有丝分裂实验的改进.doc
- 文档编号:6370899
- 上传时间:2023-05-10
- 格式:DOC
- 页数:2
- 大小:32KB
有丝分裂实验的改进.doc
《有丝分裂实验的改进.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《有丝分裂实验的改进.doc(2页珍藏版)》请在冰点文库上搜索。
“观察植物细胞有丝分裂”实验的改进
陈远毅(浙江省,温岭市第五中学317500)
1取材和培养
1.1实验材料:
大蒜比洋葱实验效果更好
我们用选洋葱和大蒜作为试验材料,在18℃左右的恒温箱中培养,发现洋葱非常容易坏,且生根量极少。
大蒜几乎不坏,且一个蒜瓣的生根量就相当于一个洋葱的生根量,因大蒜的蒜瓣之间有空隙,不易缺氧,避免因缺氧造成的腐烂现象。
另外大蒜的染色体数为16,在观察染色体时候也比较方便。
1.2取材时机:
中午11:
00点~14:
00点时取材较好
本实验对材料的要求是最好用分裂相多的材料作为实验材料。
我们通过对早6:
00点~晚22:
00点之间的不同时段做对比实验得出:
在23~28℃温度下,中午11:
00点~14:
00点时取材最好,观察到的分裂相最多,其它时间段相对较少。
1.3培养时间:
根尖长到0.5-1cm后取材较好
不管用洋葱还是大蒜作为实验材料,等根尖长长到0.5-1cm后就可剪取0.3cm进行实验,这样就能大大缩短培养时间,并且实验效果也好,因为幼根的根尖细胞分裂更加旺盛,并且显微镜下也容易区分。
如果按照书本上的实验,不仅培养时间长,而且根尖的剪取长度也很难把握。
1.4培养温度:
2℃左右效果最好
本人对洋葱和大蒜的根尖分别作了-2℃、0℃、2℃、4℃、6℃、8℃的24h低温根尖培养。
在低温处理中,-2℃或0℃处理后,镜检时发现几乎无细胞分裂现象,2℃时,只有少数细胞处于分裂期,且分裂时期不明显,4℃时,不仅积累了很多前、中、后、末期的细胞,而且染色体比较粗短,典型的分裂相大增,在分生区内,平均每个视野中少则能观察到3~4个分裂相,多则可见十几个分裂相,6℃时分裂期细胞数目减少,8℃时分裂期细胞数目比6℃时更少。
2材料的固定保存
由于受教学进度的限制,不能保证上课时根尖正处于分裂相最多的时期,这就需要把处在细胞分裂旺盛期的根尖随时取下来,进行固定处理。
具体有以下两种操作方法:
方法一:
把剪取的根尖放入盛有固定液(95%的酒精:
99%的冰醋酸=3:
1)的培养皿内固定12~24h,然后取出漂洗,通过用不同体积分数的酒精(70%、95%、无水)漂洗不同的时间,取出用体积分数为70%的酒精漂洗1h以上。
然后把根尖保存在70%酒精中。
方法二:
把剪取的根尖放入卡诺固定液(纯酒精:
氯仿:
冰醋酸=12:
6:
2)中固定1h,然后把根尖保存在70%酒精中。
3解离后的漂洗方法的改进
解离后的根尖,必须漂洗干净,以便能够着色。
而教材中的漂洗时间为10min。
为缩短时间,可以将解离后的根尖放入盛有清水的小烧杯中,用玻璃棒不断搅拌,使根尖上附着的盐酸加速溶解,约2-3分钟后,再将根尖放入另一盛有清水的水洗杯中,漂洗一下即可。
4染色液的改进
我们在实验中发现质量浓度为0.01g/mL的龙胆紫染液易把根尖都染成深紫色,较难观察清楚有丝分裂各时期和染色体行为变化,因此我们将质量浓度为0.01g/mL的龙胆紫染液进行稀释。
因为醋酸能加强细胞核染色体的选择着色,所以我们选择用冰醋酸进行稀释,通过对几种不同浓度的稀释液(50%冰醋酸、20%、10%冰醋酸、4%冰醋酸)进行不同浓度的稀释比较,最后得出:
用10%的冰醋酸以3:
1的比例稀释后染色效果最好。
5压片方法的改进
为了减少细胞重叠,保证压片的质量,对于较粗的根尖不宜让学生直接压片,最好是把较粗的根尖纵切成2~3片再压片。
可以用双面刀片在萝卜上割一个根尖长短相当的缝隙,然后用镊子把根尖放入其中,再用左手压紧,右手用刀片把根尖纵切成2~3片,经纵切后的根尖压片效果非常理想。
不但易于观察,同时也能缩短时间,提高实验效率。
(如果在解离之前纵切还能进一步缩短解离、漂洗、染色、再漂洗的时间,从而进一步提高实验效率。
)
取染好的洋葱根尖,放在载玻片上,滴一滴清水盖上盖玻片,用吸水纸包上整个装片用拇指轻压,使根尖细胞分散充分。
这样不但能将压片过程中渗出来的水吸去,而且更加不容易使根尖和盖玻片移动。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 有丝分裂 实验 改进