新课标高中生物实验知识点文档格式.doc
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(因为组织的颜色较浅,易于观察。
2.做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3—4小时(也可用蓖麻种子)。
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
三、实验注意事项
1.可溶性糖的鉴定
a.应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70—90℃下分解成黑色CuO和水;
b.切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH)2生成。
2.蛋白质的鉴定
a.A液和B液也要分开配制,储存。
鉴定时先加A液后加B液;
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。
A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。
b.CuSO4溶液不能多加;
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
c.蛋清要先稀释;
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
3.斐林试剂与双缩脲试剂的区别:
斐林试剂
双缩脲试剂
试剂的成分
0.1g/mLNaOH溶液
0.1g/mLNaOH溶液(双缩脲试剂A)
0.05g/mLCuSO4溶液
0.01g/mLCuSO4溶液(双缩脲试剂B)
是否混合
混合后再滴加
先加双缩脲试剂A后加双缩脲试剂B
是否加热
水浴加热
不加热
*考点提示:
(1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;
淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
(2)还原性糖植物组织取材条件?
含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:
苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
(3)研磨中为何要加石英砂?
不加石英砂对实验有何影响?
加石英砂是为了使研磨更充分。
不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。
(4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?
混合的目的?
为何要现混现用?
混合后使用;
产生氢氧化铜;
氢氧化铜不稳定。
(5)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为?
浅蓝色棕色砖红色
(6)花生种子切片为何要薄?
只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。
(7)转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?
切片的厚薄不均匀。
(8)脂肪鉴定中乙醇作用?
洗去浮色。
(9)双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?
先加A液的目的?
怎样通过对比看颜色变化?
不能混合;
先加A液的目的是使溶液呈碱性;
先留出一些大豆组织样液做对比。
实验三:
观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)
实验原理:
1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。
利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
2.盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
分布:
真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;
RNA主要分布在细胞质中。
过程:
制片→水解→冲洗涂片→染色→观察
实验结果:
细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
体验制备细胞膜的方法(必修一P40)
实验材料:
人和其他哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和众多的细胞器,用这样的红细胞做实验材料就只有细胞膜一种膜结构。
实验四:
通过模拟实验探究膜的透性(必修一P60)
在一个长颈漏斗的漏斗口外密封上一层玻璃纸,往漏斗内注入蔗糖溶液,然后将漏斗浸入盛有清水的烧杯中,使漏斗管内外的液面高度相等。
过一段时间后,漏斗内液面上升。
玻璃纸(又叫赛璐玢)是一种半透膜,水分子可以透过它,而蔗糖分子则不能。
讨论:
1.漏斗管内的液面为什么会升高?
由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量,使得管内液面升高。
2.如果用一层纱布代替玻璃纸,漏斗管内的液面还会升高吗?
用纱布代替玻璃纸时,因纱布的孔隙很大,蔗糖分子也可以自由通透,因而液面不会升高。
3.如果烧杯中不是清水,而是同样浓度的蔗糖溶液,结果会怎样?
半透膜两侧溶液浓度相等时,单位时间内透过半透膜进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出水分子数量,液面不会升高。
实验五:
用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体(必修一P47)
一实验原理:
1.叶绿体的辨认依据:
叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。
2.线粒体辨认依据:
线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
3.健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色
二实验材料:
观察叶绿体时选用:
藓类的叶、黑藻的叶。
取这些材料的原因是:
叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。
若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。
因为表皮细胞不含叶绿体。
三讨论
1.细胞质基质中的叶绿体,是不是静止不动的?
不是。
呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能接受较多光照,又不至于被强光灼伤。
2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系?
叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用。
如叶绿体在不同光照条件下改变方向。
又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以接受更多的光照。
实验六观察植物细胞的吸水和失水(必修一P61“探究”)[观察植物细胞的质壁分离和复原]
1.质壁分离的原理:
当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而失水,细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。
由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。
2.质壁分离复原的原理:
当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
二
实验材料和方法:
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。
因为液泡呈紫色,易于观察。
也可用水绵代替。
0.3g/ml的蔗糖溶液。
用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。
质壁分离的方法(引流法):
制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片。
然后,从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。
这样重复几次即可。
质壁分离复原的方法:
改用清水实验。
1、条件:
细胞内外溶液浓度差,活细胞,大液泡
2、材料:
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
3、步骤:
制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
4、结论:
细胞外溶液浓度>细胞内溶液浓度,细胞失水质壁分离
细胞外溶液浓度<细胞内溶液浓度,细胞吸水质壁分离复原
知识概要:
制片观察加液观察加水观察
考点提示:
(1)洋葱为何要选紫色的?
若紫色过淡怎么办?
紫色的洋葱有紫色的大液泡,便于观察液泡的大小变化;
缩小光圈,使用平面镜,使视野变暗些。
(2)洋葱表皮应撕还是削?
为何?
表皮应撕不能削,因为削的表皮往往太厚。
(3)植物细胞为何会出现质壁分离?
动物细胞会吗?
当细胞失去水分时,其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性;
动物细胞不会发生质壁分离,因为动物细胞没有细胞壁。
(4)质壁分离时,液泡大小和颜色的变化?
复原时呢?
细胞发生质壁分离时,液泡变小,紫色加深;
当细胞质壁分离复原时,液泡变大,紫色变浅。
(5)若发生质壁分离后的细胞,不能发生质壁分离复原,其原因是什么?
细胞已经死亡(可能是外界溶液浓度过大,细胞失水过多或质壁分离时间过长)
(6)高倍镜使用前,装片如何移动?
若要把视野中上方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向上移动。
若要把视野中左方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向左方移动,因为显微镜视野中看到的是倒像。
(7)换高倍物镜后,怎样使物像清晰?
视野明暗度会怎样变化?
如何调亮?
换高倍物镜后,应调节细准焦螺旋使物像变得清晰;
视野会变暗,可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。
(8)所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系?
目镜越长,放大倍数越小;
物镜越长,放大倍数越大。
(9)物像清晰后,物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系?
物镜与载玻片之间的距离越小,放大倍数越大。
(10)总放大倍数的计算方法?
放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数?
总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积;
放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。
(11)放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系?
放大倍数越大,视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。
(12)更换目镜,若异物消失,则异物在目镜上;
更换物镜,若异物消失,则异物在物镜上、移动载玻片,若异物移动,则异物在载玻片上。
(13)怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度?
①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。
某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。
三
讨论
1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什么现象?
表皮细胞维持原状,因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时,红细胞会不会发生质壁分离?
不会。
因为红细胞不具细胞壁。
实验七比较过氧化氢在不同条件下的分解(必修一P78)[探究影响酶活性的因素]
一实验原理
鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。
经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。
二实验注意事项
1.不让H2O2接触皮肤,H2O2有一定的腐蚀性
2.不可用同一支滴管,由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性
3.肝脏研磨液必须是新鲜的,因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低
4.肝脏研磨要充分,研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积。
实验七影响酶活性的条件(必修一P83)
1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注:
市售a-淀粉酶的最适温度约60℃
实验八探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)
1.酵母菌是一种单细胞真菌,在有氧和无氧的条件下都能生存,属于兼性厌氧菌,因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。
方程式(略)
2.CO2可使澄清石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测酵母菌培养CO2的产生情况。
3.橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与乙醇(酒精)发生化学反应,在酸性条件下,变成灰绿色。
注意事项:
增加水中氧气的方法:
用橡皮球或气泵通入空气,并用NaOH溶液除去空气中的CO2
实验九
叶绿体色素的提取和分离(必修一P97)
一
实验原理与方法
1.色素的提取原理:
叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于无水乙醇等有机溶剂中。
提取方法:
用无水乙醇等能提取色素。
2.色素分离的原理:
层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。
叶绿体中的色素不只一种,它们都能溶解在层析液中。
然而,它们在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
分离方法:
纸层析法。
用毛细吸管在滤纸条的下端沿铅笔线划一条滤液细线,待滤液干后再划一两次,然后将滤纸条插入层析液中(滤液细线不能接触层析液)。
分离结果:
滤纸条上从上到下出现四条色素带:
橙黄色(最窄,胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(最宽,叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b)。
胡萝卜素与叶黄素之间距离最大,叶绿素a与叶绿素b之间距离最小。
1.加SiO2为了研磨得更充分。
2.加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。
因为叶绿素含镁,可被细胞液中的有机酸产生的氢代替,形成去镁叶绿素,CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸,防止叶绿体被破坏。
3.加无水乙醇是因为叶绿体色素易溶于无水乙醇等有机溶剂。
三实验讨论:
1.滤纸条上的滤液细线,为什么不能触及层析液?
滤纸条上的滤液细线如触及层析液,滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中,实验就会失败。
2.提取和分离叶绿体色素的关键是什么?
提取叶绿体色素的关键是:
①叶片要新鲜、浓绿;
②研磨要迅速、充分;
③滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。
分离叶绿体色素的关键是:
一是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;
二是层析液不能没及滤液线。
实验十观察有丝分裂
1、材料:
洋葱根尖(葱,蒜)
2、步骤:
(一)洋葱根尖的培养
(二)装片的制作
制作流程:
解离→漂洗→染色→制片
1.解离:
药液:
质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1:
1混合液).
时间:
3—5min.目的:
使组织中的细胞相互分离开来.
2.漂洗:
用清水漂洗约3min.目的:
洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.
3.染色:
用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3—5min
目的:
使染色体着色,利于观察.
4.制片:
将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片.目的:
使细胞分散开来,有利于观察.
(三)观察
1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞:
细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。
2、换高倍镜下观察:
分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。
(注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点)。
其中,处于分裂间期的细胞数目最多。
(1)培养根尖时,为何要经常换水?
增加水中的氧气,防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。
(2)培养根尖时,应选用老洋葱还是新洋葱?
应选用旧洋葱,因为新洋葱尚在休眠,不易生根。
(3)为何每条根只能用根尖?
取根尖的最佳时间是何时?
因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂;
上午10时到下午2时;
因为此时细胞分裂活跃。
(4)解离和压片的目的分别是什么?
压片时为何要再加一块载玻片?
解离是为了使细胞相互分离开来,压片是为了使细胞相互分散开来;
再加一块载玻片是为了受力均匀,防止盖玻片被压破。
(5)若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么?
压片时用力过大。
(6)解离过程中盐酸的作用是什么?
丙酮可代替吗?
分解和溶解细胞间质;
不能,而硝酸可代替。
(7)为何要漂洗?
洗去盐酸便于染色。
(8)细胞中染色最深的结构是什么?
染色最深的结构是染色质或染色体。
(9)若所观察的细胞各部分全是紫色,其原因是什么?
因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂;
分生区的特点是:
细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞处于分裂状态;
不能用高倍镜找分生区,因为高倍镜所观察的实际范围很小,难以发现分生区。
(10)为何要找分生区?
分生区的特点是什么?
用高倍物镜找分生区吗?
染液浓度过大或染色时间过长。
(11)分生区细胞中,什么时期的细胞最多?
间期;
因为在细胞周期中,间期时间最长。
(12)所观察的细胞能从中期变化到后期吗?
不能,因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。
(13)观察洋葱表皮细胞能否看到染色体?
不能,因为洋葱表皮细胞一般不分裂。
(14)若观察时不能看到染色体,其原因是什么?
没有找到分生区细胞;
没有找到处于分裂期的细胞;
染液过稀;
染色时间过短。
实验十一
细胞大小与物质运输的关系(必修一P110)[模拟探究细胞表面积与体积的关系]
一.实验原理:
用琼脂块模拟细胞。
琼脂块中含有酚酞,与NaOH相遇,呈紫红色,可显示物质(NaOH)在琼脂块中的扩散速度。
方法:
用含酚酞的琼脂块模拟细胞。
2、现象:
NaOH和酚酞相遇呈紫红色。
二.结论:
琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小;
NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比随着琼脂块的增大而减小。
实验十二观察细胞的减数分裂
1、目的要求:
通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、位置和数目,加深对减数分裂过程的理解。
2、材料用具:
蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,显微镜。
3、方法步骤:
(1)在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。
(2)先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞,再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。
4、讨论:
(1)如何判断视野中的一个细胞是处于减数第一次分裂还是减数第二次分裂?
(2)减数第一次分裂与减数第二次分裂相比,中期细胞中的染色体的不同点是什么?
末期呢?
实验十三低温诱导染色体加倍
1、原理:
用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制纺锤体的形成,以致影响染色体被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是,植物细胞染色体数目发生变化。
2、方法步骤:
(1)洋葱长出约1cm左右的不定根时,放入冰箱的低温室内(4℃),诱导培养36h。
(2)剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm,放入卡诺氏液中浸泡0.5~1h,以固定细胞的形态,然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。
(3)制作装片:
(4)观察,比较:
视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.
3、讨论:
秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍,这两种方法在原理上有什么相似之处?
实验十四调查常见的人类遗传病
1、要求:
调查的群体应足够大;
选取群体中发病率较高的单基因遗传病。
如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等.
2、方法:
分组调查,汇总数据,统一计算.
3、计算公式:
某种遗传病的发病率=(患病人数/被调查人数)×
100%
4、讨论:
所调查的遗传病的遗传方式,发病率是否与有关资料相符,分析原因.
实验十五探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用
1、常用的生长素类似物:
NAA(萘乙酸),2,4-D,IPA(苯乙酸).IBA(吲哚丁酸)等
2、方法:
①浸泡法:
把插条的基部浸泡在配置好的溶液中,深约3cm,处理几小时或一天。
处理完毕就可以扦插了。
这种处理方法要求溶液的浓度较低,并且最好是在遮荫和空气湿度较高的地方进行处理。
②沾蘸法:
把插条的基部在浓度较高的药液中蘸一下(约5s),深约1.5cm即可。
3、预实验:
先设计一组浓度梯度较大的实验进行探索,在此基础上设计细致的实验.
4、实验设计的几项原则:
①单一变量原则(只有溶液的浓度不同);
②等量原则(控制无关变量,即除溶液的浓度不同外,其他条件都相同);
③重复原则(每一浓度处理3~5段枝条);
④对照原则(相互对照、空白对照);
⑤科学性原则
实验十六模拟尿糖的检测
1、取样:
正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、检测方法:
斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸
3、结果:
(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析:
因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。
实验十七探究培养液中酵母菌数量的动态变化
1、培养酵母菌(温度、氧气、培养液):
可用液体培养基培养
2、计数:
血球计数板(2mm×
2mm方格,培养液厚0.1mm)
3、推导计算
根据7天所统计的酵母菌种群数量画出酵母菌种群数量的增长曲线;
推测影响影响酵母菌种群数量变化的因素。
实验十八土壤中动物类群丰富度的研究
1、丰富度的统计方法通常有两种:
记名计算法和目测估计法
记名计算法:
指在一定面积的样地中,直接数出各种群的个体数目,这一般用于个体较大,种群数量有限的群落。
目测估计法:
按预先确定的多度等级来估计单位面积上个体数量的多少。
等级的划分和表示方法有:
“非常多、多、较多、较少、少、很少”等等。
2、设计数据收集和统计表,分析所搜集的数据。
实
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- 新课 标高 生物 实验 知识点