________________。
(2)研究人员将带有正常ADA基因的细胞注入患者的淋巴细胞,而不是其他细胞,其原因是________________________________________________________________________
_______________________________________________________________
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