细胞工程知识点总结共10篇.docx
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细胞工程知识点总结共10篇
细胞工程知识点总结(共10篇)
:
知识点细胞工程基因工程知识点总结细胞工程知识点总结图细胞工程知识点框架
篇一:
细胞工程知识点及重点难点总结
第一章绪论
1、细胞工程的概念,广义的细胞工程,狭义的细胞工程,
?
细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。
?
广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术,狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。
2、细胞工程的研究内容(研究生物类型,实验操作对象)
?
根据研究生物类型不同,细胞工程可分为动物细胞工程、植物细胞工程、微生物细胞工程。
?
动物细胞工程包括:
细胞培养技术(包括组织培养、器官培养);细胞融合技术;胚胎工程技术(核移植、胚胎分割等);克隆技术(单细胞系克隆、器官克隆、个体克隆)。
?
植物细胞工程包括:
植物组织、器官培养技术;细胞培养技术;原生质体融合与培养技术;亚细胞水平的操作技术等。
3、细胞工程的重要应用(植物、动物)
?
植物细胞工程的应用:
脱毒和快速繁殖
细胞工程育种:
利用培养变异,筛选优良突变体
利用远缘杂交幼胚培养,获得杂种植株,克服其杂交不亲和性
利用细胞融合技术,克服远缘杂交不亲和性
倍性育种
离体种质保存
细胞培养生产有用物质
?
动物细胞工程的应用
动物细胞培养生产医药产品(单克隆抗体)
新品种培育
试管动物与婴儿
组织工程
珍稀动物资源的保存与保护
第二章细胞工程基础
1、细胞分化:
个体细胞发育过程中,后代细胞在形态、结构和生理功能上发生差异的过程。
2、发育潜能:
指细胞分化能力的强弱。
3、细胞全能性:
指细胞具有发育成完整个体的潜能。
4、细胞多能性:
指随着胚胎发育,有的体细胞失去全能性,具有分化出多种组织的潜能。
5、去分化:
又称脱分化,指某些条件下分化细胞不稳定,又回到未分化状态的这一过程
6、愈伤组织:
脱分化后的细胞,经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织。
愈伤组织的种类
胚性愈伤组织(Embryoneniccallus):
表面光滑、组织结构紧凑、细胞小、再生力强。
胚性愈伤组织容易形成胚状体,所以被称为胚性愈伤组织。
非胚性愈伤组织:
表面粗糙、组织结构疏松、细胞大。
第三章细胞工程实验室及实验基本操作(教材第二章)
1、什么是灭菌?
是么是消毒?
(P18)
灭菌是指杀灭或者去除物体表面和孔隙内的所有微生物,包括抵抗力极强的细菌芽胞。
消毒是指杀死物体上的病原微生物,但细菌芽胞和非病原微生物可能还存活。
2、常用的灭菌和消毒方法有哪些?
物理法
(一)紫外线
直接照射、表面灭菌、可消毒空气和培养用具(如塑料器皿),消毒的效力和距离有密切关系,故无菌室天花板一般不宜太高。
一般石菌室内空气、桌椅以及培养用具在紫外线有效消毒距离内,照射30分钟,可达到灭菌效果。
紫外线照射使用方便、消毒效果好;缺点是能产生臭氧,污染空气,且对未直接照射的部分无消毒效果。
(二)干热消毒
主要用于消毒玻璃器四周,干热、消毒的器皿干燥,易贮存。
但干热传导慢,需加温到160℃,保持90~120分钟,才能杀死芽孢,达到消毒目的。
消毒后不要立即打开箱门,防止冷空气忽然进入影响消毒效果和损坏玻璃器皿。
金属器械和橡胶制品不能用于干热消毒等。
(三)湿热消毒
即高压蒸气消毒,是最有效的一种方法。
布类、胶塞、金属器械、玻璃器皿以及某种液体都可以用这种方法。
(四)滤过消毒
不能高温高压灭菌的液体可以用此法,如动物组织的人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶系。
须选一定规格的滤器,液体滤过速度,且保证除菌效果的关键。
一般以肉眼可见液滴滴下为。
滤过后及时分装。
(五)煮沸消毒
急需要时的常规方法,金属器械、胶塞在水中煮沸20~30分钟,趁热倒去水分即可使用。
化学法
(一)消毒剂灭菌
来苏尔、新洁尔灭(1%)、70~75%酒精、安替福氏、贝氯酸钙、乳酸蒸气、环氧乙烷。
(二)抗菌素灭菌:
(三)熏蒸灭菌
3、什么是平衡盐溶液(BSS)?
平衡盐溶液(BalancedSaltSolution;BSS)
又称生理盐水或盐溶液。
具有维持渗透压,控制酸碱度的平衡作用,同时也能供给细胞中生存所需的能量和无机盐离子,用作冲洗组织和细胞,配制各种培养用液的基础溶液,也可用于短暂培养。
成分:
水,无机盐,葡萄糖组成。
4、什么是生物安全实验室?
目前,生物安全实验室的种类有哪些,各有什么特点。
5、动物细胞培养的天然培养基有哪些?
天然培养基
1.血浆
最常用的是鸡血浆,它具有一定的营养,与少量鸡胚浸出液混合后,有良好的凝固作用,利于支持细胞的生长。
缺点易液化,一般常用作各种细胞生长的基质。
2.鼠尾胶原
对维持细胞生长有良好作用。
由于鸡血浆存在一定缺点,人们曾试用了很多化药品,其中鼠尾胶原较好。
它能促进组织和细胞的附着,改善生长表面药性。
来源:
燃尾键,豚鼠真皮,牛的真皮和牛眼的水晶体,实验室常用大鼠尾制胶原。
3.胚胎浸出液
主要成分是大分子核蛋白和小分子氨基酸,有刺激细胞生长的作用。
在动物、细胞培养中应用最早,但由它而作了变到使用合成培养液,并渐渐被合成培养液所代替,但在研究中仍有应用价值。
常用的有鸡胚和牛胚。
4.血清
是动物用量最大的天然培养基。
血清含有丰富的营养物质,包括大分子的蛋白质和核酸。
动物细胞的生长和增殖需要血清。
实验证明血清对细胞附着和保护尚有明显作用,且能中和有毒物质的毒性,使细胞不受伤害。
血清种类很多,其中有小牛血清、胎牛血清、马血清、人胚胎血清等,胎牛血清比较理想,但不易得到。
目前各实验室多采用小牛血清。
目前已有出售小牛商品血清。
人血清一般都采用AB型血清,但价格昂贵,很少用。
5.血清代用品
血清的来源比较困难,而且成分复杂,人们努力寻找其替代品,其中有聚乙烯、吡咯咆酮(P、V、P)、蛋白胨、水解乳蛋白等,但都不如血清,因而没广泛使用。
第四章植物组织器官培养技术(教材第四、七、八章)
1、离体无性繁殖(propagationinvitro):
利用离体培养技术,将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养,在短期内获得大量遗传形状一致的个体的方法。
也称之为微繁(micropropagation)、快速繁殖(rapidcloneprogagation)。
2、繁殖系数(breedingcoefficient):
也叫增殖率,指每块外植体在一个培养周期内增殖的倍数.
3、简述离体无性繁殖的程序。
(1)无菌培养物制备,包括:
外植体的选择-外植体灭菌-接种-培养等基本过程。
(2)培养物的增殖
腋芽增殖:
培养方法简单,能高度保持遗传稳定性,能长期继代繁殖
不定芽增殖:
繁殖系数高,非洲紫罗兰用常规叶插法,每片叶只能产生几个或十几个芽,
但在组培条件下可一次形成几十至几百个芽,一年可以培养成千上万个小
植株。
遗传稳定性较好。
但继代次数有限。
培养物继代一定次数以后,不
定芽形成能力即减弱,需要重新建立起始无菌培养物。
此外,不定芽需要
进行生根培养才能形成真正的植株。
诱导不定芽一般需要同时加入外源生长素和细胞分裂素,二者的配比一般
是细胞分裂素要略高于生长素,其二者的总体使用浓度应尽可能的低,以
免产生过多的愈伤组织。
以保证繁殖品种的遗传稳定性。
胚状体增殖:
增长率高,双极性免去生根环节,但胚状体休眠的诱导和解除还难以把握,
其成苗率仍不高。
目前除一些特殊用途外(人工种子),这一途径还没有用于
快繁技术。
愈伤组织增殖:
所有的植物通过组织培养的方法均可以诱导愈伤组织,再进一步分化即可
获得小植株。
这一途径经历了组织培养技术的所有过程(愈伤组织诱导-愈
伤组织增殖-芽分化-生根-完整植株),它属于真正意义上的组织培养。
一切通过其它增殖方式不能成功的植物,均可以通过此途径获得组培苗。
其特点是成功率高,繁殖系数大,但遗传稳定性较差。
对品种要求遗传稳
定性高的作物一般不采用这一途径快繁
原球茎增殖:
细胞或组织培养经原球茎途径分化成植株。
大部分兰花属于这一类型,即兰
花的各个部分的离体组织都能诱导形成原球茎,再经培养分化形成植株。
原
球茎是兰花种子萌发时产生的呈珠粒状、缩短的、类似嫩茎的器官。
(3)生根培养:
一种是在固体培养基上诱导生根。
当试管苗长到2~3厘米高时,将它从基
部切下,转移到固体培养基上生根(生根培养基一般要求降低矿物营养的浓
度,提高生长素的浓度,具体应根据植物不同而定)
另一种是浸泡的方法,将切下的无根试管苗泡在含有高浓度生长素溶液中,生
长素浓度为100毫克/升左右,浸泡时间从几小时到1天,然后取出接种于不
加任何激素的MS培养基上或者扦插在人工基质上,十天左右即可生根。
(4)炼苗和移栽:
将瓶盖打开,打破无菌环境,湿度逐渐下降,光照逐渐加强,使之形成新的功能强的根和叶片。
一般炼苗时间为2—3d。
移栽时应注意的问题:
a、防止菌类滋生;b、保持小苗水分供给平衡
(5)再生植株的鉴定
4、简述当前脱除植物病毒的方法及原理。
茎尖培养脱毒法;热处理脱毒法;微体嫁接离体培养脱毒法;珠心组织培养法;愈伤组织脱毒
茎尖脱毒:
依据:
病毒在植物体内分布是不均一的,越接近生长点约(0.1-1mm区域),病毒
浓度越稀,因此有可能采用小的茎尖离体培养而脱除植物病毒。
热处理脱毒法:
①热处理不能杀死病毒。
只能钝化病毒的活性,使病毒在植物体内增殖减缓或增殖停止,而失去浸染能力。
②热处理是一种物理效应,可以加速植物细胞的分裂,使植物细胞在与病毒繁殖的竞争中取胜。
微体嫁接离体培养脱毒法:
同茎尖脱毒。
珠心组织培养法:
一般认为病毒是通过维管组织传播的,珠心组织与维管系统没有直接联系,
因此珠心组织培养可获得无病毒植株。
愈伤组织脱毒:
病毒在植物体内不同器官或同一器官不同组织中分布不均匀,由那些无病毒细胞产生的愈伤组织就是获得无病毒苗的基础。
5、简述脱毒效果如何检测
A指示植物鉴定(indicatortestplants)所谓指示植物是指具有能够辨别某种病毒的专
篇二:
专题2__细胞工程知识点总结
(一)植物细胞工程
1.理论基础(原理):
细胞全能性
全能性表达的难易程度:
受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞
2.植物组织培养技术
(1)过程:
离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体
(2)用途:
微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细
胞产物的工厂化生产。
(3)地位:
是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的
最后一道工序。
3.植物体细胞杂交技术
(1)过程:
(2)诱导融合的方法:
物理法包括离心、振动、电刺激等。
化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。
(3)意义:
克服了远缘杂交不亲和的障碍。
(二)动物细胞工程1.动物细胞培养
(1)概念:
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后
放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
(2)动物细胞培养的流程:
取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
(3)细胞贴壁和接触抑制:
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这
种现象称为细胞的接触抑制。
(4)动物细胞培养需要满足以下条件
①无菌、无毒的环境:
培养液应进行无菌处理。
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。
此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
1
②营养:
合成培养基成分:
糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
通常需加入血清、血浆等天然成分。
③温度:
适宜温度:
哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:
7.2~7.4。
④气体环境:
95%空气+5%CO2。
O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。
(5)动物细胞培养技术的应用:
制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。
2.动物体细胞核移植技术和克隆动物
(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难)。
(2)选用去核卵(母)细胞的原因:
卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富。
(3)体细胞核移植的大致过程是:
(右图)
核移植胚胎移植
(4)体细胞核移植技术的应用:
①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;②保护濒危物种,增大存活数量;③生产珍贵的医用蛋白;④作为异种移植的供体;⑤用于组织器官的移植等。
(5)体细胞核移植技术存在的问题:
克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。
3.动物细胞融合
(1)动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。
(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。
(3)动物细胞融合的意义:
克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。
2
(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:
(1)抗体:
一个B
淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
(2
(3)杂交瘤细胞的特点:
既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。
(4)单克隆抗体的优点:
特异性强,灵敏度高,并能大量制备。
(5)单克隆抗体的作用:
①作为诊断试剂:
准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物:
主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”,也有少量用于治疗其它疾病。
3
篇三:
细胞工程知识点总结
细胞工程:
以生物细胞或组织为研究对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的的利用或改造生物遗传特性,以获得特定细胞、组织、产品或新型物种的一门综合性学科。
1.微繁殖:
是指在离体培养条件下、将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行无菌培养,经过不断地切割和重复培养,使其增殖并再生形成完整植株,在短期内获得大量遗传性均一的个体的方法。
2.繁殖系数:
经一次增值培养或在一定时间段内由一个繁殖体所增殖获得的总繁殖体数或苗数。
3.玻璃化:
也称超水化作用,是离体培养过程中试管苗发生形态、生理和代谢异常的现象。
4.褐变:
是指组织培养中,由于材料被切割而使多酚氧化酶活化将组织中的酚类物质氧化形成棕褐色的醌类物质,并向培养基中扩散,抑制培养物生长甚至导致其死亡的现象。
5.原球茎:
兰科植物的种子在萌发初期并不出现胚根,只是胚逐渐膨大,以后种皮的一端破裂,膨大的胚呈小圆锥状,称作原球茎。
6.茎尖分生组织:
指茎尖最幼龄叶原基上方的由2或3层分生细胞组成的很小区域、一般最大直径不超过0.1mm,长度0.25mm,最小的茎尖长度仅有几十微米,有时也称顶端分生组织。
7.不定芽:
相对于顶芽和腋芽、由植物的其他部位或器官、组织上通过器官发生重新形成的、无固定着生位置的芽统称为不定芽。
细胞细胞工程知识点绪论研究内容(根据操作对象):
1)器官组织和细胞培养2)原生质体培养3)植物胚
胎培养4)动物胚胎工程5)转基因动植物6)胚胎干细胞7)染色体工程研究内容(研究水平);个体、器官、组织、细胞、亚细胞、分子等不同研究层次动物细胞发展经历了哪些阶段?
答:
①细胞培养技术②细胞融合技术③动物胚胎移植技术④体外受精技术⑤动物克隆技术⑥转基因动物技术⑦胚胎干细胞技术生物工程:
1)发酵工程2)基因工程3)酶工程4)细胞工程5)蛋白质工程
(第二章没有放进来!
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)
第三章培养原理
细胞学说:
1838年,主要观点:
细胞是生物体的基本结构单位,由它构成整个生物个体。
植物细胞的全能性:
每个植物细胞都具有该物种的全部遗传信息,在适宜条件下具有发育成完整植株的能力。
植物细胞全能性含义:
(1)每个植物细胞都具有它母性的全部遗传特征。
(2)每一个细胞都可以在特定条件下发育成为与母体一样的植株。
全能性的实现:
一个已分化的细胞要实现其全能性两个过程:
一是脱分化,使外植体的细胞转变成胚性细胞,从而获得不断分裂的能力;二是再分化,使胚性细胞分化形成器官。
条件:
①具有较强全能性的细胞从植物组织抑制性影响下解脱出来,使其处于独立发育的离体条件下;②赋予离体细胞一定刺激,包括营养物质、植物激素、光周期、温度、酸碱度等。
途径:
1)以植物的体细胞为培养材料,可以诱导形成完整植株。
2)以植物的性细胞为培养材料,可以诱导形成完整植株。
3)用酶解法去除植物细胞的细胞壁,培养裸露的原生质体,原生质体发育成植物体。
4)加入促溶剂,可以诱导两个不同种的原生质体融合,继续培养可发育成杂种植株。
5)将外源基因通过不同基因载体引入植物细胞,使植物细胞在分子水平上发生修饰,经离体培养后可再生成具有新性状的植物体。
(转基因)
植物细胞的分化:
由发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化出形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程。
脱分化:
在某些特定条件下,分化细胞的表型也不稳定,其基因活动模式也发生可逆的变化,细胞脱离原状态而回复到分生状态。
细胞脱分化的结果产生愈伤组织。
成熟细胞分生细胞多细胞团形态建成完整植株
外植体离体培养到再分化形成各器官三个时期:
(1)诱导期
(2)分裂期(3)分化期
植物愈伤组织:
植物受到机械、动物或微生物等伤害后,创伤部位的细胞脱分化而不断增值形成松散排列、无特定结构和功能的非器官化组织。
愈伤组织的类型:
胚型紧密型(胚性质地较坚实、乳白色或黄色、表面有球形颗粒)易碎型非胚性(松散易碎、黄的或褐色、表面粗糙、生长迅速)
Ⅰ型(乳白色或绿色、结构致密、复杂多样、生长缓慢、不宜长时间保持胚性)。
Ⅱ型(淡黄色或黄色、结构松散、松软、呈颗粒状生长较快、能长时间保持胚性。
)Ⅲ型(白色或灰色透明水渍状,松软无结构,形似或冰针絮状,继代易褐化而死亡。
)
愈伤组织的细胞组成(分生细胞、薄壁细胞、厚壁细胞和管状细胞。
)分生细胞存在于分生组织和胚状体内,其细胞小,细胞核占比例大,细胞质着色深,无或少有液泡。
薄壁细胞较大,细胞非圆形,核小,且被中央大液泡挤到边缘,很多薄壁细胞中不见核的存在,部分薄壁细胞已解体,胞质内无或残留少量物质,残留物着色均一。
厚壁细胞存在于愈伤组织表面,其细胞质解体,细胞壁是通过木质化或栓质化加厚而形成的。
管状分子是由薄壁细胞经细胞壁木质化次生加厚形成的,有环纹、网纹和孔纹三种类型。
特性:
异质性、嵌合性、变异性
继代培养;固体培养简便易行,但有缺点:
①由于被培养愈伤组织仅一部分和培养基接触,在培养过程中,接触部位的营养物质很快被吸收掉,而从培养基其他区域补充较慢,造成愈伤组织生长不平衡。
②愈伤组织在培养过程中排出的有害物质在培养物附近积累。
③在静止放置情况下,受重力作用和单向受光等因素影响,愈伤组织极易出现极化和分化,产生微管分子和结节等分化细胞,最终难以获得均一的细胞群体。
液体培养的优点:
①在液体培养基中愈伤组织一手营养均衡,易获得均一的细胞群体;②愈伤组织块在液体震荡培养中会分裂成更小的细胞团或单细胞,因而产生更大的吸收表面积。
在液体培养基中,体细胞胚胎发生比固体培养基更容易。
被子植物对愈伤组织的诱导较敏感;双子叶植物比单子叶植物容易诱导成功;草本植物比木本植物易产生愈伤组织及进行其后的形态建成。
极性:
在器官、组织甚至细胞中,在不同的轴向上存在某种形态结构和生理生化上的梯度差异。
造成了细胞内生活物质的定向和定位。
1.生长素:
IAANAAIBA2-4D
2.细胞分裂素:
KPZP玉米素6-BA促进细胞分裂
调节作用发生在有丝分裂准备期,即G2期。
3.脱落酸:
ABA低水平的ABA有利于胚性愈伤组织的形成。
ABA的效应与外植体的发育时期有关。
4.乙烯:
Eth乙烯抑制剂可促进高度胚性愈伤组织的形成。
培养条件的影响P48
器官发生:
植物根、茎、叶、花、果实等器官的分化与形成。
生长素和细胞分裂素之间的平衡控制器官发生。
发生方式:
直接发生途径:
直接产生不定芽。
间接发生途径:
先产生愈伤组织生长中心形成器官原基及器官形成。
影响器官发生的因素:
体细胞胚胎:
离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物。
(SE)
①体细胞胚是离体培养的产物,只限于离体培养范围使用,以区别于无融合生殖胚。
②体细胞胚起源于非合子细胞,区别于由受精卵发育而成的合子胚。
③体细胞经过了胚胎发育过程,具有胚根、胚芽和胚轴的完整结构。
与合子胚区别:
①无真正胚柄②子叶常不规范③体积明显小④无明显的休眠期,心形期后可直接分化为植株。
与器官发生的比较:
一:
体细胞胚最根本特征两极性:
即在发育的早期阶段从方向相反的两端分化出茎端和根端;器官发生是单极性的。
二:
体细胞胚的维管组织分布是独立的“Y”字形结构,与外植体组织无结构上的联系,出现所谓的生殖隔离现象。
三:
由体细胞胚形成的再生植株其遗传性相对稳定,变异性远小于由器官发生途径形成的再生植株。
来源1.直接从外植体上产生体细胞胚(在一定的培养条件下,许多离体培养的植物器官外植体表面已分化细胞脱分化后均可产生胚状体。
)
2.由愈伤组织产生(离体培养时,存在于愈伤组织内部的一些薄壁细胞开始分裂,形成一个球形的分生中心,球形胚进一步发育成心形胚至鱼雷形胚。
)3.悬浮培养中由胚性细胞复合体表面产生。
4.由悬浮培养中游离的单细胞产生。
5.由单倍体细胞产生。
影响体细胞胚发生因素
(1)氮源
(2)生长素(3)组织起源P54
人工种子技术:
通过将植物组织培养中所产生的体细胞胚胎或胚芽等包埋在“人工胚乳”和“人工种皮”里,制成的具有播种功能、类似天然种子的颗粒。
结构:
1体细胞胚:
胚状体、愈伤原球茎、不定芽、顶芽、腋芽
2人工胚乳:
养分3人工种皮:
防机械损伤、保护、干燥
意义:
1)人工种子能代替试管苗的快速繁殖,体细胞胚具有数量多、繁殖快、结构完整的特点。
2)体细胞胚是由无性繁殖体系产生的。
固定杂种优势。
3)使自然条件下不结实或种子生产成本昂贵的植物得以繁殖。
4)可以加入植物激素及有益微生物或抗虫、抗病农药,而赋予人工种子比自然种子更优越的特性。
控制胚性细胞同步化的方法:
1.抑制剂法促进细胞同步分裂
2.低温处理促进细胞同步分裂3.渗透压控制同步化法
4.同步胚的分段收集筛选法5.通气法
问题:
①高频诱导②可能发生变异③人工种皮还存在缺陷
④储存、发芽技术不够成熟⑤工厂化生产配套设施成本过高
2、愈伤组织的形成大致可分为
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