酱腌菜检测作业指导书.docx
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酱腌菜检测作业指导书
第一章水分的测定
第二章食盐的测定第三章总酸的测定
还原糖和总糖的测定
第五章
二氧化硫残留的检测
11
第六章亚硝酸盐和硝酸盐的测定
12
16
18
第七章总碑的测定第八章铅的测定
第九章
大肠菌群的检测
20
25
29
第十章第十一章沙门氏菌检验
第一章水分的测定
执行标准:
GB5009.3—2011食品安全国家标准食品屮水分的测定
第一法 直接干燥法
1原理
利用食晶中水分的物理性质,在101.3kPa(一个大气压),温度101°C〜105°C下采用挥发方法测定样品中十燥减失的垂量,包插吸湿水、部分结晶水和该条件下能挥发的物质,再通过干燥前后的称量数值计算出水分的含虽。
2试剂和材料
除非另有规定,木方法屮所用试剂均为分析纯。
2.1盐酸(优级纯)、氢氧化钠(NaOH)(优级纯)、盐酸溶液(6mol/L)(量取50mL盐酸,加水稀释至100mL)、氢氧化钠溶液(6mol/L)(称取24g氢氧化钠,加水溶解并稀释至100mL)、海砂(取用水洗去泥土的海砂或河砂,先用盐酸煮沸0.5h,用水洗至屮性,再用氢氧化钠溶液煮沸0.5h,用水洗至中性,经105CT燥备用)
3仪器和设备
扁形铝制或玻璃制称量瓶、电热恒温十燥箱、干燥器(內附有效干燥剂)、天平(感量为0.lmg)
4分析步骤
4.1固体试样:
取洁净铝制或玻璃制的扁形称量瓶,置于101C〜105£干燥箱屮,瓶盖斜支于瓶边,加热l.Oh,収出盖好,置T•燥器内冷却0.5h,称量,并重复T燥至前后两次质量差不超过2nig,即为恒重。
将混合均匀的试样迅速磨细金颗粒小于2mm,不易研僭的样品应尽可能切碎,称取2g〜10g试样(精确至0.0001g),放入此称量瓶屮,试样厚度不超过5mm,如为疏松试样,厚度不超过10mm,加盖,精密称量后,置101°C〜105°C干燥箱中,瓶盖斜支于瓶边,干燥2h〜4h后,盖好取出,放入T•燥器内冷却0.5h后称量。
然后再放入101°C〜105°C干燥箱屮干燥lh左右,取出,放入干燥器内冷却0.5h后再称量。
并重复以上操作至前后两次质量差不超过加g,即为恒重。
(注:
两次恒重值在授后计算中,取最后一次的称量值。
)
4.2半固体或液体试样:
取洁净的称量瓶,内加10g海砂及一根小玻棒,置于101°C〜105°CT•燥箱屮,T燥1.Oh后取出,放入T•燥器内冷却0.5h后称量,并重复T•燥至恒重。
然后称取5g〜10g试样(精确至O.OOOlg),置于蒸发1111中,用小玻棒搅匀放在沸水浴上蒸干,并随时搅拌,擦去血底的水滴,置101°C〜105°C干燥箱屮干燥4h后盖好取出,放入干燥器内冷却0.5h后称量。
以下按4.1口〃然后再放入〜105°C干燥箱中干燥1h左右〃起依法操作。
5分析结果的表述
试样中的水分的含量按式
(1)进行计算。
(1)
X100
式中:
X——试样中水分的含最,单位为克每百克(g/100g);
ml——称量瓶(加海砂、玻棒)和试样的质量,单位为克(g);
m2——称量瓶(加海砂、玻棒)和试样干燥示的质量,单位为克(g);
m3——称量瓶(加海砂、玻棒)的质量,单位为克(g)o
水分含量^lg/100g时,计算结果保留三位有效数字;水分含量Vlg/100g时,结果保留两位有效数字。
6精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。
第二法减压干燥法
7原理
利用食品中水分的物理性质,在达到40kPa〜53kPa压力后加热至60°C±5°C,采用减压烘干方法去除试样屮的水分,再通过烘干前后的称蜃数值计算岀水分的含罐。
8仪器和设备
真空干燥箱、扁形铝制或玻璃制称量瓶、干燥器(内附有效干燥剂)、天平(感量为0.1mg)
9分析步骤
9.1试样的制备:
粉末和结晶试样直接称取;较人块硬糖经研钵粉碎,混匀备用。
9.2测定:
取已恒重的称量瓶称取约2g〜10g(精确至0.OOOlg)试样,放入真空干燥箱内,将真空干燥箱连接真空泵,抽出真空干燥箱内空气(所盂压力一般为40kPa^53kPa),并同时加热至所需温度60°C±5°Co关闭真空泵上的活塞,停止抽气,使真空干燥箱内保持一定的温度和压力,经4h后,打开活塞,使空气经干燥装置缓缓通入至真空干燥箱内,待压力恢复正常后再打开。
取出称量瓶,放入干燥器屮0・5h后称量,并重复以上操作至前后两次质量差不超过加g,即为恒重。
10分析结果的表述
同50
11精密度
在重复性条件卜-获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
第三法蒸镭法
12原理
利用食品中水分的物理化学性质,使用水分测定器将食品中的水分少甲苯或二甲苯共同蒸出,根据接收的水的体积计算出试样中水分的含量。
本方法适用于含较多其他挥发性物质的食品,如油脂、香辛料等。
13试剂和材料
甲苯或二甲苯(化学纯):
取甲苯或二甲苯,先以水饱和后,分去水层,进行蒸係,收集馆出液备用。
14仪器和设备
14.1水分测定器:
如图1所示(带可调电热套)。
水分接收管容量5mL,最小刻度值0.ImL,容量误差小于0.ImLo
1.250mL蒸懈瓶;2.水分接收管,有刻度;3.冷凝管。
图1水分测定器
14.2天平:
感量为0.lmgo
15分析步骤
准确称取适量试样(应使最终蒸出的水在2mL〜5mL,但最多取样量不得超过蒸係瓶的2/3),放入250mL锥形瓶中,加入新蒸憾的甲苯(或二甲苯)75mL,连接冷凝管与水分接收管,从冷凝管顶端注入甲苯,装满水分接收管。
加热慢慢蒸憎,使每秒钟的懈出液为两滴,待人部分水分蒸出后,加速蒸馆约每秒钟4滴,当水分全部蒸出后,接收管内的水分体积不再增加时,从冷凝管顶端加入甲苯冲洗。
如冷凝管壁附有水滴,可用附有小橡皮头的铜丝擦卜",再蒸镭片刻至接收管上部及冷凝管壁无水滴附着,接收管水平面保持lOmin不变为蒸憎终点,读取接收管水层的容积。
16分析结果的表述
试样中水分的含量按式
(2)进行计算。
V
X=—xlOO
(2)
m
式屮:
X——试样中水分的含量,单位为毫升每百克(mL/100g)(或按水在20°C的密度0.998,20g/mL计算质量);
V——接收管内水的体积,单位为亳升(mL);
m——试样的质量,单位为克(g)o
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结來保留三位有效数字。
17精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
第四法卡尔•费休法
18原理
根据碘能与水和二氧化硫发生化学反应,在有毗睫和甲醇共存时,lmol碘只与lmol水作用,反应式如下:
C5H5N*21+C5H5N・S02+C5H5N+H20+CH30H2C5H5N・HI+C5H6N[S04CH3]
卡尔•费休水分测定法乂分为库仑法和容量法。
库仑法测定的碘是通过化学反应产牛的,只要电解液中存在水,所产生的碘就会和水以1:
1的关系按照化学反应式进行反应。
当所有的水都参与了化学反应,过最的碘就会在电极的阳极区域形成,反应终止。
容量法测定的碘是作为滴定剂加入的,滴定剂屮碘的浓度是己知的,根据消耗滴定剂的体积,计算消耗碘的量,从而计量出被测物质水的含量。
19试剂和材料
卡尔•费休试剂、无水甲醇(C1140):
优级纯
卡尔•费休水分测定仪、天平(感量为0.1mg).
21分析步骤
21.1卡尔•费休试剂的标定(容量法)
在反应瓶中加一定体积(浸没钳电极)的甲醇,在搅拌下用卡尔•费休试剂滴定至终点。
加入10mg水(精确至0.0001g),滴定至终点并记录卡尔•费休试剂的用量(V)。
卡尔•费休试剂的滴定度按式(3)计算:
式中:
P—卡尔・费休试剂的滴定度,单位为毫克每毫升(mg/mL):
.1/—水的质量,单位为毫克(mg);
V-—滴定水消耗的卡尔・费休试剂的用量,单位为毫升(mL)。
21.2试样前处理
可粉碎的固休试样耍尽量粉碎,使之均匀。
不易粉碎的试样町切碎。
21.3试样中水分的测定
于反应瓶中加一定体积的甲醇或卡尔・费休测定仪中规定的溶剂浸没钳电极,在搅拌下用卡尔・费休试剂滴定至终点。
迅速将易溶于上述溶剂的试样直接加入滴定杯屮;对于不易溶解的试样,应采用对滴定杯进行加热或加入己测定水分的具他溶剂辅助溶解后川卡尔•费休试剂滴定至终点。
建议采用库仑法测定试样中的禽水最应人于log,容量法应人于lOOgo对于某些需要较长时间滴定的试样,需要扣除其漂移蜃。
21.4漂移量的测定
在滴定杯中加入与测定样品一致的溶剂,并滴定至终点,放置不少于lOmin后再滴定至终点,两次滴定之间的单位时间内的体积变化即为漂移最(D)。
22分析结果的表述
固体试样中水分的含量按式(4),液体试样中水分的含量按式(5)进行计算。
X=(J1~L>xt^xJx100 (4)
M
X=C,1 x100 (5)
JP
式中:
X——试样中水分的含量,单位为克每百克(g/100g);
VI——滴定样品时卡尔•费休试剂体积,单位为毫升(mL);
T——卡尔•费休试剂的滴定度,单位为克每毫升(g/mL);
M 样品质量,单位为克(g);
V2——液体样品体积,单位为毫升(mL);
D—漂移量,单位为毫升每分蚀(mL/min);
t——滴定时所消耗的时间,单位为分钟(min);
——液体样品的密度,单位为克每亳升(g/mL)o
水分含量^lg/100g时•,计算结果保留三位有效数字;水分含量 23精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 第二章食盐的测定 执行标准: GB124572008食品中氯化钠的测定 宜接沉淀肩定法 A.1方法提要 样品螳处理后•以辂戲钾为指示剂(摩尔法儿用硝啟银标扈瀬定溶液滴定试液中的盘化钠.根据硝1»悭标准満定溶敲的消耗・,廿冥食品中氯化钢的含*. A.2试剂和君液 <2.1试剂和分析用水 除非另有4定•朋有试刑均使用分析纯试刑: 分析用水应符合GB/T6682规定的二级水規格. A.2.2査白廣说淀割 按3・2・3配制. A.2.3乙Bfg«(80%) 按3.N5配制. A.2.45%協砂禅奔酒 称取SgttB钾、溶于95tnL水中. A.2.50.1®ol/L硝酸锻标准廉定笊液 配制2按3・2・6配制. 标定,称取0.05K-0.10官基准试剂氯化讲(或经5001D-6001C灼烧至恒重的分析纯软化钠)•精«^0.0002g,于25QmL隹带瓶屮•用妁70mL水整鮮血人LndL15%的辂IB钾聲槪(甩2.4).剧烈摇动时,用硝酸银标准満定S»(A.2.5>at定至红黄色(保持1min不圈色).记录消耗碍酸银标椎灣定毎液的体积的 碼fl? 银極准滴定瞎毓粮度的矗就數值“■草位为录尔每卉Cmol/L),按式QV1)计算| 10.05844XV« ' 玄屮: 0,05844——与1・佃mL硝酸樂标准滴定®«[e(AgNOr)=1.000mol/L]^当的盘化啊的质*: 的数值、单位为克5” Vi—濟定试槪时渭住硝醴馄标准滴定溶液的体枳的数值•单位为臺升(mLh眄——U化钠抽煲量的数值,单位为克S). A.2.6D.1%氢氧化辅謡酒 称取1官氢買尢衲•陪于1000mL水中. 人2・7 1%«tt乙尊涪液 称取1&翳駄,溶于劎ttlL95%乙專中•用水稀释至100mL, A.3傥器和恢备 B3.3. A.4试律的制备 按3.4Mfr, A.5试液的■备 按3・$制备. 上6.1pH6.5-10.5«试滾: 取含有25mg-50rag氯化诺的试祓(A.5),于250mL«形瓶中.加人50mL水和1mL5%恪醉钾幣臧(甩2.4).以下按A,2・5标定步■操捽,记录消耗61mol/L硏酸褪标准滴定壇酸的休积的数值(齐)■ A.6.2pH小于6,的试戒: 取含有25mg〜50mg氯化钠的试SCA.5),于250mL憔影穎中.和5DmL水和0.2mLl^WBti§St(A.2. 1%氢氧化钠fflF» 5%1&«钾陪蔽乙心・以下按A.2.5标定步暖援作•记承消耗81n;0]/L琳I®银标准就定榕液的体积的敷值(VJ. A-6.3空白afttmSOmL水代祥试臧•加1讥5%常咸钾溶臧(甩2,4).以下在甩2・5标定步H操作・记录清耗0.1mol/L硝战课标准漏定辭液的体枳数值(VI0)• A.7结果计算 仗品中氯化柄的含■以质■分数禺卄•数值以%表示•袪式(A.2)计算: X、■°呷844心M-/xKp%ig (扎幺) Mi 0.05844——与1.00mL硝酸银标確篙定務酒[HAwNOJnl.MOmol/Lj相当的氯牝钠的质■: 數值•单位为克 “——荫战银标准滴定帯叢啟度的准确的数值•单位为摩尔毎升(mol/Lh V,一一濟定试液时"耗硝Bft愎标庖満立溶祓的体枳的数值,单位为左升GnL" V10——空白试捡消样硝強锻标准漓定溶液的体积的社值•单位为 K,——希畀倍数音 叫一试律的质量的数值■单位为克(g儿 计算结蜃表示到小数点后两位. VB允许菱 同一试峥两次平行溃定结果之差,毎100g试样不得.超过0.2g. 1试剂 硝酸银标准溶液(C(AgW)3)=0.1000m()l/lh按GB601规定配制 铭酸钾指示剂(100“1): 称取10g銘酸钾用少量水溶解后定容至lOOmlo 2样品处理 样品经切碎、研磨、混合均匀后,称取5.OOOg〜lO.OOOg,放入250ml烧杯中,加入蒸馆水50ml〜80ml加热近沸后浸泡半小时,冷却,定容至100ml或200ml,然后用滤纸过滤,此滤液为样品稀释液,供测定用。 3测定 精确吸取稀释液2.00ml,加入三角瓶中,加入蒸饰水50ml,加100g/l酸钾指示剂0.5ml,用0.1000mol/l硝酸银标准溶液滴定至刚显砖红色即为终点。 记下耗用毫升数V。 4计算 (V-Vo)XcX0.0585 X100 2X 式屮: X2——样品屮食盐(以NaCl计)含量,g/100ml C——硝酸银标准溶液实际浓度,mol/1; V——样品耗用硝酸银标准溶液的体积,ml; V0——空白耗用硝酸银标准溶液的体积,ml; 0.0585——与1.00ml硝酸银标准滴定溶液C(AgN03)=l.000mol/l)相当的氯化钠的重量,g; W—样品质量,g; S——样品稀释液体积,mlo 允许误差: 0.20g/100g 第三章总酸的测定 GB/T5009.51-2003非发酵性豆制品及面筋卫生标准的分析方法 1原理 豆制品屮含有多种有机酸,用氢氧化钠标准溶液滴定,以乳酸计算。 2试剂 氢氧化钠标准溶液(OO.050mol/L).酚醜指示液(称取0.50g酚酿用乙醇(95%)溶解并定容至50ml) 3仪器 磁力搅拌器、酸度计 4分析步骤 4.1试样处理 称収5.0g〜lO.Og经切碎、研磨、均匀的试样,置于150ml烧杯中,加80ml水,煮沸浸泡0.5h,冷后移入100ml容量瓶屮,加水至刻度,混均。 丿IJ滤纸或脱脂棉过滤,滤液备用。 4.2酸度计法 吸取试样滤液10.1ml〜20.0ml于150ml锥形瓶中,加80ml水,开动磁力搅拌器,用氢氧化钠标准溶液滴定至PH&2。 同时最取90.0ml~100.0ml水做试剂空白试验。 4.3酚駄指示液滴定法 吸取试样滤液10.51〜20.0ml于150ml锥形瓶中,加50ml水,3滴3酚瞰指示液,用氢氧化讷标准溶液滴定至初现粉红色,0.5min不褪色即为终点。 同时呈取60.0ml〜70.0ml水做试剂空口试验。 5结果计算 见式 (1)・ (V,-V2)XcXO.09 mX V3 100 X100 式中: X——试样中的酸度(以乳酸计),单位为克每百克(g/100g); VI——测定川试样消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(nd); V2——试剂空111消耗氮氧化钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(ml); V3——滴定用试样溶液的体积,单位为毫升(ml); C——氢氧化钠标准溶液实际浓度看,单位为摩尔每升(mol/nil); 0.09——与1.00ml氢氧化钠标准滴定溶液(C=1.000mol/1)和当的乳酸的质量,单位为克(g) m——试样质罐,单位为克(g)o 计算结果保留两位冇效数字。 6精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对•差值不得超过算术平均值的5%. 第四章还原糖和总糖的测定 执行SB/T10213—1994酱腌菜理化检验方法 一、还原糖的测定 1试剂 斐林氏甲液: 称取硫酸铜15g及次甲基蓝0.05g溶解于1000ml蒸帑水中; 斐林氏乙液: 称取酒石酸钾钠50g,氢氧化钠54g及亚铁鼠化钾4g溶解于1000ml蒸徭水中;葡萄糖标准溶液: lg/l。 准确称取在100°C烘箱中烘至恒重的无水衙萄糖1.OOOOg放入100ml烧杯屮,用蒸僻水溶解后倒入1000ml容量的瓶屮,川蒸镭水反复冲洗烧杯,洗液一并倒入容量瓶,加浓盐酸5ml,用蒸镉水稀释至刻度。 2样品处理 样品经切碎、研磨、混合均匀后,称取5.000g〜10.000g,放入250ml烧杯中,加入蒸谓水50m】〜80ml加热近沸后浸泡半小时,冷却,定容至100ml或200ml,然后用滤纸过滤,此滤液为样品稀释液,供测定用。 3操作 3.1空白滴定 取斐林氏甲、乙液各5.00ml于150ml锥形瓶中,加入10ml蒸憾水,用糖滴管加入9ml左右lg/1衙萄糖标准溶液,摇均后加热(电炉应预热15min后使用),使其在2min内沸腾。 沸腾30s后,以3s〜4s—滴(空白滴定,预备滴定,正式滴定的速度均应保持一致)的速度匀速滴入lg/1帘j萄糖液,至蓝紫色消失即为终点。 溶液沸腾示标准糖液的耗用址应控制在0.5ml〜1ml之内,否则应重做。 记录沸腾前后共耗用标准糖液的毫升数A。 3.2预备滴定 取斐林氏甲、乙液各5・00ml于150ml锥形瓶中,加入10ml蒸馅水和样品稀释液1.00ml,根据样品含糖量的高低(估计数),用糖滴管加入不定量的lg/1葡萄糖标准溶液,摇均后加热,沸腾30s后,以3s〜4s—滴的lg/1滴入葡萄糖标准液,至蓝紫色消失即为终点。 记录沸腾前后共耗用标准糖液的毫升数。 3.3正式滴定 取斐林氏叭乙液各5.00ml于150ml锥形瓶中,加入10ml蒸憎水,加入样品稀释液 1.00ml,再用糖滴定管加入比预备滴定耗用量少0.5ml左右的lg/1葡萄糖标准液,摇均后加热,沸腾30s后,以3s〜4s—滴的速度均匀滴入lg/1葡萄糖标准液,至蓝紫色消失即为终点。 样品稀释液沸腾后,标准糖液的耗用虽必须控制在0.5ml〜51Z内,否则应重做。 记录沸腾前后共耗用标准糖液的毫升数Bo 4计算 (A-B)XC 式中: X5——样品中还原糖的含量,g/100g; A——空白滴定耗用lg/1衙萄糖标准液体积数,ml; B——止式滴定耗用lg/1葡萄糖标准液体积数,ml; C——lmllg/1制萄糖标准液的含糖量; W——所用稀释液相当样品重量,go 允许误差: 0.05g/100mlo 二、全糖的测定 1试剂 斐林溶液甲液: 称取69.3g硫酸铜,加蒸懈水溶解配成1000mlo 斐林溶液乙液: 称取346g酒石酸钾钠和100g氢氧化钠,加蒸谓水溶解,配成1000ml01%次甲基蓝指示剂、200g/l氢氧化钠溶液、100g/l磷酸氢二钠溶液、6mol/l盐酸溶液、200g/l乙酸铅溶液、2g/l甲基红指示剂[(20%V/V)乙醇溶液配制] 斐林氏溶液的标定: 在分析天平上精确称取经烘干冷却的分析纯葡萄糖0.4000g,用蒸懈水溶解,并转移到250ml容量瓶中,加水至刻度,摇均匀备用。 准确取斐林溶液甲、乙液各2.5ml,放入150ml三角瓶中,加蒸憎水20ml,置电炉上加热至沸,用配好的匍萄糖溶液滴定至溶液变红时,加入次甲基蓝指示剂1滴,继续滴定至蓝色消失鲜红色为终点。 正式滴定时,先加入比预滴定时少0.5ml〜lml的葡萄糖溶液,登电炉上煮沸加in,加甲基蓝指示剂1滴,继续用葡•萄糖溶液滴定至终点。 按下式计算其浓度: WV 250 式屮: A——5ml斐林溶液甲、乙液相当于葡萄糖的克数; W——葡萄糖的重量,g; V——滴定时消耗葡萄糖溶液的体积,ml。 2操作 样品切碎混合,精确称取3.000〜4.000g样品,置于乳钵中加入少量蒸侧水磨细,以蒸餾水洗入200ml容量瓶屮,然后加入200g/ml乙酸铅溶液1亦1〜20ml至蛋白质完全沉淀为止,并加入15ml〜20mll00g/l硫酸钠或磷酸氢二钠溶液。 至不再产生沉淀为止,加水至刻度,摇匀,过滤。 取滤液50ml,放入150迅三角瓶中,加入6ml/l盐酸10ml在70°C±rC水浴中加热lOmin,収出迅速冷却至室温加2g/l甲基红指示剂1滴,用200g/l氢氧化钠中和至中性,转移至100ml容量瓶中稀释至刻度,摇匀备用。 按标定斐林溶液甲、乙液的方法,用样品制备液替代葡萄糖溶液,测定样品中总糖。 3计算 X100 式屮: X6——样品屮全糖的含量(以葡萄糖计),g/100g; W 样品重量,g; V——滴定吋消耗样品溶液的屋,ml;允许误差: 0.5g/100ml. 4注意事项 4.1检验方法中,所用试剂除特别注明者外均为分析纯。 4.2以上每个检测项目,同一样品应做平行试验,两次测定值Z差,不得大于允许误差,取其平均值作为分析结果。 第五章二氧化硫残留的检测 执行GB/T5009.34—2003食詁中亚硫酸盐的测定 第二法蒸馅法 1原理 在密闭容器中对试样进行酸化并加热蒸饰,以释放出其屮的二氧化硫,释放物用乙酸铅溶液吸收。 吸收后用浓盐酸酸化,再以碘标准溶液滴定,根据所消耗的碘标准溶液量计算出试样中的二氧化硫含量。 木法适用于色酒及衙萄糖糖浆、果脯。 2试剂 2.1盐酸(1: 1): 浓盐酸用水稀禅1倍。 2.2乙酸铅溶液(20g/l): 称取2g乙酸铅,溶于少屋水中并稀释至100mlo 2.3碘标准溶液[C(l/2I2)=0.010mol/l]: 将碘标准溶液(0.100mol/l)用水稀释10倍 2.4淀粉指示液(10g/l): 称収可溶性淀粉,用手许水调成糊状,缓缓倾入100ml沸水中,随加随搅拌,煮沸加i
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