微生物生长曲线的测定Word格式文档下载.docx
- 文档编号:6674109
- 上传时间:2023-05-07
- 格式:DOCX
- 页数:8
- 大小:764.37KB
微生物生长曲线的测定Word格式文档下载.docx
《微生物生长曲线的测定Word格式文档下载.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《微生物生长曲线的测定Word格式文档下载.docx(8页珍藏版)》请在冰点文库上搜索。
2.酵母菌粉
3.葡萄糖粉
4.微生物之生長曲線
以菌數和時間作圖在批次培養情形下,可以菌數和時間作圖,得生長曲線。
實驗以批次培養方式進行
•遲滯期(lagphase):
微生物正適應新環境,吸收養份以合成新細胞,細胞雖變大,但仍未分裂,故細胞數目無明顯增加。
•對數期(logarithmicphase):
細胞呈幾何級數增加,菌之生理較一致,為微生物實驗最佳時期。
•穩定期(stationaryphase):
微生物代謝,消耗養分、同時產生代謝毒物,造成新分裂與死亡之菌數約略相等,因此菌數沒太大改變。
•死滅期(deathphase):
養分已漸消耗完畢,而代謝毒物累積更多,造成新生菌數遠小於死亡菌數,因此菌數遞減。
5.步驟
1.先紀錄微生物種類含來源
2.酵母菌液的配置;
取0.5g酵母菌粉和1g葡萄糖一起加入50ml
的培養液搖均勻
3.取部份菌液加入比色管(8分滿),用分光光度計測其吸光質,波
長用595nm。
→為了要做基準線的校正
4.將菌液瓶放在37°
c的培養箱振盪培養,每15分鐘取出瓶子,取
部份菌液重複做5次下列的事情:
(1)加入比色管(8分滿),用分光光度計測其吸光質,波長用
595nm。
(2)用塗碟法測菌數,要先做10倍稀釋至少4次,最後取0.1ml
的菌液滴在培養基的正中央,用滅菌的三角彎棒均勻塗抹。
注意:
菌液要先適當稀釋後才塗碟,事後再推算回去
。
5.把每個培養皿放進振盪器,隔天觀察並計算培養基菌數(個/ml)數據有六次。
六:
實驗成果:
1.2.
3.4.
5.6.
時間與吸光值紀錄表:
時間(分鐘)01530456075
吸光度值1.7251.7451.7701.7301.7231.721
時間和菌落數紀錄表:
菌落數372400?
450284240
七.問題與討論
1.說明各組實驗結果(包含數據和圖形)之生長曲線進行至哪一期?
此圖形有何意義?
(1)0-15分:
遲滯期
15-30分:
對數期
30-75分:
死滅期
要出現的穩定期沒有出現,可能因為營養物質減少的太快導致,也可能是因為去離子水沒用乾淨導致吸光度快速下降
(2)生長曲線圖可以了解微生物對某生長環境的生長能力,越適合的環境,微生物的曲線會越陡峭,環境不佳的,曲線會持平會下降。
2.測定微生物的生長曲線在微生物學上有何意義?
假設現在想要知道某種抗生素或其他藥物對某細菌是否有影響那麼可以製作含有此藥物的agar並將此菌種培養在上面然後等測出他們的生長曲線時就可以知道他們的生長情況假如發現細菌長的不好那麼就表示此藥物或抗生素能夠抑制.對抗此菌如此可去發展藥物治療此菌引起的疾病就是根據生長的情況可以知道某環境因子對微生物的影響。
3.說明分光光度計的測定原理和實驗步驟
(1)原理:
根據物質分子或離子團隊紫外線或可見光的特性吸收光譜
(2)實驗步驟:
先打開開關,設定波長,熱機至少10分,放蒸餾水作為基線後,就可放入你要測吸光度的菌液了
◎典型光譜分析儀包含的組件:
(1)光源
(2)波長選擇器(3)透明樣品槽(4)光電偵測器(5)記錄器
小組討論:
1.在這次的實驗是否有些步驟缺少或少做的?
?
再均勻塗抹菌液時沒有使用酒精殺菌消毒,是到最後一個才有使用
所以導致前面有些都沒辦法清楚分辨菌的長成。
2.實驗操作時是否有遇到比較困難無法排除的問題?
比較沒有,因為都是一些比較需要小心翼翼的步驟,所以沒有遇到比較難
的問題,只是在吸取稀釋時總不知要不要把最後一滴卡在管口的菌液等它自然流下,還是要用搖晃的。
3.計算菌的生長及數據圖有何比較怪異的情況發生?
大致上是沒有,但做起來還是跟課本有一些差異(沒有出現穩定期),感覺應該是自己操作時有些步驟或操作不當的關係,雖然每個實驗做起來一定有所差異,但總會覺得有一些些的誤差在,還要改善才行。
4.實驗時,是否會因為時間的關係而有所不同?
因為時間的關係,所以原本要一次20分鐘的實驗,改成一次15分鐘,可能數據會有些微的變化,但可能短時間的的變化,不會有太大的改變,但時間假如啦長的話,可能就會有改變,因為環境合適,時間也合適,會讓菌有更好的生長空間。
5.對於這次的實驗難易度如何?
對於這次的實驗是簡易,但需要的是時間,還有一些步驟上的注意,還有數據上的誤差等等,所以整體上是容易的,雖然是這樣,但我們還是有所忽略導致實驗數據有些誤差,下次會更注意的。
八.課外相關:
細菌生長曲線
細菌在培養液中生長情形可分四種時期:
(1)遲滯期(lagphase)、
(2)對數期
[exponential(log)phase]、(3)靜止期(stationaryphase)及(4)減數期(reduction
phase)(圖二)。
當細菌加入新的營養液中,為適應新環境要表現新的基因,以便
從環境中獲得營養成分進行複製,在這階段細菌數目並未增加,所以稱為遲滯
期。
當基因表現使細菌能進行正常複製,而進入對數期。
當環境中養分因細菌攝
取而減少,使得細菌無法進行正常複製,同時也改變基因的表現,細菌數目不再
增加,此階段稱為靜止期。
當細菌逐漸老化而死亡時,活細菌數目逐漸降低,時
間愈久活菌數目愈少,此階段稱為減數期。
圖二、細菌正常生長曲線。
1.實驗細菌有
格蘭氏陰性菌:
大腸桿菌(E.coli)、沙門氏菌(Salmonella)及格蘭氏陽性菌:
肺炎鏈球菌(Sreptococcus)及蘇利菌(Bacillusthuringiensis)
2.培養基
LBbroth:
如前章,但分別配置pH3、pH5、pH7及pH9培養液。
LBagarplate:
九.組員心得
4980N096謝勝德
第一次到實驗教室做實驗,因為是第一次,所以感覺好慌好亂,還有一點點的壓力感,但慢慢的就熟悉了,這次做的實驗一開始雖然有點小突槌,
但最後有改過來,有不懂的地方就問老師跟學長們,幸好有他們,有困惑的問題才能解決,但中間好像有個步驟沒做好,導致菌數沒辦法分辨得很清楚,但經過這次的實驗讓我們知道做實驗要更加注意和小心,不能有所疏忽,以後不會再犯這種錯了,這次操作到很多機器,都是以前沒碰過的,感覺真的很特別,以後的實驗也會繼續用到,經過這次的實驗讓我又學到更多的呢。
4980N087池政奇
我們這組這一次的實驗是做微生物之生長曲線,這是環微實驗的第一個實驗,所以感覺到非常的混亂,這個實驗中是要觀察微生物的生長情形,可是我們這組的菌類都很多,所以數據都很高,算到眼睛都快花了,實驗中更是手忙腳亂,有好多的問題要問,非常的複雜,不過總算做完了,期待下次的實驗會更好。
4980N101吳承祐
這次的實驗比較有印象的是10倍稀釋,上學期雖然有講解過要怎嚜做,但沒有親手稀釋一次真的不是說會記的起來,而且第一次上課做實驗真的不知要從哪裡下手,但經過學長的指導後就比較清楚,結束後要寫實習報告,因為這次有用到分光光度計,所以就回去翻了儀器分析課本的內容,最後雖然我們的結果不是說很好,但,大家一起同心協力完成時驗的感覺真的很好,也期許我們這組實驗的精確度一次比一次還要好!
九.組員工作參與表
學號姓名參與度
4980N096謝勝德100%
4980N087池政奇100%
4980N101吳承祐100%
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 微生物 生长 曲线 测定