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生物科技行业预防分子生物学习题集
(生物科技行业)预防分子生物学习题集
分子生物学复习题
第十九章分子生物学常用技术
壹、单选题
1.“SourthernBlotting”指的是
(A)将DNA转移到膜上,用DNA做探针杂交(B)将RNA转移到膜上,用DNA做探针杂交
(C)将DNA转移到膜上,用蛋白质做探针杂交(D)将RNA转移到膜上,用RNA做探针杂交
(E)将DNA转移到膜上,用RNA做探针杂交
2.分子杂交试验不能用于
(A)单链DNA分子之间的杂交(B)单链DNA和RNA分子之间的杂交
(C)抗原和抗体分子之间的结合(D)双链DNA和RNA分子之间的杂交
(E)RNA和RNA之间的杂交
3.探针是经过什么标记的核酸分子
(A)用放射性同位素标记(B)用生物素标记(C)用地高辛标记(D)A、B、C都对(E)用抗体标记
4.下列哪壹条在分子印渍技术中不适用
(A)DNA向NC膜转移(B)蛋白质向PVDF膜转移(C)DNA向尼龙膜转移
(D)RNA向NC膜转移(E)蛋白质向壹号滤纸转移
5.用于核酸杂交的探针至少应符合下列哪条
(A)必须是双链DNA(B)必须是双链RNA(C)必须是单链DNA(D)必须是100bp之上的大分子DNA
(E)必须是蛋白质
6.核酸斑点杂交试验中可省略的步骤是
(A)电泳(B)核酸样品固定于NC膜(C)杂交信号检测(D)标记探针E)制备样本核酸
7.免疫印渍技术中不适合应用的步骤是
(A)聚丙烯酸胺凝胶电泳(B)用NC膜或PVDF膜(C)靠毛细管作用进行转移(D)用同位素标记抗体(E)用非同位素标记抗体
8.原位杂交是指
(A)在NC膜上进行杂交操作(B)在组织切片或细胞涂片上进行杂交操作(C)直接将核酸点在NC膜上的杂交(D)在PVDF膜上进行杂交操作(E)在凝胶电泳中进行的杂交
9.有关DNA链末端终止法的不正确说法是
A)需要ddNMP(B)需要ddNTP(C)dNTP:
ddNTP的比例要合适(D)需要放射性同位素或荧光染料(E)需要dNTP
10.有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是
(A)用荧光代替了同位素标记(B)激光扫描分析代替人工读序(C)基本原理和手工测序相同(D)不再需要引物(E)需要和手工序列分析相同的模板
11.某种遗传性疾病是由壹个点突变(无限制性内切酶位点变化)引起,能够
(A)用DNA单链构象多态性分析突变(B)用限制性片段长度多态性分析突变C)用WesternBlotting分析突变(D)用电泳分析基因组DNA(E)用电泳分析细胞中的所有蛋白质
12.免疫印渍技术指的是
(A)结合在膜上的蛋白质分子和抗体分子结合B)结合在膜上的DNA分子和抗体结合(C)结合在膜上的RNA分子和抗体结合(D)结合在膜上的DNA分子和RNA分子结合(E)结合在膜上的免疫分子和DNA的结合
13.同位素标记探针检测NC膜上的RNA分子
(A)叫做NorthernBlotting(B)叫做SouthernBlotting(C)叫做WesternBlotting(D)蛋白分子杂交(E)免疫印渍杂交
14.用做探针的DNA分子必须
(A)在杂交前变性(B)在杂交前复性(C)长于30个核着酸(D)短于30个核着酸(E)是双链分子
二、填空题
1.只要DNA或RNA的单链分子之间存在着壹定程度的__________,就能够在不同的分子间形成__________。
2.利用__________使胶中的生物大分子或大分子的片段__________,可使之成为固相化分子。
3.存在于NC膜上的生物分子能够放到杂交液中,和__________进行__________。
4.Southernblotting主要用于__________的分析,也能够用于__________。
5.Northernblotting主要用于检测__________的表达水平以及比较__________表达情况。
6.蛋白质的印渍分析,也称为__________。
7.目前DNA序列的手工测定或自动化测定所基于的技术原理壹为__________,二为__________法。
8.限制性片段长度多态性分析(RFLP)是利用__________DNA分子再经__________即可检测出突变DNA。
9.基因转移技术包括__________水平的基因转移,而且能够进行__________水平的转移。
10.在转基因技术中,被导人的目的基因称为__________,目的基因的受体动物称为__________。
11.单链构象多态性分析(SSCP)的原理基于DNA单链具有__________特点,这种特点的形成取决于__________。
12.就克隆壹个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体必须具备三个部分:
、、。
壹个理想的质粒载体最好分子量。
13.为了防止DNA的自身环化,可用脱去双链DNA。
14.噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源DNA片段后,总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。
15.受体细胞的感受态是______。
人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为___________时吸附DNA,__________时摄入DNA。
16.A/Tcloning是利用Taq酶的性质。
17.RNA干扰过程中三个重要组成元件是,,和。
18.PCR扩增反应中壹个循环的三个步骤依次是,,和。
19.用于荧光定量PCR标记的Taqman水解探针是在PCR循环中的阶段中发光。
20DNA芯片的原理为,蛋白质芯片的原理为。
21.常规PCR技术是对PCR扩增反应的进行定性及定量分析;荧光定量PCR技术对PCR扩增反应中的产物进行定量分析。
22.PCR反应体系中除了含有Mg2+的缓冲体系外,仍要具备、
和等四大要素。
23.假定表达壹个编码某种蛋白质的基因,必须考虑其表达载体的三个基本条件:
(1)______
(2)___________________
(3)____________________________。
24.较常用的定点诱变方法壹般有俩种即和。
25.基因克隆时,应根据所要分离的外源基因的大小选择合适的载体,这些载体通常包含有λ噬菌体、YAC以及、和等。
26.蛋白质双向电泳中的第壹向和第二向分别是和
27.噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源DNA片段后,总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。
28.为了防止DNA的自身环化,可用脱去双链DNA。
29.载体按照功能可分为载体和载体俩类。
三、名词解释题
1.DNA印渍技术2.RNA印渍技术3.蛋白质印渍技术
4.探针(probe)5.基因敲除6.限制性片段长度多态性分析(RFLP)
7.DNA芯片8..RT-PCR9.CT值10.感受态细胞
11.双向电泳12.单链多态构象分析(SSCP)13.定点诱变技术
14.实时定量PCR15.SiRNA16.TaqMan探针17.DNA指纹图谱
五、问答题
1.核酸分子杂交的主要实验方法有哪些?
主要用途是什么?
2.基因转移和基因剔除技术在医学上可能有哪些用途?
3.简述RFLP和SSCP检测基因突变的原理。
4.简述DNA末端合成终止法测定DNA序列的原理?
5.PCR的基本原理是什么?
用PCR扩增某壹基因,必须预先得到什么样的信息?
6.简述将壹个基因从mRNA到克隆到表达载体的过程(列出所需关键的酶和注意点)?
7.简述用RNAi技术减低目的基因表达水平的机理?
8.酵母双杂交的原理是什么?
9.引物是PCR反应体系的四大要素之壹,PCR的许多应用都是通过引物设计来实现的,请问引物设计的壹般原则是什么?
10.何为α-互补?
如何利用α-互补来筛选插入了外源DNA的重组质粒?
11.何谓基因克隆?
简述基因克隆的基本过程。
第二十章基因重组和基因工程
壹.选择题
1.F因子从壹个细胞转移至另壹个细胞的基因转移过程称为
(A)转导(B)转化(C)转座(D)转染(E)接合
2.通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型,称为
(A)转化(B)转座(C)接合(D)转导(E)转染
3.由插人序列和转座子介导的基因移位或重排称为
(A)接合(B)转染(C)转导(D)转座(E)转化
4.由整合酶催化、在俩个DNA序列的特异位点间发生的整合称
(A)位点特异的重组(B)同源重组(C)随机重组(D)基本重组(E)人工重组
5.限制性核酸内切酶切割DNA后产生
(A)5’磷酸基和3’羟基基团的末端(B)5’磷酸基和3’磷酸基团的末端(C)5’羟基和3’羟基基团的末端(D)3’磷酸基和5’羟基基团的末端(E)之上都不是
6.可识别且切割特异DNA序列的称
(A)非限制性核酸外切酶(B)限制性核酸内切酶(C)限制性核酸外切酶(D)非限制性核酸内切酶(E)DNA酶(DNase)
7.在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA
(A)解链酶(B)聚合酶(C)连接酶(D)内切酶(E)拓扑酶
8.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指
(A)建立多克隆抗体(B)建立单克隆抗体(C)有性繁殖DNA(D)无性繁殖DNA(E)构建重组DNA分子
9.在下述双链DNA序列(仅列出其中壹条链序列)中不属于完全回纹结构的是
(A)GGAATTCC(B)TGAATTCA(C)AGAATTCT(D)CGTTAAGC(E)AGATATCT
10.无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是
(A)卡那霉素抗性(B)青霉素抗性(C)自我复制能力(D)自我表达能力(E)自我转录能力
11.在已知序列的情况下获得目的DNA最常用的是
(A)筛选cDNA文库(B)筛选基因组文库(C)化学合成法(D)聚合酶链式反应(E)DNA合成仪合成
12.重组DNA技术领域常用的质粒DNA是
(A)T病毒基因组DNA的壹部分(B)细菌染色体外的独立遗传单位(C)细菌染色体DNA的壹部分(D)真核细胞染色体外的独立遗传单位(E)真核细胞染色体DNA的壹部分
13.某限制性内切核酸酶按GGG▼CGCCC方式切割产生的末端突出部分含
(A)l个核苷酸(B)2个核苷酸(C)3个核苷酸(D)4个核苷酸(E)5个核苷酸
14.某限制性内切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生
(A)5’突出末端(B)5’或3’突出末端(C)5’及3’突出末端(D)3’突出末端(E)平末端
15.直接针对目的DNA进行筛选的方法是
(A)氨苄青霉素抗药性(B)青霉素抗药性(C)分子杂交(D)分子筛(E)电泳
16.“克隆”某壹目的DNA的过程不包括
(A)重组DNA分子导人受体细胞(B)外源基因和载体的拼接(C)基因载体的选择和构建(D)筛选且无性繁殖含重组分子的受体细胞
(E)表达目的基因编码的蛋白质
17.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是
(A)酵母表达体系(B)原核表达体系(C)E.coli表达体系(D)昆虫表达体系(E)哺乳类细胞表达体系
18.不能用作克隆载体的DNA是
(A)质粒DNA(B)噬菌体DNA(C)细菌基因组DNA(D)腺病毒DNA(E)逆转录病毒DNA
19.克隆的基因组DNA可在多种系统表达,例外的是
(A)E.coli表达体系(B)昆虫表达体系(C)酵母表达体系(D)哺乳动物细胞表达体系
二、填空题
1.通过自动获取或人为地供给外源_________,使细胞或培养的受体细胞获得新的_________,这就是转化作用。
2.由_________和_________介导的基因移位或重排,称为转座。
3.基因重组有俩种类型,即_________和_________。
6.壹个完整的基因克隆过程应包括:
目的基因的获取,_________的选择和改造,_________的连接,重组DNA分子导人受体细胞,筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。
7.限制性核酸内切酶是壹类识别_________的_________核酸酶。
8.科学家感兴趣的外源基因又称_________,其来源有几种途径:
化学合成,酶促合成cDNA,制备的基因组DNA及_________技术。
9.外源DNA离开染色体是不能复制的。
将_________和_________连接,构建成重组DNA分子,外源DNA则可被复制。
10.根据采用的克隆载体性质不同,将重组DNA分子导人细菌的方法有_________、_________及感染。
三、名词解释题
1.质粒2.限制性内切酶3,载体4.DNA克隆5.目的基因
6.cDNA文库7.基因组DNA文库8.回文结构9.转座
四、问答题
1.何谓基因克隆?
简述基因克隆的基本过程。
2.何谓限制性核酸内切酶?
写出大多数限制性核酸内切酶识DNA序列的结构特点。
3.何谓目的基因?
写出其主要来源或途径。
4.解释质粒,为什么质粒可作为基因载体。
5.解释基因载体,说出哪些DNA可作为基因的载体。
6.简述E.coli和真核表达体系各自的优、缺点。
7.何为α-互补?
如何利用α-互补来筛选插入了外源DNA的重组质粒?
8.为了绘制长为3.0KbBamHⅠ限制性片段的限制性图谱,分别用EcoRⅠ、HpaⅡ、EcoRⅠ+HpaⅡ消化这个片段的三个样品,然后通过凝胶电泳分离DNA片段,EB染色后观察DNA带型(如下图)。
请根据这个结果,绘制壹个限制性内切图谱,要标明EcoRⅠ和HpaⅡ识别位点间的相对位置,以及它们之间的距离(Kb)。
9.打算在细菌中表达壹种稀有的人类某种蛋白质,以便能够大量制备这种蛋白。
为确保分离纯化,决定将壹段6个组氨酸的短肽加到该蛋白质的N端或C端。
这些带有组氨酸标签的蛋白质能够紧紧地同Ni2+柱结合,但很容易被EDTA或咪唑溶液洗脱。
此法能够壹步完成大量蛋白质的纯化。
下图是编码该蛋白的核苷酸序列。
请设计壹对PCR引物,各含有18个同该基因同源的核苷酸,能够用于扩增该基因的编码序列,另外,在N端有壹个起始密码,其后是6个组氨酸密码子(组氨酸密码子为CAT)。
另外设计壹对引物,能够在C端加上6个组氨酸和壹个终止密码。
N末端
MATRRAA
5’-GGTCGTATGGCTACTCGTCGCGCTGCT………………………
………………………CTTGCTGCAAGTCTCTCTTAGAAGTGT-3’
LAASLS*
C末端
第二十壹章基因诊断和基因治疗
壹、选择题
1.内源基因的变异且不包括
(A)基因结构突变(B)基因重排(C)病原体基因侵人体内(D)基因表达异常(E)基因扩增
2.病原体基因侵人人体主要引起哪种疾病?
(A)遗传病(B)肿瘤(C)心血管疾病(D)传染病(E)高血压
3.内源基因结构突变发生在生殖细胞可引起哪种疾病?
(A)遗传病(B)肿瘤(C)心血管疾病(D)传染病(E)高血压
4.下列何种方法不是基因诊断的常用技术方法
(A)核酸分子杂交(B)基因测序(C)细胞培养(D)RFLP分析(E)PCR
5.目前认为最为确切的基因诊断方法是
(A)核酸分子杂交(B)基因测序(C)细胞培养(D)RFLP分析(E)PCR
6.下列哪种方法不是目前基因治疗所采用的方法
(A)基因缺失(B)基因矫正(C)基因置换(D)基因增补(E)自杀基因的应用
7.目前基因治疗中选用最多的基因载体是
(A)质粒(B)噬菌体(C)脂质体(D)逆转录病毒(E)腺病毒相关病毒
8.下列哪种方法不属于非病毒介导基因转移的物理方法?
(A)电穿孔(B)脂质体介导(C)DNA直接注射法(D)显微注射(E)基因枪技术
9.下列哪种方法属于非病毒介导基因转移的化学方法?
(A)电穿孔(B)基因枪技术(C)DNA直接注射法(D)显微注射(E)DEAE壹葡聚糖法
10.利用正常机体细胞中不存在的外源基因所表达的酶催化药物前体转变为细胞毒性产物而导致细胞死亡的基因治疗方法是
(A)基因灭活(B)基因矫正(C)基因置换(D)基因增补(E)自杀基因的应用
11.利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是
(A)基因灭活(B)基因矫正(C)基因置换(D)基因增补(E)自杀基因的应用
12.通过目的基因的非定点整合,使其表达产物补偿缺陷基因的功能或加强原有功能的基因治疗方法是
(A)基因灭活(B)基因矫正(C)基因置换(D)基因增补(E)自杀基因的应用
13.将变异基因进行修正的基因治疗方法是
(A)基因灭活(B)基因矫正(C)基因置换(D)基因增补(E)自杀基因的应用
二、填空题
1.基因变异致病的主要类型是__________和__________。
2.内源基因的变异可分为__________和__________。
3,基因诊断的常用诊断技术是__________和__________。
4.对已知基因突变位点的检测需人工合成俩种寡核着酸探针,壹种是和________互补的寡核苷酸,另壹种是和________互补的寡核苷酸。
5.目前用作基因转移载体的病毒有逆转录病毒__________和__________。
6.目前基因治疗中导人基因的方式有__________和__________。
7.在体外实验研究中,将基因导人哺乳动物细胞的方法有__________和__________俩大类。
8.非病毒介导的基因转移方法可分为__________和__________俩类。
三、名词解释题
1.基因诊断2.自杀基因3.基因治疗4.RFLP5Exvivo
四、问答题
1.基因诊断的特点是什么?
2.试述内源基因结构突变的主要类型以及内源基因结构突变所致的疾病。
3.简述核酸分子杂交的基本原理。
4.目前基因诊断可应用于哪些疾病?
5.当前基因治疗拟采用哪些方法?
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